三江源區(qū)燕麥根際PGPR菌株功能多樣性研究

關(guān)鍵詞：燕麥;固氮菌;溶磷能力;土壤理化性質(zhì);菌株功能多樣性

植物根際促生菌（Plantgrowth-promotingrhizobacteria，PGPR）是指一類(lèi)自由生活在土壤中或附生在植物的根際、莖葉上，能分泌物質(zhì)和促進(jìn)植物利用物質(zhì)以及通過(guò)抑制其它有害物質(zhì)來(lái)促進(jìn)植物生長(zhǎng)的有益菌類(lèi)[1]。多數(shù)PGPR 可通過(guò)生物固氮、解鉀、產(chǎn)生鐵載體、產(chǎn)生植物激素等特性促進(jìn)植物生長(zhǎng)[2];也可通過(guò)增加土壤養(yǎng)分供應(yīng)，提高植物根表面積和對(duì)養(yǎng)分的吸收能力，改善土壤狀況等方式影響作物的生長(zhǎng);同時(shí)具有拮抗病原真菌，耐逆等優(yōu)良特性[3]。常見(jiàn)的根際促生菌有假單孢菌屬（Pseudomonas）、芽孢桿菌屬（Bacillus）、農(nóng)桿菌屬（Agrobacterium）、埃文氏菌屬（Eriwinia）、黃桿菌屬（Flavobacterium）、巴斯德氏菌屬（Pasteuria）、沙雷氏菌屬（Serratia）、腸桿菌屬（Enterobacter）等[4]。研究表明大部分根際微生物對(duì)植物不存在危害性，1%～2%的菌落能促進(jìn)植物生長(zhǎng)發(fā)育[5-7]，只有少數(shù)的根際微生物有害。因此，深入挖掘三江源高寒草地中的PGPR資源來(lái)促進(jìn)高原植物生長(zhǎng)、防治病害及保護(hù)生態(tài)具有重要意義。

燕麥（Avennasativa L.）是一年生草本植物，為禾本科燕麥屬[9]，具有耐寒、耐旱、易栽培、生產(chǎn)潛力大、對(duì)土壤適用性強(qiáng)等優(yōu)良品性，可作為高寒地區(qū)重要牧草品種來(lái)加以廣泛推廣栽培[10]，這對(duì)推進(jìn)高寒畜牧業(yè)的可持續(xù)發(fā)展有著重大意義。因此，可從三江源不同高寒地區(qū)燕麥根際取樣，分離篩選PGPR，以期得到功能優(yōu)異的菌株用于生態(tài)保護(hù)。

三江源區(qū)海拔高、氣候寒冷、人口增長(zhǎng)過(guò)快、土壤侵蝕嚴(yán)重、年平均氣溫逐年升高，再加上放牧過(guò)載、嚙齒動(dòng)物及害蟲(chóng)猖獗等[11]因素導(dǎo)致高寒草甸退化加快。由于其特殊的環(huán)境而受到各位專(zhuān)家學(xué)者的廣泛關(guān)注，目前該地區(qū)研究多在人類(lèi)活動(dòng)對(duì)草地植被生長(zhǎng)的影響、土壤侵蝕、退化高寒草甸群落特征、草地產(chǎn)量與載畜關(guān)聯(lián)性等方面展開(kāi)[12-13]。涉及根際微生物和草地微生物的研究主要在三江源地區(qū)高寒草原土壤微生物活性和微生物量、根際土壤微生物的多樣性和低溫乳酸菌的篩選及利用等方面[14]，而關(guān)于植物根際促生菌PGPR 的研究較少。張萬(wàn)通等[8]研究表明，在高寒草地中PGPR菌肥代替30%的氮肥，可增加土壤含水量和土壤全氮含量，從而促進(jìn)植物生長(zhǎng)、達(dá)到保護(hù)生態(tài)環(huán)境的目的。綜上可知，一株優(yōu)良的植物根際促生菌具有優(yōu)良的功能特性，有很好的開(kāi)發(fā)利用價(jià)值，在促進(jìn)植物生長(zhǎng)、抗病、耐逆及生態(tài)恢復(fù)等領(lǐng)域有較大的應(yīng)用空間。燕麥作為優(yōu)質(zhì)的牧草，本身不僅可為脆弱生態(tài)系統(tǒng)恢復(fù)提供草種，在西北高寒地區(qū)廣泛種植[15]，同時(shí)其根際分布著優(yōu)良的PGPR資源，從三江源區(qū)燕麥根際分離優(yōu)良的PGPR 菌株對(duì)三江源高寒草地的恢復(fù)具有重要意義。

