妊娠晚期陰道微生態改變與GBS感染的關系探究

【摘要】 目的：探討妊娠晚期陰道微生態改變與B族鏈球菌（GBS）感染的關系。方法：選取2022年1月—2023年1月九江市婦幼保健院收治的疑似GBS感染的妊娠晚期孕婦80例，將生殖道GBS檢測陽性的妊娠晚期孕婦40例納入陽性組，另將生殖道GBS檢測陰性的妊娠晚期孕婦40例納入陰性組。比較兩組患者陰道微生態指標（功能學指標、陰道菌群密集度、陰道菌群多樣性、陰道清潔度、Nugent評分），采用多因素logistic回歸分析妊娠晚期GBS感染與陰道微生態改變的相關性。結果：單因素分析結果顯示，陽性組過氧化氫（H2O2）、白細胞酯酶（LE）、唾液酸苷酶（SNA）、β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶（NAG）陽性率均高于陰性組，pH值、陰道清潔度、陰道菌群密集度、陰道菌群多樣性異常率及BV診斷率均高于陰性組（P<0.05）。多因素logistic回歸分析結果顯示，低H2O2、高LE、高pH值、陰道清潔度異常、高Nugent評分是GBS感染的獨立危險因素（P<0.05）。結論：陰道微生態改變與GBS感染密切相關，臨床應重視對妊娠晚期孕婦H2O2、LE、pH值、陰道清潔度及Nugent評分的評估，以便對GBS感染進行早期診斷和干預。

【關鍵詞】 妊娠晚期 陰道微生態 B族鏈球菌

Relationship Exploration between Vaginal Microecology Changes and GBS Infection in Late Pregnancy/TONG Lu， WEN Xiao， DUAN Jiaqing. //Medical Innovation of China， 2024， 21（27）： -135

[Abstract] Objective： To explore the relationship between vaginal microecology changes and group B streptococcus （GBS） infection in late pregnancy. Method： A total of 80 gravidas in late pregnancy with suspected GBS infection admitted to Jiujiang Maternal and Child Health Hospital from January 2022 to January 2023 were selected， 40 gravidas in late pregnancy with positive of genital tract GBS detection were included in the positive group， and 40 gravidas in late pregnancy with negative genital tract GBS detection were included in the negative group. Vaginal microecology indicators （functional indicators， vaginal flora density， vaginal flora diversity， vaginal clearing degree， Nugent score） were compared between the two groups. Multivariate logistic regression was used to analyze the relationship between GBS infection and vaginal microecology changes in late pregnancy. Result： Univariate analysis showed that the positive rates of hydrogen peroxide （H2O2）， leukocyte esterase （LE）， sialidases （SNA） and N-acetyl-β-glucosaminidase （NAG） in the positive group were higher than those in the negative group， and the abnormal rate of pH value， vaginal clearing degree， vaginal flora density， vaginal flora diversity and BV diagnostic rate were higher than those in the negative group （P<0.05）. Multivariate logistic regression analysis showed that low H2O2， high LE， high pH value， abnormal vaginal clearing degree and high Nugent score were independent risk factors for GBS infection （P<0.05）. Conclusion： Vaginal microecology changes are closely related to GBS infection. Clinical evaluation of H2O2， LE， pH， vaginal clearing degree and Nugent score of gravidas in late pregnancy should be emphasized for early diagnosis and intervention of GBS infection.

[Key words] Late pregnancy Vaginal microecology Group B streptococcus

First-author's address： Department of Laboratory， Jiujiang Maternal and Child Health Hospital， Jiujiang 332000， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2024.27.030

正常情況下陰道微生態環境呈弱酸性動態平衡狀態，各種微生物之間相互影響、制約，以維持微生態平衡。但當出現機體免疫功能低下等情況時，陰道酸性環境容易被破壞，易出現菌群失調[1]。B族鏈球菌（GBS）廣泛存在于人體泌尿生殖系統中，孕婦作為特殊群體，陰道黏膜形態發生改變，且普遍存在免疫力低下、內分泌失調等問題，致使GBS感染發生率普遍較高[2]。相關統計學研究表明我國每年孕產婦GBS定植率可達14.52%[3]。此外，GBS感染具有帶菌量大、易傳播等特點，易發生上行傳染，導致產褥期感染、陰道出血、早產等發生率增加，威脅孕產婦生命和安全[4]。再者，該菌垂直傳播率高達50%，易傳播給胎兒或新生兒，增加新生兒胎膜早破、新生兒肺炎等疾病發生風險，使胎兒或新生兒死亡風險增加[5]。目前，已有研究表明妊娠晚期GBS感染的發生、發展與陰道微生態系統功能失衡之間存在一定聯系[6]。本研究對妊娠晚期陰道微生態改變與孕婦GBS感染的關系展開研究，旨在為臨床GBS感染的預防、控制及管理提供參考，現詳述如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

