麥冬品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測試指南制定

關鍵詞：麥冬[Ophiopogon japonicus（L.f.）Ker-Gawl.]；新品種保護；特異性、一致性、穩(wěn)定性；測試指南中圖分類號：S567.23；S339 文獻標識碼：A

文章編號：0439-8114（2025）07-0105-09

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2025.07.019 開放科學（資源服務）標識碼（OSID）：回

Formulation of guidelines for distinctness，uniformity and stability testing of Ophiopogon japonicus

ZHAO Cui-rong1， LU Yang1， ZHAO Dan2， DAI Wei2，DENG Chao3，WANG Zhi-an4， ZHAO Ming1

XiangyangAcadeyofrilturaliencesangang47HubeiCina；iayangcadeofgriculturalieesag60 Sichuan，China;DevelopntCenterofiencendTchnologyiistryofAgricutureanduralAirs，eijingOi; 4.Zhejiang Research Instituteof Traditional Chinese MedicineCo.，Ltd.，Hangzhou31Oo23，China）

Abstract：InordertopromotetheprotectionofnewvarietiesofOphiopogonjaponicus，utilizationnddevelopmentofitsgemplasmre sourcesoriginatedinChinaaswellasthevelopmentofcalcharacteristicmedicinalOpiopogonjaponicusidustryeearh ontheformulationofthedistictness，uniformityandstabity（DUS）testguideofOphiopogonjaponicusvarietieswascarredout.By plantingandobseing93cesionsofOpopogonjponicusgermplsmresources，theculivationpropagationmethodsadp typicdatacolectiomethodsofOphiopogonjaponicusweresudied，7traitswereselectedforphenotypicdeseriptionofOiopgon japonicusvarieties，therequirementsfobreedingmaterialsforOphiopogonjapoicusvarietyDUStestwerclarifid，tegnealrinciplesforDUSdeterminatioofOopogonjaponicusreestablished，ndtheOphopogonjaponicusDUStestguidewafolated.

KeyWords：Ophiopogonjaponicus（L.f.）Ker-Gawl.；newvarietyprotection；distinctess，uniforityandstabilty（DUS）；estguide lines

麥冬［Ophiopogon japonicus（L.f.）Ker-Gawl.]是原產于中國的食藥用兼園林觀賞草本植物，地下塊根入藥。其產業(yè)發(fā)展速度和規(guī)模很大程度上依賴于對其開發(fā)利用價值的深入挖掘、種質資源的創(chuàng)新利用、新品種的培育以及品種的更新?lián)Q代。對麥冬食藥用塊根有效成分的研究較多，但在麥冬植物新品種保護和種質資源利用方面進展緩慢。按規(guī)定，獲得中國植物新品種權保護，首先該品種必須是新品種，其次應已被納人中國公布的植物新品種保護種屬名錄。根據《植物新品種保護條例》，新品種需同時滿足以下5項條件：特異性（Distinctness）、一致性（Uniformity）穩(wěn)定性（Stability）、合規(guī)的品種命名及新穎性。《植物新品種保護條例》《中華人民共和國種子法》《非主要農作物品種登記辦法》《主要農作物品種審定辦法》均規(guī)定，申請審定、登記、品種權保護的品種應當符合特異性、一致性和穩(wěn)定性要求。因此特異性、一致性和穩(wěn)定性測試（簡稱DUS測試）是申請審定、登記、品種權保護必經的程序。而開展DUS測試的技術依據是DUS測試指南（標準）。

農業(yè)植物品種DUS測試所依據的技術文件包括國際植物新品種保護聯(lián)盟（簡稱UPOV）測試指南、國家或行業(yè)DUS測試標準等，是國際、國內實施植物新品種保護、新品種DUS審查和測試機構開展DUS測試的重要技術基礎和依據，也是國際通用的植物品種描述的統(tǒng)一依據。

中國于1999年3月申請加人UP0V，同年4月23日正式加入UPOV公約，成為其第39個成員國，并執(zhí)行UP0V1978年文本。此后，中國開始接收國家植物新品種保護名錄內國內外植物新品種權申請，并自主開展新品種DUS測試工作[1，2]。至此，中國的植物新品種保護實現(xiàn)了與國際同步，也為國際間植物品種資源交流共享提供了制度保障。

自1999年加入UPOV以來，中國的植物新品種保護制度一直在持續(xù)發(fā)展、完善，保護水平與國內各作物的育種水平息息相關。若中國未來加入UPOV1991年文本公約，那么中國境內所有的植物新品種都可獲得品種權保護，國家也就不需要發(fā)布植物新品種保護名錄了。