本文以三江源地區(qū)不同地域主要栽培牧草燕麥為研究對(duì)象，從燕麥根際分離篩選PGPR 菌株，研究其數(shù)量、功能多樣性，并分析根際土壤特性和根際促生菌數(shù)量間的相關(guān)關(guān)系，研究功能優(yōu)良的PGPR菌株的生物學(xué)特性，這對(duì)為三江源地區(qū)功能微生物資源的研究、開(kāi)發(fā)利用提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，收集優(yōu)良的PGPR菌株資源有著重要意義。

1 材料與方法

1.1 樣品采集

本研究采樣地點(diǎn)位于三江源地區(qū)海南州貴南縣、海南州同德牧場(chǎng)、黃南州河南縣優(yōu)干寧鎮(zhèn)、黃南州同仁縣瓜什則鄉(xiāng)、海北州海晏縣西莎線(xiàn)、海北州海晏縣西海鎮(zhèn)牧草試驗(yàn)站、玉樹(shù)州稱(chēng)多縣珍秦鎮(zhèn)珍秦站和海南州共和縣倒淌河鎮(zhèn)地區(qū)，燕麥樣地基本特征如表1所示。在每個(gè)樣地中隨機(jī)選取5個(gè)樣點(diǎn)，采集0～20cm 燕麥根系及土壤樣品，用毛刷輕輕地將根上0～5mm 的土壤刷下作為根際土，低溫保存并迅速帶回實(shí)驗(yàn)室。

1.2 燕麥PGPR 菌株的篩選及數(shù)量統(tǒng)計(jì)

稱(chēng)取燕麥根際土壤10g 于錐形瓶中，加入90mL0.85%的無(wú)菌生理鹽水，充分振蕩20min，取1mL菌懸液加入到盛有9mL0.85%無(wú)菌生理鹽水的試管，依次制得10-5稀釋梯度懸液。吸取懸液50μL均勻涂布于固氮培養(yǎng)基、無(wú)機(jī)磷培養(yǎng)基和蒙金娜有機(jī)磷培養(yǎng)基上。倒置20min，于28℃培養(yǎng)3d后統(tǒng)計(jì)固氮菌、溶磷菌的數(shù)量，根據(jù)公式（菌數(shù)=（菌落平均數(shù)×稀釋倍數(shù)）/干土重量）計(jì)算PGPR的數(shù)量。

1.3 土壤化學(xué)性質(zhì)的測(cè)定

堿解氮含量：堿解擴(kuò)散法。全氮含量：半微量凱氏定氮法。速效磷含量：碳酸氫鈉浸提-鉬銻抗比色法。全磷含量：酸溶-鉬銻抗比色法。速效鉀含量：醋酸銨浸提-火焰光度計(jì)法。全鉀含量：酸溶-火焰光度計(jì)法。土壤pH 值：電導(dǎo)法。有機(jī)質(zhì)含量：重鉻酸鉀高溫外熱氧化-容量法。

