摘 要:采用RT-PCR方法,從提取的SAll株輪狀病毒總m4A中擴增出VN基因片段,進行鑒定后,將該片段克隆于真核表達載體pEF1/HisC-dhfr,構建成重組質粒pEF1/HisC—dhfr/VP7,然后用質脂體法轉染COS-7細胞,進行真核系統的表達.獲得了長981bp的PCR片段,序列分析結果與已知VP7序列相同.表達后經細胞超聲破碎,Westem b1ot檢測表達產物,在相對分子質量38x1曠處有表達條帶,表達蛋白主要存在于上清中.因此,獲得了V刃基因,并在COS-7細胞中獲得了表達,表達蛋白質免疫Balb/c小鼠,獲得了具有特異性結合活性的抗體.
關鍵詞:輪狀病毒;基因克隆;基因表達
中圖分類號:Q786
文獻標識碼:A
文章編號:1007-7847(2002)03—0235-04