麥冬是百合科（Liliaceae）沿階草屬（Ophiopogon Ker-Gawl.）草本植物，其葉片呈細長條線形，基生，呈禾葉狀，四季常綠，是重要的園林觀賞植物、藥用植物、特色經濟作物。2024年8月，國家衛(wèi)生健康委員會、國家市場監(jiān)管總局批準將麥冬、天冬、化橘紅、地黃4種納入按照傳統(tǒng)既是食品又是中藥材的物質目錄。中藥“麥冬\"別名“不死草”，中醫(yī)藥對麥冬的研究由來已久?！渡褶r本草經》記載，麥冬是養(yǎng)陰潤肺的上品藥物，言其“久服輕身，不老不饑”?！侗静莘纸洝贩Q麥冬“甘、微苦，微寒。潤肺清心、瀉熱生津、化痰止嘔、治嗽行水”。《醫(yī)學衷中參西錄》言其“能人胃以養(yǎng)胃液，開胃進食，更能入脾以助脾散精于肺，定喘寧嗽”。2020版《中華人民共和國藥典》描述其功能與主治“養(yǎng)陰生津，潤肺清心。用于肺燥干咳，陰虛癆嗽，喉痹咽痛，津傷口渴，內熱消渴，心煩失眠，腸燥便秘”[3]?，F(xiàn)代藥理研究表明，麥冬具有耐缺氧、增強心肌收縮力、抗心律失常等作用[4-9]，含有沿階草苷、谷甾醇、氨基酸、高異黃酮、維生素等，具有抗疲勞、消除自由基和降低血糖的作用[10-13]。“十四五\"期間，國家中藥材產業(yè)技術體系將麥冬列入單品種聯(lián)合攻關首批目錄。2020年新冠疫情發(fā)生以來，國粹中草藥文化和藥理研究日益興盛，為現(xiàn)階段麥冬在鄉(xiāng)村振興與特色產業(yè)發(fā)展中的研究和發(fā)展提供了廣闊空間。

麥冬尚未被列入中國的植物新品種保護名錄。UPOV現(xiàn)行標準中尚未包含麥冬新品種DUS測試指南，日本雖制定了沿階草屬植物的審查基準[14]，但其適用范圍僅包含麥冬和黑沿階草（OphiopogonplaniscapusNakai）2個種，且尚未被UPOV采納。為有效保護和合理利用中國優(yōu)勢麥冬種質資源，推動麥冬新品種的培育與應用，促進麥冬特色產業(yè)的健康發(fā)展，開展了麥冬品種DUS測試指南的制定研究，旨在建立統(tǒng)一的麥冬品種描述方法，為麥冬育種研究提供新品種鑒定、保護的技術依據。

1 材料與方法

1.1材料

麥冬原產于中國，資源分布較廣，在園林綠化中被廣泛種植。為了平衡地區(qū)差異，由麥冬主產區(qū)的科研單位聯(lián)合組建麥冬DUS測試指南研制工作組，共同完成麥冬測試指南研制工作。

截至2020年底，共收集麥冬類資源（含沿階草屬、山麥冬屬及其野生近緣種）93份，依次編號MD01、MD02、…、MD93，并建立麥冬類作物種質資源圃。

資源圃位于襄陽市農業(yè)科學院團山基地中 31.5^°N，112.89^°E ，海拔 37.13m ，屬北亞熱帶季風氣候，年降水日數(shù)為107～135d，降水量為 820～1100mm ，其中夏季降水量為 400～450mm ；年平均總日照時數(shù) 1800～2 100h ;無霜期 228～249d ；年平均氣溫在13～22% ;最高氣溫出現(xiàn)在7一8月，極端高溫 39^°C 最低氣溫一般出現(xiàn)在1月，極端低溫 -10°C ；日均溫度變幅1月 月 2～11^°C，3 月 8～17°C ，4月 14～24^°C，5 月 19～28^°C，6 月 23～31^°C，7 月 25～34°C 8月 24～33^°C，9 月 19～28^°C，10 月 14～23^°C，11 月 8～15^°C 12月 2～10% 。

1.2 方法

1.2.1資源收集和分類鑒定 ① 通過從麥冬科研及育種單位征集、市場購買、公共綠地收集、野外保護性收集等途徑，收集麥冬類種質資源，并詳細記錄植株的采集地點、時間。 ② 按株行距 20cm×33cm 的密度，依資源引進的先后順序分8批次栽植于基地，建立麥冬類作物種質資源圃。川麥冬1號、浙麥冬1號作為僅有的地方審定（認定）品種，分別由綿陽市農業(yè)科學研究院、浙江中藥研究所有限公司提供，作為標準品種引入資源圃。 ③ 依據《中國植物志》[15]和植物分類檢索表，對種質圃的資源開展分類鑒定，主要目的是區(qū)分沿階草屬與山麥冬屬資源，以確定測試指南的適用范圍，

1.2.2栽培技術研究麥冬栽培技術研究包括栽植時期、繁殖方法、生育期與生長發(fā)育規(guī)律、生長習性、肥水管理、連作障礙觀察等方面。 ① 2017—2019年分8批次（3月、4月、5月、6月、7月、9月、10月、11月）開展地栽試驗，記錄栽培措施和成活情況，結合成活率、生長量、生育期、生產和測試需要，確定最適栽植土壤類型、最佳栽植時期，并對生育階段進行劃分。 ② 采用分株繁殖法，并收集野外植株種子，開展種子行播繁殖試驗。 ③2020 年3月將一批旺盛生長的麥冬苗分栽到大田，觀察成活率；在此基礎上，2020年11月進行資源圃更新移栽。

1.2.3DUS測試性狀篩選旨在針對植株的根、莖、葉、花、果實、種子、整株、群體等不同部位情況和部分生理生化性狀開展觀測，篩選適宜用于DUS測試的性狀。性狀指具體觀測的植株或植株部位的表現(xiàn)，一般應是受遺傳控制的、品種固有的、穩(wěn)定一致的表現(xiàn)型。DUS測試性狀的篩選需滿足以下6項條件：其一，是特定的基因型或者基因型組合的結果；其二，在特定環(huán)境下具有一致性和可重復性;其三，在品種間表現(xiàn)出足夠的差異，能夠用于確定特異性；其四，可被準確描述和識別；其五，能夠滿足一致性的要求；其六，能夠滿足穩(wěn)定性要求[1，16-19]