1.4 不同地域燕麥PGPR 菌株特性研究

1.4.1 不同地域燕麥根際固氮菌的固氮特性研究

在無(wú)菌的5mL固氮培養(yǎng)基的血清小瓶中接種固氮菌，每個(gè)菌株重復(fù)3次，以等量的無(wú)菌培養(yǎng)基為對(duì)照（CK）。置入培養(yǎng)箱中28℃ 下培養(yǎng)5d。抽取1mL氣體再注入每個(gè)小瓶1mLC2H4 氣體，置入培養(yǎng)箱中28℃下培養(yǎng)48h。用無(wú)菌微量注射器從各樣品瓶中抽取氣體50μL注入氣相色譜儀（型號(hào)：GC7890F）進(jìn)樣柱中，測(cè)定C2H4 峰的生成情況。制作C2H4 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，用外標(biāo)法計(jì)算C2H4 量。

1.4.2 不同地域燕麥根際溶磷菌的溶磷特性研究 定性：在無(wú)機(jī)磷培養(yǎng)基和蒙金娜有機(jī)磷培養(yǎng)基平板上接種菌株，在28℃培養(yǎng)8d，測(cè)定菌株的直徑（d）和溶磷圈直徑（D）。根據(jù)D/d值初步篩選溶磷菌。

定 量：吸取菌懸液500μL（OD660=1.00）接種于有機(jī)磷及無(wú)機(jī)磷液體培養(yǎng)基中。每菌株設(shè)3個(gè)重復(fù)，以不接菌為對(duì)照。在28℃，160r·min-1下震蕩培養(yǎng)10d，測(cè)定培養(yǎng)液pH，置于4℃，10000r·min-1條件下離心15min，吸取5mL上清液置入150mL三角瓶中，加入50mL0.5mol·L-1碳酸氫鈉浸提劑，加一勺無(wú)磷活性炭粉，封口后置搖床中振蕩30min，用無(wú)磷濾紙過(guò)濾。吸取10mL濾液置入50mL容量瓶中，加入5mL鉬銻抗顯色劑，搖勻，定容，室溫靜置30min，在700nm下比色。

1.4.3 不同地域燕麥PGPR 菌株的分泌吲哚乙酸（Indoleaceticacid，IAA）特性研究 配制金氏培養(yǎng)基，吸取菌懸液500μL（OD660=1.00）接種于錐形瓶中。28℃，150r·min-1條件下培養(yǎng)12d。吸取50μL 懸浮液滴入白色陶瓷板，分別加入50μLSalkowski比色液，對(duì)照則不加比色液;在室溫條件下，15min內(nèi)觀察顏色變化。顏色變粉紅色表示能分泌IAA，顏色越深表示分泌IAA 能力越強(qiáng)，不變色，即不分泌IAA。定量：將培養(yǎng)液置于高速離心機(jī)中，10000r·min-1、4℃條件下離心10min，吸取5mL上清液，并加5mL比色液，室溫黑暗中靜置30min，在530nm 下測(cè)吸光值，從IAA 濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)查出相應(yīng)值計(jì)算IAA 含量。

1.5 16SrDNA 基因序列的鑒定

采用Ezup柱式細(xì)菌基因組DNA 抽提試劑盒（來(lái)源：生工生物工程（上海）有限公司，貨號(hào)為SK8255）提取細(xì)菌DNA;合成引物（來(lái)源：生工合成部合成）。選取16SrDNA擴(kuò)增的通用引物，其序列為：F，5-AGTTTGATCMTGGCTCAG-3;R，5-GGTTACCTTGTTACGACTT-3。PCR 體系：引物0.5μL，Tempplate（基因組DNA20～50ng·μL-1）0.5μL，10×Buffer（withMg2+ ）2.5μL，dNTP （各25mM）1μL、酶0.1μL、ddH2O25μL。PCR反應(yīng)條件：95℃4min;94℃ 45s，55℃ 45s，72℃ 1min，30個(gè)循環(huán);72℃10min。將16SrDNA 基因擴(kuò)增產(chǎn)物純化后測(cè)序，測(cè)序結(jié)果通過(guò)NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行BLAST比對(duì)。

