哈茨木霉、貝萊斯芽孢桿菌PYB-17菌劑對玉米莖基腐病防效及根際微生物多樣性影響

摘"要：為探究哈茨木霉（Trichoderma harziensis）、貝萊斯芽孢桿菌（Bacillus velezensis）PYB-17菌劑對由禾谷鐮孢菌（Fusarium graminearum）引起的玉米莖基腐病（Maize stem rot）防效及根際微生物多樣性影響，本研究采用盆栽試驗對玉米進行人工接菌，并設置單獨施用500倍哈茨木霉粉劑、單獨施用500倍貝萊斯芽孢桿菌PYB-17可濕性粉劑、混施500倍哈茨木霉粉劑與500倍貝萊斯芽孢桿菌PYB-17可濕性粉劑、清水對照處理，重復3次。處理后35 d調查玉米莖基腐病病情指數，計算防效。并利用16S rRNA和ITS測序，分析各處理對根際微生物多樣性影響。結果表明，單獨施用哈茨木霉粉劑、貝萊斯芽孢桿菌PYB-17可濕性粉劑對玉米莖基腐病防效分別為63.86%和61.01%，混施500倍哈茨木霉、貝萊斯芽孢桿菌PYB-17菌劑防治效果為67.82%。混施兩種菌劑對根際土壤細菌和真菌多樣性影響較大，ASV增加，Chao1指數和ACE指數均明顯高于清水對照，特別是細菌中芽孢桿菌屬（Bacillus）和真菌中木霉屬（Trichoderma）、毛殼菌屬（Chaetomium）豐度顯著增加，說明施用哈茨木霉粉劑和貝萊斯芽孢桿菌PYB-17可濕性粉劑后使根際土壤微生物種類更豐富，提高了有益菌豐度。本研究為哈茨木霉、貝萊斯芽孢桿菌PYB-17菌劑防控玉米莖基腐病提供了依據。

關鍵詞：哈茨木霉;貝萊斯芽孢桿菌PYB-17;玉米莖基腐病;防效;微生物多樣性

中圖分類號：S154""文獻標識碼：A""文章編號：0488-5368（2025）03-0087-11

Effects of Trichoderma harziensis and Bacillus velezensis PYB-17 Microbial

Agents on Control of Maize Stem Rot and Rhizosphere Microbial Diversity

HONG He1， LI Rong2， WANG Yanbin2， ZHANG Hongjuan2， LIU Jiehui2， ZHAO Fang2， WANG Chunjing1， XIE Xiansheng2

（1. College of Plant Protection，Shanxi Agricultural University， Taigu， Shanxi 030801， China;2. Institute of Wheat Research，Shanxi Agricultural University， Linfen， Shanxi 041000， China）

Abstract： "To investigate the efficacy of Trichoderma harziensis and Bacillus velezensis PYB-17 biocontrol agents against maize stem rot caused by Fusarium graminearum and their impact on rhizosphere microbial diversity，this study artificially inoculated potted maize and applied treatments of 500 times diluted B. velezensis PYB-17 wettable powder alone， a mixture of 500 times diluted T. harziensis powder and B. Velezensis PYB-17 wettable powder， and a water control， with each treatment repeated three times. Thirty-five days after treatment， the maize stem rot disease index was surveyed and efficacy calculated. Using 16S rRNA and ITS sequencing， the impact of each treatment on rhizosphere microbial diversity was analyzed. The results showed that the efficacy of T. harziensis powder alone and B. velezensis PYB-17 wettable powder alone against maize stem rot was 59.40%and 55.44%， respectively. The combined application of both biocontrol agents at 500 times dilution had a control efficacy of 66.37%. The mixed application of the two biocontrol agents had a significant impact on the diversity of rhizosphere soil bacteria and fungi， with a reduced disease index. The mixed application of the two biocontrol agents had a significant impact on the diversity of rhizosphere soil bacteria and fungi， with an increase in ASV， and the Chao1 and ACE indices were significantly higher than those of the water control. Particularly， the abundance of Bacillus in bacteria and Trichoderma and Chaetomium in fungi significantly increased， indicating that applying T. harziensis powder and B. velezensis PYB-17 wettable powder enriched the variety of soil microbes in the rhizosphere and increased the abundance of beneficial microbes. This study provides a basis for the control of maize stem rot by T. harziensis and B. velezensis PYB-17 biocontrol agents.