將2022年1月—2023年1月九江市婦幼保健院收治的80例疑似GBS感染孕婦作為研究對象。（1）納入標準：①單胎妊娠；②無羊水過多、妊娠期糖尿病等妊娠合并癥或妊娠并發癥；③意識、認知正常；④年齡20～35歲；⑤孕28～40周；⑥無生殖器官畸形；⑦有尿路感染，頭暈頭痛，惡心嘔吐，發熱，腰痛等疑似GBS感染癥狀。（2）排除標準：①合并其他陰道病原菌感染；②近1個月內服用過阿莫西林等抗菌藥物或進行過陰道局部用藥；③臨床資料不完整；④GBS感染復發；⑤早產。根據生殖道GBS檢測結果將GBS陽性的40例妊娠晚期孕婦納入陽性組，另將GBS陰性的40例妊娠晚期孕婦納入陰性組。本研究經本院醫學倫理委員會批準，且患者及家屬均知情同意本研究。

1.2 方法

1.2.1 GBS檢查 取膀胱截石位，使用無菌棉試紙獲取孕婦子宮頸分泌物標本，使用實時熒光定量聚合酶鏈式反應（PCR）分析儀（杭州安譽科技有限公司，AGS4800）采用實時熒光定量PCR法檢測GBS，試劑盒購自江蘇碩世生物科技股份有限公司。

1.2.2 功能學指標 取膀胱截石位，在孕婦陰道低位1/3處取分泌物，使用陰道炎多項檢測試劑盒（江蘇碩世生物科技股份有限公司，50人份/盒）采用干化學酶法對過氧化氫（H2O2）、白細胞酯酶（LE）、唾液酸苷酶（SNA）、β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶（NAG）及pH值進行檢測。H2O2<2 μmol/L為陽性，LE≥9 U/L為陽性，SNA≥7 U/L為陽性，NAG≥

0.1 U/mL為陽性，pH值≥4.6視為異常。

1.2.3 陰道清潔度 將陰道分泌物置于高倍顯微鏡（江西鳳凰光學科技有限公司，XSP-30）下觀察，根據桿菌、球菌、上皮細胞及白細胞數量將陰道清潔度分為Ⅰ～Ⅳ度，其中Ⅰ、Ⅱ度為陰道清潔度正常，Ⅲ、Ⅳ度為陰道清潔度異常[7]。

1.2.4 陰道菌群密集度 于高倍油鏡（奧林巴斯株式會社，SZX16）下觀察陰道分泌物標本，根據每高倍視野下細菌數劃分等級，其中Ⅱ級（10～99個）、Ⅲ級（≥100個）為正常，Ⅰ級（1～9個）、Ⅳ級（細菌聚集成團/密集覆蓋黏膜上皮細胞）為異常[8]。

1.2.5 陰道菌群多樣性 于高倍油鏡下觀察陰道分泌物標本細菌種類，根據辨別的細菌種類劃分，Ⅱ級（4～6種）、Ⅲ級（7～9種）為正常，Ⅰ級（1～3種）、Ⅳ級（≥10種）為異常[9]。

1.2.6 Nugent評分 包括乳桿菌（0～4分）、加德納菌及類桿菌（0～4分）、染色不定的彎曲桿菌（1～

2分）3項，總分1～10分，Nugent評分≤3分為正常、4分≤Nugent評分≤6分為中間型[疑似細菌性陰道病（BV）]，7分≤Nugent評分≤10分為BV[10]。

1.3 統計學處理

采用SPSS 22.0分析數據。計數資料用率（%）表示，組間行字2檢驗；計量資料以（x±s）表示，組間行t檢驗；采用多因素logistic回歸分析妊娠晚期孕婦GBS感染影響因素。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組基線資料比較

陽性組孕周28～40周，平均（36.85±1.96）周；

年齡22～34歲，平均（28.17±5.35）歲；孕次1～5次，平均（2.36±0.65）次；產次1～3次，平均（1.51±0.32）次。陰性組孕周28～40周，平均（37.04±1.72）周；年齡21～35歲，平均（28.83±6.12）歲；孕次1～4次，平均（2.18±0.53）次；產次1～3次，平均（1.47±0.27）次。兩組基線資料比較，差異均無統計學意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 妊娠晚期GBS感染單因素分析

單因素分析結果顯示：陽性組H2O2、LE、SNA、NAG陽性率均高于陰性組，pH值、陰道清潔度、陰道菌群密集度、陰道菌群多樣性異常率及BV診斷率均高于陰性組（P<0.05），見表1。

2.3 妊娠晚期GBS感染多因素分析

以GBS為應變量（陽性=1，陰性=0），以H2O2（陽性=1，陰性=0）、LE（陽性=1，陰性=0）、SNA（陽性=1，陰性=0）、NAG（陽性=1，陰性=0）、pH值（異常=1，正常=0）、陰道清潔度（異常=1，正常=0）、陰道菌群密集度（異常=1，正常=0）、陰道菌群多樣性（異常=1，正常=0）、Nugent評分（BV=1，正常、疑似=0）為自變量進行賦值。logistic多因素回歸分析結果顯示：低H2O2、高LE、高pH值、陰道清潔度異常及高Nugent評分是妊娠晚期GBS感染的獨立危險因素（P<0.05），見表2。