1.2.4觀測方法研究觀測方法研究涵蓋觀測時期、測試地點、田間試驗要求、觀測是否借助工具、觀測取樣數(shù)量等方面，同時包括測試周期的確定及附加測試的必要性等。在對麥冬表型性狀開展觀測方法研究時，需明確植株發(fā)育至某特定時期觀測時該性狀最為穩(wěn)定，這一時期即為測試時期；明確測試性狀充分表達對栽培環(huán)境條件的特殊要求，此涉及測試地點；需明確如何控制田間試驗條件對性狀表達的干擾，此類問題屬于田間試驗管理范疇；明確性狀測試時所需的測量方式，即通過自測或借助工具測量，以及如何實現(xiàn)測量的準確與高效；明確觀測群體的樣本量，以使測量值更接近真實值，從而更好地反映品種實際情況，此關乎個體觀測還是群體觀測；明確如何確定品種性狀表達的穩(wěn)定性，這涉及測試周期；還需明確如何確定選測性狀。

1.2.5測試指南結構的確定為促進新品種和種質資源的國際交流互認，通常以國際公認的DUS測試指南結構作為共同的參照，按照UPOV和GB/T19557.1—2004《植物新品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測試指南總則》[16.17，20]所確定的國家植物品種DUS測試指南總則的結構要求，確定DUS測試指南的結構框架，并確定研究對象的種屬拉丁學名、中英文學名、國際/國內現(xiàn)有DUS測試指南版次等信息，隨后按照通用的封面結構進行排版。

2 結果與分析

2.1 確定指南的框架結構

依相關慣例[16-19]，經梳理明確麥冬DUS測試指南主要由封面、前言、目錄、正文、附錄5部分（共15章）構成。其中，附錄A、附錄B、附錄C為規(guī)范性附錄，各部分結構與對應內容的關聯(lián)可參照表1完整展示。

表1麥冬DUS測試指南的結構和組成

2.2 確定指南適用范圍和植物學名

對收集到的不同產地、不同來源的93個麥冬類種質資源，經繁殖、栽培試驗及種屬鑒定后發(fā)現(xiàn)，不同種屬的麥冬類資源的主要形態(tài)差異見表2。

依據表2所述差異，結合《中國植物志中第十五卷》（1978年）[15]《百合科》，將資源圃的麥冬類資源劃分為沿階草屬和山麥冬屬兩大類群。由于不同種、屬的“麥冬類植物\"形態(tài)差異較明顯，需將沿階草屬麥冬與山麥冬屬麥冬類植物區(qū)分開，獨立制訂DUS測試技術指南。本研究麥冬測試指南的適用范圍界定如下：沿階草屬麥冬，涵蓋川麥冬和浙麥冬，不包含湖北麥冬、短葶山麥冬（闊葉山麥冬）和山麥冬屬等其他廣義麥冬類植物。

確定指南名稱時，沿用通用的DUS測試指南命名規(guī)范[19]，采用拉丁學名Ophiopogon japonicus（L.f.）Ker-Gawl.作為麥冬的學名表述，而非文獻中比較常見的\"DwarfLilyturf”。該命名方式主要為了區(qū)分山麥冬屬中習慣稱“麥冬”的一類植物。

表2不同種屬麥冬類資源的主要形態(tài)差異

2.3確定供試繁殖材料要求

從繁殖方式研究結果來看，麥冬可以種子繁殖或分株繁殖。生產上分株繁殖較普遍，變異小。在麥冬新鮮種子種皮呈現(xiàn)固有顏色后，進行采收、去皮、趁鮮播種，翌年3一5月可以出苗。充分成熟后的干種子播種后很難出苗。育種上可能會采用種子繁殖，但種子繁殖變異大，且種子發(fā)芽慢，需要冷藏處理，因此不建議采用種子苗進行測試。

遵照GB/T19557.1—2004《植物新品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測試指南總則》2的要求，依據麥冬繁殖方式、測試所需的植株數(shù)量，確定麥冬DUS測試時繁殖材料的要求如下： ① 繁殖材料以種苗形式提供； ② 提交的種苗數(shù)量至少60盆，每盆苗為1叢，且至少4個分蘗； ③ 提交的繁殖材料種苗應尚未抽生過花葶，外觀健康，活力高，無病蟲侵害，葉片和根系完整，并對根部進行保濕處理； ④ 提交的繁殖材料應不進行任何影響品種性狀正常表達的處理，如果已處理，應提供處理的詳細說明； ⑤ 提交的繁殖材料應符合中國植物檢疫的有關規(guī)定。

2.4 確定測試植株的栽植時間

麥冬移栽時，需要對植株的地上、地下部分進行短剪，同時剪除老根和地中莖，因此傷流重，緩苗時間長，需要精細管理。從8個批次的栽植結果來看，麥冬苗3一11月移栽均能成活，精細管理后成活率均可達 100% ，但以6—8月移栽成活速度更快；同時，麥冬5—7月開花結實期對水肥敏感，6一8月高溫下移栽對養(yǎng)護措施要求嚴苛，結合麥冬秋季地下塊根開始膨大的特點，研究認為長江中下游地區(qū)的麥冬適合于立秋后移栽，第二年植株抽葶時開啟測試。