Key words：Trichoderma harziensis; Bacillus velezensis PYB-17; Maize stem rot; Control effect; Microbial diversity

玉米是全球第一大種植作物，我國玉米種植面積大約占全球總面積的21.76%，產量占全球總產量的23.1%。近年來我國玉米播種面積和產量呈現逐年上升的趨勢[1]"，然而以禾谷鐮孢菌（Fusarium graminearum）為主的玉米莖基腐病嚴重威脅了玉米的生產。目前，生產上常用化學種衣劑來防治這種病害[2]。但化學農藥的過量使用會導致病原菌的抗藥性增加和防效降低，同時對環境和人畜健康造成嚴重威脅。土壤微生物種類繁多，是土壤中最活躍、最豐富的生物群落[3，4]，對陸地養分循環至關重要[5]。這些微生物與植物根部營養關系密切[6～8]，能直接為植物提供無機營養（如氮、磷等礦質元素）和有機營養（如氨基酸、維生素、生長素等），從而促進植物生長[9，10]，某些生防微生物還能抑制植物病害的發生。種植者可以通過改善施肥和耕作制度、引入生防微生物等措施來提高土壤微生物多樣性，恢復原有的微生物群落，從而有效解決作物連作障礙和土傳病害等問題[11]。

利用生防菌劑調控土壤微生物已成為一個國際研究熱點。甄靜等[12]研究顯示，施用復合菌劑20 d和40 d后，土壤微生物的平均每孔吸光值及Shannon、Simpson和McIntosh指數較對照有所提高。梁繼華等人的

研究[13]表明，不同土壤改良劑的處理可以顯著影響根際微生物，為玉米提供更適宜的生長環境，并增加土壤微生物數量。李海云等人的研究[14]發現，施用復合微生物菌劑及施肥處理對玉米不同生育期根際土壤微生物群落有顯著影響。楊春林等人發現[15]哈茨木霉UN-2產β-葡聚糖酶粗酶液對立枯絲核菌和禾谷絲核菌的菌絲生長和菌核萌發有明顯的抑制作用。王馨芳等[16]研究結果顯示貝萊斯芽孢桿菌BQ對引起黨參根腐病的尖孢鐮孢菌DS菌絲生長和孢子萌發有明顯抑制作用。因此，作為植物與土壤之間重要的媒介，根際土壤微生物在植物生長發育中扮演著重要角色[17～21]。

本研究探討了哈茨木霉粉劑和本實驗室研制的以貝萊斯芽孢桿菌為主要成分的PYB-17可濕性粉劑對玉米莖基腐病的防治效果。通過施用這兩種具有生防特性的微生物菌劑，并利用16S rRNA和ITS擴增子測序技術，分析了它們對玉米根際微生物多樣性影響。明確了這些微生物菌劑對有益及有害群落的調控作用，為開發針對玉米莖基腐病的微生物菌劑提供依據。

1材料與方法

1.1材料

玉米品種為MC220，由山西誠信種業集團饋贈。F. graminearum由本實驗室前期分離獲得。哈茨木霉粉劑（1x109 CFU/g）購自山東綠隴生物科技有限公司。貝萊斯芽孢桿菌PYB-17可濕性粉劑（1.1 x109 CFU/g，載體高嶺土）由本實驗室研制，前期研究[22～24]表明，該芽孢桿菌具有生物防治特性。

1.2方法

1.2.1試驗設計試驗地點位于山西農業大學小麥研究所（36°10′N，東經111°51′E）溫室內，光照充足，室內平均氣溫28±2°C，相對濕度40%～50%。盆栽試驗種植時間于2023年6月2日。試驗設置4個處理：1個對照組CK（無菌水浸種）和3個處理組H（哈茨木霉粉劑用無菌水稀釋500倍浸種處理）、K（貝萊斯芽孢桿菌PYB-17可濕性粉劑用無菌水稀釋500倍浸種處理）和HK（哈茨木霉粉劑稀釋500倍浸種處理+貝萊斯芽孢桿菌PYB-17可濕性粉劑稀釋500倍浸種處理），每個處理重復3次。

禾谷鐮孢菌在PDA培養基28°C黑暗條件下培養3 d，從菌落邊緣取直徑5 mm的菌餅3～5塊，接種至含100 ml PDA培養基的三角瓶中，以28°C、180 r/min的條件震蕩培養5 d，并使用血球計數板計算孢子數。盆栽試驗選用12個內徑為23.5 cm，高為15 cm的花盆，每個花盆填入土壤3 500 g。在每個花盆中挖10個穴，每穴種植1粒玉米種子。種子表面消毒后，用溫水浸泡3 h，再放入30°C的培養箱中催芽2 d直至長出胚根。催芽后進行浸種播種，播種前全部穴施5ml禾谷鐮孢菌F. graminearum發酵液，播種完成后盆栽表面覆蓋一層薄土并澆水，使土壤完全濕潤，然后等待出苗。