3 討論

陰道微生態系統由陰道微生物群、免疫系統等組成，對維持陰道的正常酸性環境、預防病原菌過度繁殖有積極意義[11]。GBS寄生于女性生殖道，是女性陰道微生物群的重要組成部分，正常情況下與其他陰道菌群處于共生狀態，具有一定防御和保護能力。但由于妊娠期婦女陰道分泌物和雌激素分泌增加，導致陰道酸性環境易被破壞，加快細菌滋生，造成菌群結構失衡，導致GBS感染風險增加[12]。研究表明部分妊娠晚期GBS感染患者雖無典型臨床表現，但GBS易通過陰道上行感染至子宮腔，破壞孕婦胎膜屏障，引發早產、胎膜早破，威脅母嬰生命[13]。因此，早期發現GBS感染對提高母嬰健康狀況有積極意義。目前臨床尚缺乏統一的GBS篩查方法，雖然可以通過預防性使用抗生素來降低GBS感染發病率，但該方法易增加細菌對抗生素的耐藥性和新生兒敗血癥發生風險[14]。國外已有研究表明陰道菌群失調與GBS感染有一定相關性，但我國對二者關系仍處于研究階段[15]。

本研究對陰道功能學指標展開研究，結果發現陽性組H2O2、LE陽性率及pH值異常率均高于GBS陰性組，且多因素logistic回歸分析結果顯示低H2O2、高LE及高pH值是造成GBS感染的獨立危險因素。分析原因，乳酸桿菌為陰道微生態系統的優勢菌，在正常陰道菌群中高達50%～80%，不僅具有干擾、抑制致病菌生長黏附、提高機體免疫調節功能的作用，還能夠將糖原分解為乳酸，調節陰道pH值，此外，其還能抑制多種條件致病菌生長，故陰道菌群缺乏乳酸桿菌的女性更有可能GBS感染[16]。陰道分泌物H2O2濃度與乳酸桿菌數量和功能密切相關，正常女性陰道菌群中約96%的乳酸桿菌具有生產H2O2的能力，H2O2濃度降低表明乳酸桿菌數量減少、功能減退，其抗菌作用也隨之減弱，GBS感染發生率上升[17]。此外，張萍萍等[18]研究表明GBS感染患者pH值異常率明顯高于GBS陰性患者，本研究結果與之一致。分析原因在于，當陰道pH值上升時，乳酸桿菌生長、繁殖受限，陰道防御機制遭到破壞，GBS黏附數量增加，GBS感染風險也隨之增加。LE存在于中性粒細胞，是機體炎癥反應的重要指標，陰道分泌物LE陽性常提示患者存在陰道炎癥。黃亞軍等[19]研究表明GBS感染組LE水平高于非感染組，本研究結果與之一致。分析原因在于，當陰道發生炎癥反應時，GBS能夠通過蛋白酶水解和細胞吞噬作用侵襲機體，導致GBS感染。此外，受炎癥反應影響，機體免疫應答機制受到影響，患者自身抵抗和清除有害細菌的能力減弱，導致GBS感染風險增加。

本研究陽性組陰道清潔度異常率高于陰性組，且陰道清潔度異常是導致GBS感染發生的獨立危險因素，這與董衛國等[20]研究結果相似。分析原因，陰道清潔度反映陰道菌群環境，良好的清潔度能夠維持陰道生態環境穩定。當陰道清潔度下降時，優勢菌群發生改變，陰道白細胞數量增多，GBS、氣單胞菌等在陰道內大量繁殖導致菌群失調，且這些微生物使陰道分泌物生化成分發生改變，產生的氨類、有機酸及酶類等物質導致陰道pH值升高，并造成局部炎癥反應加重，為GBS感染創造條件。Nugent評分是反映加德納菌等細菌的重要指標[21]。本研究陽性組BV診斷率明顯高于GBS陰性組，提示Nugent評分升高，GBS感染風險增加。Gilbert等[22]對加德納菌與妊娠婦女GBS定植的關系展開研究，結果發現同時接種GBS和加德納菌的妊娠小鼠GBS感染風險是未接種加德納菌的10倍。此外，曹清蕓等[23]研究表明Nugent評分與GBS感染呈正相關，考慮與BV導致患者陰道內環境失調有關，但目前其作用機制相關研究較少，仍需進一步證實。

綜上所述，陰道微生態改變與GBS感染密切相關，H2O2降低、LE升高、pH值升高、陰道清潔度異常、Nugent評分升高，GBS感染風險也隨之增加。

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（收稿日期：2024-02-19） （本文編輯：陳韻）