2.5 篩選確定DUS測試性狀

2017一2019年，挑選了近60個麥冬類作物測試性狀進行觀測，包括抽葶期、開花期、結實期；初生葉葉尖形狀；葉片顏色、綠色程度、葉尖形狀、邊緣光滑程度、長度、寬度、長寬比、背面花青苷顯色強度、背面中脈隆起與否、背面中脈隆起程度；花葶姿態(tài)、形狀、相對葉叢高矮、花青苷顯色強度、長度、粗細、花后生苗與否、花后結實與否；花序分枝與否、長度；花著生密度；苞片形狀、長度、腋內簇生花朵數(shù)；花著生姿態(tài)；花萼花后是否宿存；花瓣顏色、形狀；子房位置；果著生姿態(tài)；果實形狀、顏色；植株生長習性、分蘗數(shù)；地下走莖多少；須根粗細；塊根形狀、顏色、橫截面顏色、直徑；花藥形狀；花絲相對花藥長短；花柱形狀等。同步盡可能多拍攝照片記錄性狀。

通過下列方法對觀察過的性狀進行刪減： ① 對同一性狀，開展年際間、同一品種內比較，以評估性狀表達的穩(wěn)定性； ② 對同一性狀，開展年際間、不同品種間性狀表達的差異性比較，排除栽培條件干擾及外界病蟲害影響，以評估品種間的特異性； ③ 對同一性狀，同一年內、同一品種內個體間數(shù)據比較，以評估一致性； ④ 刪除“花葶姿態(tài)、形狀、相對葉叢高矮、花后結實與否、花后生苗與否”“花著生姿態(tài)”“果著生姿態(tài)\"“子房位置”等易混淆、無顯著區(qū)分價值的分屬性狀。

撰寫測試指南討論稿時，人選性狀39個，征求意見稿時調整為25個，送審稿入選24個性狀，報批稿新增了一些葉片性狀，并根據藥用植物研究需要增加了采收期塊根性狀。

對選測性狀的列入，一般遵照國際慣例，遵循的原則如下：現(xiàn)階段育種水平下可能不關注，但以后可能會關注的性狀；當前育種水平下雖然關注，但其他性狀能更便捷、準確地區(qū)分不同品種，且隨著育種發(fā)展可能僅該性狀能區(qū)分品種的，可列為選測性狀。

現(xiàn)階段，麥冬的育種水平不高，麥冬道地藥材生產上重點關注塊根有效成分含量和商品塊根的大小分級；但依靠地上部分已能夠區(qū)分不同品種，故將塊根麥冬總皂苷含量、塊根長度、塊根直徑3個性狀列入了選測性狀。最終指南入選DUS性狀27個，其中24個必測性狀、3個選測性狀（表3）。

2.6 確定性狀觀測方法

性狀觀測方法的確定一般伴隨測試性狀的選擇同步進行，并結合麥冬的生長習性及UPOV-TGP/7規(guī)定[21]的要求編制。

2.6.1 觀測時期 麥冬為多年生宿根性常綠草本植物，一次種植可連續(xù)多年開花。部分性狀（如葉片寬度）在同一品種內表現(xiàn)穩(wěn)定，品種間差異較小，因此觀測時期要求較寬松；但有的性狀（如葉片長度），隨栽培年限增長而增加，需固定于特定生長年份觀測（如第一次抽葶后）；同時，各性狀表達有特定最佳觀測時期（如花被片顏色、小花數(shù)量、花序長度等），需逐一明確各性狀的最佳觀測時期。

表3麥冬DUS測試性狀名稱、觀測時期、性狀類型、性狀類別統(tǒng)計

注：QN為數(shù)量性狀;PQ為假質量性狀;QL為質量性狀;NG為群體觀測;VG為群體目測;VG/MS為個體觀測性狀;MS為個體測量

觀測時期的確定原則如下： ① 與采收期相關的性狀于采收時測定； ② 其余性狀需精確對應6個生育階段，即抽葶前、抽葶期、花期、結實期、成熟期、采收期（表4）。

2.6.2觀測與記錄方法 ① 依據是否借助測量工具，將表型性狀區(qū)分為目測性狀（V/visual）和測量性狀（M/measurement）2種類型。目測即通過感官測試，比如顏色，可借助非線性圖表（如比色卡）和標準品種比對輔助。測量即借助線性刻度工具測試，如長度、寬度、重量等指標。 ② 依據觀測對象所需樣本大小，將性狀觀測記錄方式區(qū)分為個體記錄性狀（S/Single）和群體記錄性狀（G/Group）兩類。個體記錄（S）需取20個有效觀測值，最后按統(tǒng)計分析方法計算平均值;群體記錄（G）一般取一個群體觀測值，或觀測3次取平均值，如塊根粒重。 ③ 將測試工具和測試群體組合后，將表型性狀觀測方法區(qū)分為個體目測（VS）、群體目測（VG）、個體測量（MS）、群體測量（MG）4種。個體觀測性狀（VS/MS）需隨機選取不少于20株植株，每株僅采集1個目標器官或部位。群體觀測性狀（VG/MG）應觀測整個小區(qū)或規(guī)定大小的混合樣本。

表4麥冬生育階段

2.6.3測試周期麥冬是常異花授粉作物，生產中以分株繁殖為主，其繁殖苗性狀變異較小，一般1個測試周期即可完成評估。因此采用1周期測試。通常從定植的第2年開始測試。未來若因育種技術進步導致品種同質化加劇，則需修訂指南并延長測試周期。

2.6.4測試地點通常在同一地點測試。某些性狀在該地點測試不能充分表達時，可在其他符合條件的地點觀測[22]