1.2.2調查發病情況及土樣采集玉米出苗35 d調查玉米莖基腐病發病情況，統計病情指數，計算防效。病情指數=Σ（各級病株數×各級級數）/（調查總株數×最高級數）×100；防治效果（%）＝（對照組病情指數－處理組病情指數）/對照組病情指數×100[25]。

2023年7月8日，從每個處理組挑選3株生長情況相近的玉米，分別挖出其根部并收集根際土，使用60目篩進行篩分后，將細土混合均勻。將土樣分成3份，每份裝入1只離心管中，作為1個重復，形成每個處理三個重復，分別標記為H（1，2，3）、K（1，2，3）、HK（1，2，3）和CK（1，2，3）。然后，將其裝入自封袋，密封并貼上相應的標簽保存。最后，土壤樣品送至上海美吉生物醫藥科技有限公司進行擴增子測序分析。

1.3DNA提取、PCR擴增和Illumina MiSeq測序

用CTAB法抽提根際土壤基因組DNA后，利用1%瓊脂糖凝膠電泳檢測抽提的基因組DNA。以制備好的DNA為模板，細菌用通用引物（V3-V4）338F（5′-ACTCCTACGGGAGGCAGCAG-3′）和806R（5′-GGACTACHVGGGTWTCTAAT-3′），真菌用通用引物ITS1F（5′-CTTGGTCATTTAGAGGAAGTAA-3′）和ITS2R（5′-GCTGCGTTCTTCATCGATGC-3′）。采用PCR擴增試劑盒KT121221擴增土壤基因組DNA，PCR反應體系（20 μL）：5×FastPfu Buffer（4 μL），2.5 mM dNTPs（2 μL），正、反向引物（10 μmol/L）各0.8 μL，FastPfu Polymerase（0.4 μL），BSA （0.2 μL），DNA模板10 ng，水（1.8 μL）。PCR反應條件：95℃ 3 min；95℃ 30 s，55℃ 30 s，72℃ 45 s，27 個循環；72℃ 10 min。PCR產物經2%瓊脂糖凝膠電泳檢測，使用AxyPrepDNA凝膠回收試劑盒切膠回收PCR產物，QuantiFluorTM-ST藍色熒光定量系統進行定量。MiSeq文庫構建和測序均在上海美吉醫藥科技有限公司Illumina Miseq PE300平臺完成。

1.4數據處理與分析

使用fastp和FLASH軟件優化測序數據。使用Qiime2軟件對ASV進行物種分類學注釋并利用Mothur計算各樣本多樣性指數。主坐標分析圖、Venn圖以及兩樣本比較分析圖利用R語言軟件制作。使用python軟件繪制群落Bar圖和群落Circos圖。采用PICRUSt2和FunGuild軟件預測功能分析。

2結果與分析

2.1哈茨木霉與貝萊斯芽孢桿菌PYB-17菌劑對玉米莖基腐病防效

施用菌劑后H、K、HK處理組對玉米莖基腐病防效分別達到了63.86%、61.01 %和67.82 %，其中HK處理組對玉米莖基腐病防效高于其它兩組。相比對照組，玉米葉片長勢旺盛，枯黃葉片較少，發病程度輕（圖1），說明兩種菌劑混施對F. graminearum引起的玉米莖基腐病具有明顯抑制作用。

2.2微生物群落注釋及多樣性分析

對采集的樣品測序，所有樣本覆蓋率均在98%以上，各個樣本稀釋曲線接近平穩，表明測序深度已達到飽和，可反應樣本的真實情況。細菌共獲得10 435個ASV，真菌共獲得451個ASV。物種注釋結果顯示，所有土壤樣本中共檢測出細菌門30個、綱81個、目198個、科322個、屬672 個。真菌門6個、綱24個、目47個、科84個、屬128個。