1.6 數(shù)據(jù)處理

采用Excel2019進(jìn)行數(shù)據(jù)整理，運(yùn)用SPSS7.0進(jìn)行單因素方差分析（One-wayANOVA），進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)（Plt;0.05）。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同地域燕麥PGPR 的數(shù)量多樣性

由表2可知，從不同地域燕麥根際分離到固氮菌、溶解無(wú)機(jī)菌和溶解有機(jī)磷菌3類(lèi)PGPR菌株，不同地域燕麥PGPR 菌株的數(shù)量存在極顯著的差異（Plt;0.01），不同地域燕麥PGPR菌株、根際固氮菌、溶解無(wú)機(jī)磷菌、溶解有機(jī)磷菌的數(shù)量分別為9.30～48.83cfu·kg-1，3.13～24.07cfu·kg-1，0.54～23.10cfu·kg-1，1.43～12.87cfu·kg-1。其中，TR31和TD6樣地燕麥PGPR 菌株差異顯著（Plt;0.05），顯著高于其他6個(gè)樣地;ZQ 樣地燕麥PGPR菌株的數(shù)量顯著低于其他7 個(gè)樣地（P lt;0.05）。TR31樣地燕麥根際固氮菌的數(shù)量顯著高于其他7個(gè)樣地，XHZY和ZQ2樣地燕麥根際固氮的數(shù)量顯著低于其他6個(gè)樣地;DTH1樣地燕麥根際溶解無(wú)機(jī)磷菌株的數(shù)量顯著高于其他7個(gè)樣地，XSXY樣地燕麥根際溶解無(wú)機(jī)磷菌株的數(shù)量顯著低于其他7個(gè)樣地（Plt;0.01）。各樣地燕麥根際溶解有機(jī)磷菌株差異顯著（Plt;0.05），TD16，HN27樣地燕麥根際溶解有機(jī)磷菌株差異顯著（Plt;0.01），顯著高于其他6個(gè)樣地。

2.2 不同地域燕麥根際土壤理化性質(zhì)

燕麥根際土壤堿解氮含量、全氮含量、速效磷含量、全磷含量、速效鉀含量、全鉀含量、pH 值、有機(jī)質(zhì)含量存在極顯著性差異（Plt;0.01）（表3）。GN03燕麥根際堿解氮含量為275mg·kg-1，顯著高于其他燕麥根際的（P lt;0.01）。DTH1（129 mg·kg-1），TR31（112mg·kg-1）燕麥堿解氮含量較低。TD16燕麥根際速效磷含量為74.50mg·kg-1，顯著高于其他燕麥根際的（P lt; 0.01）。HN27（5.60mg·kg-1），TR31（7.20mg·kg-1）燕麥根際速效磷含量最低，顯著低于DTH1（25.90mg·kg-1），ZQ2（22.50 mg·kg-1 ）（P lt;0.01）;TD16（3.25g·kg-1）燕麥根際全磷含量最高，與其他燕麥根際的存在顯著性差異（Plt;0.05）。燕麥根際土壤pH 值在7.66～8.61之間，呈堿性;ZQ2（62.56g·kg-1）燕麥根際有機(jī)質(zhì)含量最高，XSXY（53.23g·kg-1），GN03（53.24g·kg-1）燕麥根際有機(jī)質(zhì)含量較高，三者顯著高于其他燕麥根際的（Plt;0.01）。

2.3 不同地域燕麥根際土壤理化性質(zhì)與PGPR 菌株數(shù)量相關(guān)性分析

不同地域燕麥根際土壤理化性質(zhì)與PGPR 菌株數(shù)量存在一定的相關(guān)性（表4）。在一定范圍內(nèi)，根際土壤全氮含量與PGPR 菌株數(shù)量存在顯著的負(fù)相關(guān)關(guān)系（P lt;0.05），根際全磷含量、速效鉀含量、土壤pH 值、有機(jī)質(zhì)含量與PGPR菌株數(shù)量存在顯著的正相關(guān)關(guān)系（Plt;0.05）。