2.6.5田間試驗要求 ① 依據UPOV規(guī)范，試驗設2次重復，每次重復至少包含25株植株。種植密度為株距 25～30cm ，行距 30～40cm ，略低于大田種植密度，以確保性狀充分表達。 ② 植株盆栽或地栽均可，地栽更接近大田生產方式，故推薦地栽。宜選用pH6～7 的沙壤土或腐殖土，此類土壤更利于麥冬類生長。地栽時，一般要求前茬不是麥冬或山麥冬屬作物。 ③ 必要時，將近似品種與被測試品種相鄰種植。 ④ 試驗管理與大田管理相同。

2.6.6附加測試若現(xiàn)有DUS基本性狀無法區(qū)有效分品種，可以選擇指南基本性狀表中未列出的性狀或其他輔助性狀開展附加測試。但這些選用的附加測試性狀必須符合前述的6條選取原則[1，16-19]：具有可重現(xiàn)性、穩(wěn)定性、一致性、可描述和識別性、受遺傳控制、能穩(wěn)定顯示品種間差異（特異性）。附加測試性狀可來源于指南性狀表中的選測性狀，也可以是指南以外的其他性狀。

2.7確定特異性、一致性和穩(wěn)定性判定方法

遵循GB/T19557.1—2004確定的原則進行特異性、一致性和穩(wěn)定性的判定，判定過程與制定指南時物種的育種水平相關。

2.7.1總體原則特異性、一致性和穩(wěn)定性的判定按照GB/T19557.1—2004確定的原則進行。

2.7.2特異性的判定待測品種應明顯區(qū)別于所有已知品種。在測試中，當待測品種至少有1個性狀與最為近似的品種具有明顯且可重現(xiàn)的差異時，即可判定待測品種具備特異性[23]。

2.7.3一致性的判定對于無性繁殖的種類，一致性判定時，采用 1% 的群體標準和至少 95% 的置信概率。當樣本為6～35株群體時，最多允許1個異型株；當樣本為36～60個群體時，最多允許2個異型株[24]。

對于其他類型品種，一致性判定時，品種的變異程度不能顯著超過同類型品種。2.7.4穩(wěn)定性的判定若某個品種具備一致性，則可認為該品種具備穩(wěn)定性。一般不對穩(wěn)定性進行測試。必要時，可以種植該品種的下一批繁殖材料，與以前提供的繁殖材料相比，若性狀表達無明顯變化，則可判定該品種具備穩(wěn)定性[25]

2.8 確定性狀表

根據測試需要，將測試性狀分為基本性狀、選測性狀。基本性狀是測試中必須使用的性狀，即必測性狀。《附錄A麥冬性狀表》包括A.1基本性狀表和A.2選測性狀表，屬于規(guī)范性附錄，是指南必不可少的部分。

2.8.1性狀選擇部分性狀雖能滿足DUS基本性狀的條件，但現(xiàn)階段育種水平下可能不被關注，或者現(xiàn)階段不用該性狀，而用別的性狀能更方便區(qū)別不同品種時，可作為選測性狀。最終塊根的長度、直徑及麥冬總皂昔含量3個性狀被確定為麥冬的選測性狀。

2.8.2性狀排序性狀表列出了性狀名稱、性狀類型、觀測時期、觀測記錄方法、表達狀態(tài)及相應的代碼和標準品種等內容。性狀名稱單列一欄，有國際通用的固定表述格式[26]“觀測部位：名稱”，例：“植株：姿態(tài)”。

依據UPOV：TG/1/3、UPOV：TGP/7對指南性狀進行排序，大致優(yōu)先按植物學順序（種子、幼苗、植株、根、莖、葉、花、果、種），同時依據植物器官性狀排列順序（從大到小、從外到內、從下到上）測試時期（生育階段）性狀類別（姿態(tài)、高度、長度、寬度、大小、形狀、顏色、其他）綜合排序[1]。

2.8.3性狀分級和表達狀態(tài)的描述綜合多年的觀測結果和《中國植物志》的品種描述對性狀進行代碼分級。

分級是為了方便記錄和建立一致的品種描述形式，將每個測試性狀劃分為一系列表達狀態(tài)，每個表達狀態(tài)賦予1個數(shù)字代碼，所有表達狀態(tài)都在指南中列出。表達狀態(tài)的順序要符合UPOV：TGP/7模板，較小的、較少的、程度低的給予較低的代碼，顏色一般按光譜順序或出現(xiàn)的先后順序排列，形狀一般從尖到圓或從凸到凹排列，當性狀表達狀態(tài)達7級以上時，偶數(shù)代碼的描述可表述為“前一個表達狀態(tài)到后一個表達狀態(tài)”的形式。

麥冬指南測量性狀按“2倍標準差”法完成分級。2.8.4符號標識觀測時期的標識以生育階段的代碼標記，并標注觀測記錄的方法（MG/MS/VG/VS）。

性狀表達類型分為質量性狀（QL）、數(shù)量性狀（QN）、假質量性狀（PQ），標識在性狀名稱的下方。對單一性狀的解釋要單列1個附錄B，在性狀表中性狀名稱下以 （+） 標注，表示附錄B中有解釋。涉及多個性狀需要一起在附錄B解釋的，在性狀表中性狀名稱下依次以其在附錄B中出現(xiàn)的先后順序以（a（b）標記。

報批稿標識了1個QL性狀（葉片：條紋），20個QN性狀，6個PQ必測性狀（表3），5個標記（a）的性狀。

2.8.5標準品種的選擇選擇標準品種時，主要考慮入選品種具有較好的穩(wěn)定性、能一種多用、數(shù)量盡可能少。通常1個性狀至少應有1個標準品種，如果代碼分5級以上，至少2個標準品種。指南入選了10個標準品種：川麥冬1號、浙麥冬1號、玉龍草、白紋麥冬、銀霧麥冬、黑龍麥冬、MD23、MD51、MD52、MD83。