不同處理對玉米根際土壤微生物多樣性的影響：Chao1指數和ACE指數分析顯示，PYB-17可濕性粉劑中的貝萊斯芽孢桿菌可能抑制玉米根際土壤中其他細菌的生長，導致細菌數量減少。單獨施用哈茨木霉粉劑對細菌和真菌數量無明顯影響。哈茨木霉粉劑與貝萊斯芽孢桿菌PYB-17可濕性粉劑混施可增加玉米根際土壤中細菌和真菌數量，并促進土壤中有益菌數量的增加，這些有益菌可抑制F. graminearum的生長（表2）。

采用主坐標分析法，首先對所選距離矩陣進行可視化處理，然后再基于屬水平分析4組玉米根際土壤樣本的細菌和真菌Beta多樣性。分析顯示，在細菌組中，各處理之間存在明顯重合，與對照組相比，H、K、HK處理組間差異性更明顯。H組與K組 和HK相比，表現出負相關。在真菌組中，差異更大，K組和HK組在PC2向量上呈正相關，在PC1向量上呈負相關，這表明HK處理在某些真菌的生態位競爭中取得了優勢，而H處理則未顯示出這一效果（圖1）。

2.3物種Venn圖分析

不同組別根際土壤樣本中共有和獨有ASV分析（圖2）：4組土壤樣本中，細菌共有ASV數目為403個，具體到各處理組，CK、H、K、HK組土樣中細菌獨有ASV數目分別為2 325個、2 226個、1 760個、2 562個。真菌共有ASV數目為35個，各處理組CK、H、K、HK土樣中真菌獨有ASV數目分別為76個、60個、69個、120個。細菌特有ASV數目由多到少排序為HKgt;CKgt;Hgt;K，真菌特有ASV數目排序為HKgt;CKgt;Kgt;H。表明與對照組相比，施用哈茨木霉粉劑和貝萊斯芽孢桿菌PYB-17可濕性粉劑的H、K、HK表現出顯著差異，說明這些處理改變了玉米根際土壤的菌群結構。

2.4微生物群落在屬水平上的組成分析

玉米根際土壤樣本中細菌和真菌在屬水平上相對豐度分析（圖3A）表明：4組樣本中細菌相對豐度前10名包括芽孢桿菌屬（Bacillus），假單胞菌屬（Pseudoxanthomonas），unclassified_f__Micrococcaceae，根瘤菌屬（Allorhizobium-Neorhizobium-Pararhizobium-Rhizobium），norank_f__Microscillaceae，虛構芽孢桿菌屬（Fictibacillus），寡養單胞菌屬（Stenotrophomonas），德沃斯氏菌屬（Devosia），短波單胞菌屬（Brevundimonas），杜氏桿菌屬（Tumebacillus）。芽孢桿菌屬在HK處理組中相對豐度接近18%，高于其它3組（CK，H，K）。芽孢桿菌屬中的多粘芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、貝萊斯芽孢桿菌等，在植物根際可能發揮抵抗病原菌侵入的作用，有助于抑制玉米莖基腐病的發生。

在真菌中，相對豐度排名前10的類別包括曲霉屬（Aspergillus），木霉屬（Trichoderma），新赤殼屬（Neocosmospora），鐮孢菌屬（Fusarium），青霉屬（Penicillium），毛殼菌屬（Chaetomium），帚枝霉屬（Sarocladium），赤霉菌屬（Gibberella），鏈格孢屬（Alternaria），未分類的真菌。HK處理組中，曲霉屬的相對豐度顯著下降，而木霉屬和毛殼菌屬的相對豐度分別約占50%和13%，明顯高于其它3組。這表明木霉屬和毛殼菌屬可能具有抑制F. graminearum的作用。不同處理對菌群結構組成造成的差異中，HK處理組對細菌和真菌影響最為顯著（圖3B）。

通過Circos圖，在屬水平上描述了玉米莖基腐病根際土壤與菌群群落之間的關系（圖4），該圖展示了不同菌劑處理后，玉米根際土壤中優勢物種的分布比例。H處理組中，假單胞菌屬是主要的細菌屬，占比達到13%。在K和HK處理組中，芽孢桿菌屬成為主要的細菌屬，其占比分別為8%和18%。對于真菌而言，K處理組中曲霉屬占據主導，比例高達73%；而在H和HK處理組中，主要的真菌屬為木霉屬，其占比分別為42%和55%。說明不同處理組對玉米根基土壤菌群主導屬有明顯差異。