2.4 不同地域燕麥PGPR 菌株功能多樣性

2.4.1 不同地域燕麥根際固氮菌的固氮酶活性 采用乙炔還原法測(cè)定86株固氮菌的固氮酶活性，標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)方程為y=17249x+14987（R2=0.9995）。31株固氮菌具有較強(qiáng)的固氮性能，固氮活性（表5）在116.91～655.26nmolC2H4·h-1·mL-1之間，各菌株間以及與對(duì)照組相比，固氮酶活性存在極顯著性差異（Plt;0.01）。菌株N-4HN272c（655.26nmolC2H4 ·h-1 ·mL-1）和菌株N-3TR312a（622.34nmolC2H4·h-1·mL-1）顯著高于其他固氮菌和對(duì)照的測(cè)定值（Plt;0.01）。

2.4.2 不同地域燕麥根際溶磷菌溶磷特性 采用平板溶磷圈法和液培鉬銻抗比色法測(cè)定供試溶磷菌的溶磷能力。標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)為y=1.2009x-0.0415（R2=0.997），由表6可知，4株溶解無(wú)機(jī)磷的菌株D/d值在1.35～3.28 之間，溶磷量在15.17～26.16μg·mL-1 之間，3 株菌株有效磷增量為5.48～10.99 μg· mL-1，顯著高于菌株IP-3DTH13a（16.95μg·mL-1）和對(duì)照組（Plt;0.01）。由表7 可知，溶解有機(jī)磷菌株有19 株，D/d值在0.95～2.90 之間，溶磷量在16.63～22.08μg·mL-1 之間， 其中OP-3TR311c 及OP-4DTH13b溶磷量分別為22.08μg·mL-1，21.68μg·mL-1，顯著高于其他株菌株和對(duì)照組（P lt;0.01），分別來(lái)自于TR31和DTH1樣地。

對(duì)溶磷量與培養(yǎng)液pH 值、D/d值的相關(guān)性進(jìn)行分析，由表8可知，溶解無(wú)機(jī)磷菌株的溶磷量與培養(yǎng)液pH 值存在一定的負(fù)相關(guān)性，與D/d值存在極顯著的正相關(guān)性;溶解有機(jī)磷菌株的溶磷量與培養(yǎng)液pH 值和D/d值存在一定的正相關(guān)性。

2.4.3 不同地域燕麥PGPR 菌株的分泌IAA 特性 采用顯色法和Salkowski比色法測(cè)定120株P(guān)GPR菌株的IAA 分泌能力（表9），回歸方程為y=92.445x2+8.0936x+0.498（R2=0.982）。結(jié)果顯示，29株菌株具有顯色反應(yīng)，占供試菌株的24.2%，分泌IAA 量在2.69 ～ 118.85μg·mL-1之間。其中，菌株N-3HN273a（118.85μg·mL-1）和菌株N-3HN271a（116.05μg·mL-1）分泌的IAA 量顯著高于其他菌株和對(duì)照組（P lt;0.01）。

2.5 優(yōu)良PGPR 菌株16SrDNA 序列鑒定

使用雙引物對(duì)擴(kuò)增成功的9株P(guān)GPR菌株（圖1）的16SrDNA 序列進(jìn)行測(cè)定。

將測(cè)得的9株P(guān)GPR菌株的16SrDNA 序列登錄GenBank進(jìn)行BLAST檢索，與已經(jīng)報(bào)道的菌株的16SrDNA 序列進(jìn)行同源性比較（表10）。同源性結(jié)果顯示，6株菌株為假單胞菌屬Pseudomonassp.，1株菌株為短小芽孢桿菌屬Bacilluspumilussp.，2株菌株為節(jié)桿菌屬Arthrobactersp.。