2.8.6分組性狀的確定分組性狀不宜多，主要是為方便對測試品種分組和篩選近似品種而設立，適當入選QL性狀。指南入選3個分組性狀：a）植株：姿態(tài)；b葉片：長度；c）花被片：張開姿態(tài)。

2.8.7性狀表的解釋對生育階段的界定、涉及多個性狀的解釋和需要獨立解釋的性狀，進行文字或圖、表、照片解釋，以說明性狀觀測的方法、明確觀測方法或分級，形成《附錄B麥冬性狀表的解釋》。制定的麥冬測試指南總計對性狀表中的18個性狀進行了測試解釋。

2.9 制訂技術問卷

技術問卷用于由育種人登記育種人信息、品種植物學歸類、選育過程、特殊備注、主要特征、近似品種等信息，有助于測試人員了解品種特性和安排分組測試，還有助于品種權授權審核。

技術問卷中有一項重要工作，即確定技術問卷性狀。技術問卷性狀用以反映品種主要特征。技術問卷性狀不需太多，但指南分組性狀數(shù)據必須有。指南入選了10個技術問卷性狀：抽葶期、植株姿態(tài)、葉片條紋、葉片長度、花序姿態(tài)、花序苞片數(shù)、花被片張開姿態(tài)、種皮藍色程度、植株分蘗數(shù)、地下莖數(shù)量。

3 討論

廣義的“麥冬\"類植物包含了沿階草屬（Ophio-pogonKer-Gawl.）和山麥冬屬（LiriopeLour.）的多個不同物種[27]。不同種屬的“麥冬\"形態(tài)上的主要差異在于花器官姿態(tài)、種皮顏色和根形態(tài)，成株葉片的長、寬也有差異，但苗期時差異不顯著。當前全國麥冬主產區(qū)為四川省綿陽市、浙江省慈溪市和寧波市、

湖北省襄陽市以及福建省泉州市、仙游縣、莆田市等地。不同產區(qū)、不同種屬的麥冬形態(tài)各異，栽培方式、收獲時間差異很大，育種水平也各不相同[28]。湖北省襄陽市產區(qū)主栽湖北麥冬（Liriope spi-cata Lour（Thunb）.var.prolifera Y.T.Ma） [29.3o]，四川省綿陽市產區(qū)主栽川麥冬（ 2n=4x=68 ）[31] （Ophiopogonjaponicus（L.f.）Ker-Gawl.），浙江省慈溪市、寧波市產區(qū)主栽浙麥冬（2n=4x=68）[32]（Ophiopogon japonicus（L.f.）Ker-Gawl.） 。福建省泉州市、仙游縣、莆田市產區(qū)主要栽培短葶山麥冬（Liriopemuscari（Decn.）Bailey）[33]湖北麥冬（ 2n=3x=54 ）為山麥冬（Liriope spicata Lour.，2n=4x=72 ）的變種，屬三倍體，通常不結實，依賴分株繁殖[29.30.34-38]，其地下塊根洗凈干燥后成為商品山麥冬。短葶山麥冬[39葉片寬長，俗稱大麥冬，可開花結實，分株繁殖，地下塊根洗凈干燥后成為商品山麥冬。川麥冬和浙麥冬是沿階草屬麥冬，植株可以開花結果，通常不用種子繁殖而采取分株繁殖，地下塊根洗凈干燥后成為商品麥冬。2005年以前，中藥材山麥冬和麥冬是混用的，在很多的經典名方中，二者也是通用的。2005年起，《中華人民共和國藥典》（以下簡稱《藥典》）單獨收錄山麥冬[40]，二者始逐漸區(qū)分應用。

3.1關于對日本研制的麥冬測試審查基準的參考

日本制定的麥冬測試審查基準僅適用于麥冬（Ophiopogon japonicus（L.f.）KerGawl.）和黑沿階草（OphiopogonplaniscapusNakai）[i4]，其適用范圍與本研究存在差異，故無法直接應用于麥冬DUS測試。在綜合參考該審查基準后，新增了葉片形狀性狀，并在葉片顏色分級中補充“其他”選項，以涵蓋潛在的特殊表型品種。

指南制定時，國際上沒有其他關于麥冬的測試標準可供參考，與日本麥冬測試審查基準的結合將有利于麥冬測試指南的國際化應用及麥冬新品種的國際化推廣應用。

3.2關于麥冬塊根成分含量性狀是否納入麥冬性狀表

當麥冬作為中藥材使用時，其藥用價值主要取決于塊根的有效成分含量。因此有專家提議將《藥典》關注的塊根的相關物質含量作為選測性狀列入性狀表。

《藥典》規(guī)定，麥冬藥材需檢測總灰分、水溶性浸出物及麥冬總皂苷含量[3]。三者在《藥典》里有規(guī)定的測定方法[41，42]，需要專業(yè)的實驗室人員和檢測設備，操作流程復雜。對于可通過形態(tài)特征區(qū)分的品種，從降低測試成本角度看，不推薦用實驗室儀器檢測。上述3項指標均為中藥材質量的合規(guī)性檢測指標，屬于理化性質范疇，與形態(tài)學性狀無關。此外，DUS測試性狀的篩選嚴格符合“1.2.3”所述的6項原則，即具備一致性、特異性、穩(wěn)定性、可遺傳性、可描述和識別性、可重復性。

