摘 要:用PCR法擴增本室保存的sILl6cDNA片段,插入含T7啟動子的表達載體pET28a(+)中構建重組質粒pET—sILl6,轉化大腸桿菌B121(DE3),低溫經IPTC誘導蛋白表達,過Ni2+螯和層析柱一步純化表達蛋白,重組蛋白與Jurkat細胞共同孵育后,觀察它對細胞表面IL2R表達的影響,結果發現IPIG誘導蛋白表達后,經SDS—PACK電泳,可以看到在18kD左右出現明顯蛋白表達條帶,表達量占菌體可溶蛋白的40%左右,純化蛋白的純度達90%以上,經重組蛋白處理過的Jwlcat細胞表面IL-2R的表達水平比未經它處理的細胞增高了18.54%.
關鍵詞:sIL-l6;表達;純化;活性
中圖分類號:R392.11
文獻標識碼:A
文章編號:1007—7847(2002)04—0318—04