3 討論

目前，根際促生菌的研究多在根際固氮菌和溶磷菌方面展開(kāi)，根際促生菌數(shù)量高于非根際的[16-18];本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)植物根際固氮性能較強(qiáng)的菌株數(shù)量較多，溶磷性能較強(qiáng)的菌株比較少;相關(guān)根際促生菌研究中也發(fā)現(xiàn)植物根際固氮菌較多，溶磷菌較少[19-20]，與本試驗(yàn)結(jié)果一致。但因?yàn)椴煌瑓^(qū)域氣候條件不同，并且根際促生菌的宿主植物不同，導(dǎo)致固氮溶磷菌比例不同的具體原因有待深究。本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)燕麥根際全氮含量、全磷含量、速效鉀含量、pH 值、有機(jī)質(zhì)含量與PGPR菌株多樣性相關(guān)，而菌株多樣性也受燕麥根際土理化性質(zhì)的影響。遠(yuǎn)兵強(qiáng)等[21]發(fā)現(xiàn)根際促生菌（PGPR）處理下可提高土壤有機(jī)質(zhì)（OM）、全量養(yǎng)分（TN，TP，TK）、速效養(yǎng)分（AN，AP，AK）含量及土壤酶活性。于洋等[22]對(duì)河北省木蘭圍場(chǎng)華北落葉松人工林土壤微生物與土壤理化性質(zhì)的相關(guān)性進(jìn)行了分析，發(fā)現(xiàn)土壤微生物的數(shù)量與土壤理化性質(zhì)存在一定相關(guān)性，土壤細(xì)菌、放線(xiàn)菌的數(shù)量與土壤全氮和有機(jī)質(zhì)含量的相關(guān)性最高，這與本文中不同地域燕麥根際土壤理化性質(zhì)與PGPR菌株數(shù)量間的相關(guān)性一致。在一定范圍內(nèi)，根際土壤全氮含量與PGPR 菌株數(shù)量存在顯著的負(fù)相關(guān)關(guān)系，根際全磷含量、速效鉀含量、土壤pH 值、有機(jī)質(zhì)含量與PGPR菌株數(shù)量存在顯著的正相關(guān)關(guān)系。胡忠學(xué)[23]以河北省塞林壩機(jī)械林場(chǎng)的落葉松林業(yè)區(qū)域的土壤為研究對(duì)象，發(fā)現(xiàn)土壤微生物數(shù)量與土壤理化性質(zhì)相互影響，在lt;20cm 的土壤層中，土壤微生物數(shù)量與土壤理化性質(zhì)存在負(fù)相關(guān)性，這也與本文結(jié)果一致。推測(cè)可能是由于農(nóng)田通過(guò)人工施肥和翻耕改變了土壤的相關(guān)性質(zhì)[24]，進(jìn)而影響土壤微生物的數(shù)量與群落結(jié)構(gòu)。通過(guò)測(cè)定燕麥田地根際土壤微生物的數(shù)量結(jié)構(gòu)及土壤理化性質(zhì)，可以探究不同燕麥地優(yōu)良PGPR 菌株在土壤恢復(fù)中發(fā)揮作用的潛力。