2.5 微生物群落物種差異分析

在屬水平上對玉米根際土壤樣本進行了差異分析，特別是比較了HK處理組與CK對照組的細菌和真菌影響（置信區間為95%，Plt;0.05）（圖5）。結果顯示，與CK組相比，HK組在細菌屬方面的差異較多，而在真菌屬方面的差異較少。細菌中有15個屬在HK與CK組顯示出顯著差異。豐度排名前5位的屬包括芽孢桿菌屬（Bacillus）和鏈霉菌屬（Streptomyces）在HK組的豐度顯著高于CK 組；而unclassified_f__Micrococcaceae、副球菌屬（Paracoccus）和杜氏桿菌屬（Tumebacillus）在HK組的豐度顯著低于CK組。在真菌方面，8個屬在兩組間有差異，HK組的帚枝霉屬（Sarocladium）、枝孢屬（Cladosporium）、鏈格孢屬（Alternaria）、青霉屬（Penicillium）、毛殼菌屬（Chaetomium）、木霉屬（Trichoderma）在HK組的豐度顯著高于CK 組，而赤霉菌屬（Gibberella）的豐度在兩組間差異不大。通過比較玉米根際土壤中HK處理組與CK對照組的細菌和真菌群落差異，說明HK組在細菌屬方面差異顯著，而在真菌屬方面差異較小。

2.6細菌與真菌功能預測分析

基于PICRUSt2對細菌菌群功能的預測（圖6A）并通過COG數據庫比對測序數據，涉及23種代謝途徑。4組玉米根際土樣中的功能注釋顯示相似性，排名前8的代謝通路（豐度≧5%）包括：Function unknown，氨基酸轉運與代謝（Amino acid transport and metabolism），能源生產和轉換（Energy production and conversion）、碳水化合物運輸與代謝（Carbohydrate transport and metabolism），有機離子運輸和代謝（Inorganic ion transport and metabolism），翻譯、核糖體結構和生物合成（Translation， ribosomal structure and biogenesis），轉錄（Transcription），細胞壁膜/囊膜生物合成（Cell wall/membrane/envelope biogenesis）。

利用FUNGuild對玉米根際土壤真菌群落功能進行預測（圖6B），發現有8種營養類型，且在4組樣本中的豐度存在較大差異。未定義腐生生物（Undefined Saprotroph）在H和K組中大量富集，其豐度接近90%。按豐度排序，動物病原-內生菌-地衣寄生蟲-植物病原-土壤腐生-木材腐生（Animal Pathogen-Endophyte-Lichen Parasite-Plant Pathogen-Soil Saprotroph-Wood Saprotroph）在4組樣本中的排序為CKgt;Kgt;Hgt;HK。其他營養類型包括動物病原體-糞腐生-內生菌-附生菌-植物腐生-木材腐生（Animal Pathogen-Dung Saprotroph-Endophyte-Epiphyte-Plant Saprotroph-Wood Saprotroph）、動物病原-內生菌-植物病原-木材腐生（Animal Pathogen-Endophyte-Plant Pathogen-Wood Saprotroph）、動物病原-內生菌-地衣寄生蟲-植物病原-木材腐生（Animal Pathogen-Endophyte-Lichen Parasite-Plant Pathogen-Wood Saprotroph）、others在4組樣本中的排序普遍為HKgt;CKgt;Kgt;H。HK組特別富集了大量的腐生生物、寄生菌和動植物病原體相關功能基因。表明哈茨木霉和貝萊斯芽孢桿菌PYB-17能有效減少玉米根際土壤中病原菌的相對豐度。

3 結論與討論

本研究旨在探討哈茨木霉與貝萊斯芽孢桿菌PYB-17菌劑混合使用對玉米莖基腐病的防治效果，并分析其對根際微生物多樣性的影響。結果顯示，500倍稀釋的哈茨木霉粉劑、貝萊斯芽孢桿菌PYB-17可濕性粉劑的混合使用，對F. graminearum引起的玉米莖基腐病具有最佳抑制效果，防效達67.82%。哈茨木霉具有快速生長和強大的適應能力，能通過占據根部空間改變土壤中微生物多樣性，進而有效抑制玉米莖基腐病[26，27]。同時，芽孢桿菌在控制由F. graminearum引起的病害中的應用日益廣泛。例如，任璐等[28]將貝萊斯芽孢桿菌與耐鹽芽孢桿菌混合，制成生物種衣劑，對玉米莖基腐病的防治效果可達68.89%。微生物菌劑可通過改善根際微生物多樣性，間接增強作物抗病性[29]。通過對盆栽玉米根際土壤細菌和真菌群落的alpha多樣性分析，本研究發現，不論是混合施用還是單獨施用兩種菌劑，都能改變土壤中的菌群結構。其中，單獨使用貝萊斯芽孢桿菌PYB-17可濕性粉劑對土壤中其它細菌生長有一定的影響，而哈茨木霉和貝萊斯芽孢桿菌PYB-17菌劑的混合使用則顯著提高了土壤中細菌和真菌的豐度。