3.2.1總灰分《藥典》要求不得超過 5.0%^[41] 。總灰分檢測旨在防止藥材摻假，但其遺傳機制尚未明確，不太符合測試性狀的選取原則，因此不納入測試性狀。

3.2.2水溶性浸出物《藥典》要求水溶性浸出物不得少于 60.0%^[41] 。水溶性浸出物成分復雜且未完全明確，易受環(huán)境及栽培條件干擾，遺傳穩(wěn)定性也不清楚，也不符合測試性狀的選取原則。因此不納入測試性狀。

3.2.3麥冬總皂苷《藥典》規(guī)定，藥材麥冬總皂苷以麥冬干燥品含魯斯可皂昔元（ C₂₇H₄₂O₄） 計，不得少于 0.12%^[41] 。盡管含量微量，卻是中藥材的關鍵質量指標。關于是否將其納人指南性狀存在較大爭議。由于其遺傳穩(wěn)定性及環(huán)境依賴性尚未明確，因此指南研制人員認為這不是很好的DUS測試性狀。而且研制人員提出，新品種測試時，如果有新品種與近似品種僅在該項指標上有顯著差異，可以由委托人自行舉證，測試機構將其作為選測性狀、開展復測驗證即可。按國際慣例，選測性狀可以是指南性狀表未列出的性狀。因此在指南性狀篩選初期，沒有入選該指標。但不同品種、不同栽培年限、不同栽培地點的麥冬品種，該指標含量差異較大，強烈建議將該指標納人指南性狀?？紤]到制定指南的目的是為了促進新品種的推廣應用，麥冬新品種選育主要也是圍繞藥用成分含量的提高進行的，該性狀人選為測試性狀將有利于新品種的推廣應用，綜合考慮后，將該性狀納入選測性狀備用。

4小結

麥冬DUS測試指南的制定，研究過程包括文獻資料查閱、種質資源收集、植物分類學鑒定、性狀觀測與篩選、多年數(shù)據評估及全國性生產加工調研，并整合DUS測試相關專家意見，最終制定形成了麥冬測試指南。指南已作為推薦性農業(yè)行業(yè)標準發(fā)布，自2023年3月1日起實施，標準號NY/T4215—2022，該指南為麥冬新品種保護測試提供了技術規(guī)范，并為新品種審定/認定建立了統(tǒng)一的鑒定標準，意味著下一步可以推動麥冬納人新品種保護名錄之中，若麥冬被列入新品種保護名錄，即可正式啟動新品種保護申請程序。

指南的主要貢獻： ① 規(guī)定了麥冬品種特異性、一致性和穩(wěn)定性（DUS）判定的一般原則（標準）； ② 規(guī)定了育種人應提交的用于DUS測試秋栽的植株數(shù)量（應不少于60盆）和質量要求； ③ 建立了用性狀描述來定義品種形態(tài)特征的麥冬形態(tài)描述方法； ④ 確定27個DUS性狀用于描述麥冬品種，列入附錄A（性狀表），其中24個基本性狀、3個選測性狀； ⑤ 為確保性狀分級描述的準確性，提供了10個標準品種作為示例，用于性狀級校準，列入了附錄A； ⑥ 為確保性狀描述的準確性，指南規(guī)定了性狀觀測的時期和方法：劃定6個生育階段來區(qū)分性狀的觀測時期，列人了附錄B；對附錄A（性狀表）中的18個性狀進行解釋，以明確測試的具體方法細節(jié)，列人了附錄B; ⑦ 篩選出3個分組性狀、10個技術問卷性狀用于麥冬DUS測試，列入附錄C（麥冬DUS測試技術問卷）； ⑧ 設計問卷涵蓋申請人信息、植物學分類、品種來源、育種過程及繁殖材料保存要求等信息。

麥冬品種DUS測試指南的制定充分考慮了中國麥冬資源、遺傳育種現(xiàn)狀和生產實際，填補了國內空白，達到國內先進水平，對促進中國麥冬新品種選育、品種保護和特色產業(yè)發(fā)展具有重要意義。27個描述性狀中，質量性狀（QL性狀）1個、假質量性狀（PQ性狀）6個、數(shù)量性狀（QN性狀）20個，隨著麥冬育種水平的提高，指南會有修訂的需求，測試性狀可能會增減，測試方法也可能會改進，這些都是正常的發(fā)展需求。

參考文獻：

[1］唐浩.植物品種特異性一致性穩(wěn)定性測試總論[M].北京：中國農業(yè)出版社，2017.

[2]任麗，韓瑞璽，陳海榮.辣椒、番茄新品種DUS測試[M].北京：中國農業(yè)出版社，2022.

[3]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典一部：2020年版[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2020.

[4]馬海波.麥冬化學成分的研究[D].北京：北京中醫(yī)藥大學，2013.

[5]陳屏.麥冬化學成分的研究[D].長春：長春中醫(yī)學院，2004.

[6]朱永新，嚴克東，涂國士.麥冬中高異黃酮的分離與鑒定[J].藥學學報，1987，22（9）：679-684.

[7]于伯陽，徐國鈞，金蓉鸞，等.麥冬中28種元素的分析[J].南京藥學院學報，1986，17（4）：286-288.

[8]劉成基，曾詮，馬蓓.麥冬化學成分的研究[J].中草藥，1988，19（4）：10-11.

[9」朱永新，劉林喆，凌大奎，等.麥冬的化學成分研究[J].中國中藥雜志，1989，14（6）：39-40，63.

[10]余伯陽，殷霞，張春紅，等.麥冬多糖的免疫活性研究[J].中國藥科大學學報，1991，22（5）：286-288.