吳瑛等[25]發(fā)現(xiàn)根際促生菌具有固氮、溶磷和分泌植物生長(zhǎng)激素等特性，固氮弧菌屬、巴西固氮螺菌和重氮營(yíng)養(yǎng)葡萄糖酸桿菌已被報(bào)道在控制條件下通過(guò)固氮增加宿主植物生物量，因此本文中燕麥根際較多的固氮菌也可能通過(guò)一定途徑來(lái)促進(jìn)植株健康生長(zhǎng)。覃麗金等[26]從10種‘熱研2號(hào)’柱花草根際篩選出9株溶解無(wú)機(jī)磷菌株和6株溶解有機(jī)磷菌株，發(fā)現(xiàn)根際溶解無(wú)機(jī)菌溶磷能力最高可達(dá)216.57mg·L-1;本試驗(yàn)分離篩選得到4株溶解無(wú)機(jī)磷菌、3株溶解有機(jī)磷菌;有效磷增量在5.31～10.99μg·mL-1之間，并且發(fā)現(xiàn)溶解無(wú)機(jī)磷菌株的溶磷量與培養(yǎng)液pH 值存在一定的負(fù)相關(guān)性，與D/d值存在極顯著的正相關(guān)。鄭紅麗等[27]從內(nèi)蒙古四子王旗燕麥根際中分離出2株溶磷能力較強(qiáng)的菌株，并且兩菌株還具有耐鹽性，由此可以推測(cè)本試驗(yàn)中篩選得到的菌株也可能具有一定的抗逆能力，從而促進(jìn)植物更好的發(fā)育。張英等[28]從三葉草根際篩選出10株溶磷菌，發(fā)現(xiàn)該菌株還具有較強(qiáng)的分泌IAA能力，分泌量為0.36～20.39mg·L-1，可促進(jìn)植物生長(zhǎng);本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)分泌IAA 能力較強(qiáng)的菌株數(shù)量較多，IAA 分泌量較高，在20.64～118.85μg·mL-1之間，能夠通過(guò)為燕麥生長(zhǎng)提供生長(zhǎng)素來(lái)增加其產(chǎn)量。張凱曄等[29]分離出的BacillusSC60 可分泌IAA 和溶解無(wú)機(jī)磷，提高種子活力，促進(jìn)胚根發(fā)育。接種根際促生菌可以促進(jìn)植物生長(zhǎng)[30-32]，推測(cè)本文中不同地區(qū)燕麥生長(zhǎng)過(guò)程中優(yōu)良PGPR菌株對(duì)種子萌發(fā)、胚胎發(fā)育貢獻(xiàn)了一定作用，其促生機(jī)制為：植物根際促生菌株產(chǎn)生IAA，并促進(jìn)其寄主植物的生長(zhǎng)，IAA 含量升高，內(nèi)源的ABA 和JA 也隨之升高[33]，通過(guò)調(diào)節(jié)內(nèi)源激素水平促進(jìn)植物生長(zhǎng)。席琳喬等[34]為燕麥接種固氮菌，采用15N 同位素稀釋法測(cè)定其地下根系部分為1.0921%～1.2751%，植株全氮含量增加2.08%～39.58%;姚拓等[35]同樣為燕麥接種固氮菌，發(fā)現(xiàn)大多固氮菌均能提高燕麥的株高、根長(zhǎng)、根表面積和生物量，由此可見(jiàn)，本文中優(yōu)異固氮菌對(duì)不同燕麥地燕麥植株的生長(zhǎng)提供了一定的助力，從而使其生物量有所增加。本文從不同燕麥根際分離篩選PGPR菌株，以期為三江源地區(qū)功能微生物資源的研究、開(kāi)發(fā)利用提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，收集優(yōu)良的PGPR菌株資源助力三江源高寒草地的恢復(fù)。

4 結(jié)論

從三江源不同地域燕麥根際土壤共篩得優(yōu)異的固氮菌31株、溶磷菌5株、產(chǎn)吲哚乙酸菌13株。各地區(qū)土壤堿解氮、全氮、速效磷、全磷、速效鉀、全鉀和有機(jī)質(zhì)含量以及pH 值存在極顯著性差異（Plt;0.01）。土壤全氮含量與PGPR 數(shù)量呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，根際全磷含量、速效鉀含量、土壤pH 值、有機(jī)質(zhì)含量與PGPR 數(shù)量呈正相關(guān)關(guān)系。燕麥根際優(yōu)良PGPR多屬于假單胞菌屬Pseudomonassp.、短小芽孢桿菌屬Bacilluspumilussp.和節(jié)桿菌屬Arthrobactersp.。