微生物群落組成分析表明，K組土壤的主導細菌屬為芽孢桿菌屬和根瘤菌屬，主導真菌屬為曲霉屬和木霉屬。H組的主導細菌屬包括假單胞菌屬和unclassified_f__Micrococcaceae，主導真菌屬為曲霉屬和木霉屬。HK處理組的主導細菌屬為芽孢桿菌屬和norank_f__Microscillaceae，主導真菌屬為木霉屬和毛殼菌屬。佟昀錚等[26]表明研究顯示，生防木霉菌對禾谷鐮孢產生抑制作用；馮超紅等人[30]表明毛殼菌屬的球毛殼菌YY-11對禾谷鐮孢菌有一定抑制作用。這與本試驗研究結果一致。與CK組比較，HK組的細菌和真菌屬中有7個屬的豐度顯著高于CK組。這些主導菌屬能改善土壤理化性質，有固氮、促氮作用，并具有誘導植物免疫的多重

功能[31]。芽孢桿菌屬的細菌通過代謝產生具有抗菌活性的酯肽，抑制病原體生長[32]；并能產生揮發性物質，干擾植物病原菌生長[33]。根瘤菌屬作為解磷細菌，促進植物次生

代謝的累積[34，35]。假單胞菌屬與氮素循環緊密相關，能高效降解木質纖維素，具有強氧化力[36]。曲霉屬和木霉屬的次生代謝物能抑制有害菌增強植物對病害的抵抗力[37]。毛殼菌屬的次生代謝產物通過產生揮發性化合物，影響植物生長[38]。

基于PICRUSt2功能預測分析，4個處理組均參與了23種相同的代謝途徑，涉及氨基酸合成、能量生產和轉換以及碳水化合物的代謝。這些代謝產物是維持微生物群落結構變化的關鍵因素[39]，顯示出哈茨木霉粉劑和PYB-17可濕性粉劑對根際土壤微生物細菌的代謝途徑影響不顯著。基于FUNGuild真菌功能預測分析，與CK對照組對比，H處理組中的Undefined Saprotroph和Plant Pathogen豐度較高；K處理組土壤中僅Undefined Saprotroph豐度高于CK對照組；而HK處理組土壤中多種生態功能群的豐度顯著高于對照組。病原菌通過損害宿主細胞獲取營養，影響植物生長。相較于CK對照組，H、K、HK處理組中病原菌的豐度降低，表明哈茨木霉菌劑和貝萊斯芽孢桿菌PYB-17可濕性粉劑可以有效減少玉米根際土壤中病原菌的相對豐度，從而有助于防治玉米莖基腐病的發生。

植物病害生物防治與土壤微生物群體的相互作用密切。隨著微生物菌劑開發利用的進步，其在抑制病原菌、促進植物生長及改善土壤環境方面的應用成效日益明顯。一些微生物菌劑通過影響根內、根際微生物來抑制病害發生。席嬌等[40]研究婁徹氏鏈霉菌D47菌劑能顯著降低列當寄生病害發生率，并對向日葵根際微生物群落造成顯著影響。周皓等[41]發現，混合菌劑的應用不僅改良了加工番茄的部分性狀，提高了果實品質，還改變了土壤微生物群落結構。王麗花等[42]發現300倍木霉菌可濕性粉劑的應用顯著影響了土壤中真菌和根內微生物多樣性，并對月季霜霉病防效達87.35%。上述研究均表明微生物菌劑能改變根際土壤微生物組成，為植物提供更有利的生長條件，與本研究的結果相似。哈茨木霉粉劑和貝萊斯芽孢桿菌PYB-17可濕性粉劑作為生物活體農藥，具有多樣的作用機制和較小的誘導病菌產生抗性的壓力。它們能定殖根際，具有良好的持效性。然而，其田間應用效果受多種環境因素如溫度、濕度、pH、紫外線、農藥殘留等的影響而變得不穩定[43]，需要更高的環境適應性。因此，進一步研究這些環境因素對哈茨木霉和貝萊斯芽孢桿菌PYB-17菌劑防治玉米莖基腐病效果的影響，對于提供科學的應用指導至關重要。

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