[11]張衛(wèi)星，王乃華.麥冬多糖對四氧嘧啶糖尿病小鼠高血糖的降低作用[J].中草藥，1993，24（1）：30-31，55.

[12」黃琦，許家鸞.麥冬多糖對2型糖尿病血糖及胰島素抵抗的影響[J].浙江中西醫(yī)結合雜志，2002，12（2）：86-87.

[13]莫正紀，江光池，冉蘭，等.麥冬有效成分的藥理研究[J].華西藥學雜志，1991，6（1）：13-15.

[14]PlantVarietyProtection-PVPOfficeat MAFF，JAPAN.＼$のU（f（Dowarf lilyturf）（Ophiopogon japonicus（L.f.）Ker-Gawl.）（Ophiopogon planiscapus Nakai）[EB/OL].（2013-06）.http：//www.hinshu2.maff. go.jp/info/sinsakijun/botanical_taxon_e.html.

[15]中國科學院中國植物志編輯委員會.中國植物志第十五卷[M].北京：科學出版社，1978.

[16]農業(yè)農村部科技發(fā)展中心，農業(yè)農村部植物新品種測試中心，全國植物新品種測試標準化技術委員會.特異性（可區(qū)別性）、一致性和穩(wěn)定性審查總則和植物新品種統(tǒng)一描述的形成（TG/1/3）的相關文件[M].北京：中國農業(yè)出版社，2020.

[17]UPOV.Document TG/1/3 .General introduction to the examinationof distinctness，uniformity and stability and the development ofharmonized descriptions of new varieties of plants [EB/OL].（2002-04-19）.htp：//www.upov.int/ export/sites/upov/resource/en/tg_1_3.pdf.

[18]農業(yè)部植物新品種測試中心，全國植物新品種測試標準化技術委員會.植物新品種特異性、一致性和穩(wěn)定性審查及性狀統(tǒng)一描述總則[M].北京：中國農業(yè)出版社，2007.

[19]NY/T3511—2019，植物品種特異性（可區(qū)別性）、一致性和穩(wěn)定性測試指南編寫規(guī)則[S].

[20]GB/T19557.1-2004，植物新品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測試指南總則[S].

[21]UPOV. TGP/7. Development of test guidelines [EB/OL].（2020-10-25）. https：//www.upov.int/edocs/tgpdocs/en/tgp_7. pdf.

[22]UPOV. TGP/8.Trial design and techniques used in the examina-tion of distinctness，uniformity and stability[EB/OL].（2019-11-01）.https：//www.upov.int/edocs/tgpdocs/en/tgp_8.pdf.

[23]UPOV. TGP/9.Examining distinctness [EB/OL].（2015-10-29）.https：//www.upov.int/edocs/tgpdocs/en/tgp_9.pdf.

[24]UPOV. TGP/10.Examining uniformity[EB/OL].（2019-11-01）https：//www.upov.int/edocs/tgpdocs/en/tgp_10.pdf.

[25]UPOV.TGP/11.Examining stability [EB/OL].（2011-10-20）.https：//www.upov.int/edocs/tgpdocs/en/tgp_11.pdf.

[26]UPOV.TGP/14. Glossary of Terms Used in UPOV Documents[EB/OL].（2020-10-25）.https：//ww.upov.int/edocs/tgpdocs/en/tgp14.pdf.

「27]全伯陽徐國鈞中藥砉冬的資源利田研空「I］中首藥 100526（4）：205-210，225.

[28]王冠明.麥冬種質資源與遺傳多樣性研究[D].北京：北京林業(yè)大學，2010.

[29]陳曉玲.山麥冬生殖生物學研究[D].陜西漢中：陜西理工大學，2017.

[30」王小剛.湖北麥冬種植優(yōu)化和遺傳多樣性研究[D].武漢：華中科技大學，2011.

[31]梁國魯，楊美全，閻勇.川麥冬核型分析[J].西南農業(yè)大學學報，1998，20（4）：340-342.

[32]劉玉洋，盧江杰，王慧中，等.浙麥冬主產區(qū)種質資源遺傳多樣性評價[J].浙江農業(yè)科學，2017，58（12）：2146-2149.

[33]陳瑞鳳，張君毅.短葶山麥冬遺傳多樣性的ISSR標記研究[J]福建農業(yè)學報，2010，25（3）：245-250.

[34」周健丘.山麥冬的細胞生物學與組織培養(yǎng)研究[D].武漢：華中科技大學，2009.

[35]周群.湖北麥冬資源品質與不育機理研究[D].武漢：華中科技大學，2009.

[36]周群，周健丘，王菁菁，等.藥用植物湖北麥冬和山麥冬減數(shù)分裂及花粉發(fā)育的比較研究[J].中國中藥雜志，2009，34（10）：1199-1203.

[37]周群，周健丘，程君奇，等.湖北麥冬和山麥冬花藥及花粉發(fā)育的細胞學比較研究[J].中藥材，2009，32（8）：1188-1191.

[38]周健丘，周群，王小剛，等.湖北麥冬和山麥冬的花藥培養(yǎng)研究[A].中華中醫(yī)藥學會第九屆中藥鑒定學術會議論文集——祝賀中華中醫(yī)藥學會中藥鑒定分會成立二十周年[C].2008

[39]張君毅.短葶山麥冬種質主要性狀聚類分析[J].農學學報，2011，1（12）：25-30.

[40]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典-一部：2015年版[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015.

[41]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典-四部：2020年版[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2020.

[42]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典-三部：2020年版[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2020：232.

（責任編輯 丁艷紅）