摘 要:將本室構建的重組質粒pGEX-5X-TRAIL55-281轉入大腸桿菌JM109和HB101中,鑒定后誘導表達,然后針對培養溫度、培養時間及誘導劑IPrG濃度設立梯度試驗,發現重組質粒pGEX-5X-TRAIL在JMl09與HB101中的表達情況相近,可溶性的人GST-rhTRAIL55-281最佳表達條件為26℃,0.06 mmol/L IPTG,200 r/min.利用親和層析法純化出大量可溶性GST-rhTRAIL55-281后, 通過Western Blot及流式細胞儀檢測發現GST-rhTRAIL55-281有較好的免疫學活性與生物學活性.為今后TRAIL作為抗腫瘤藥物的開發做必要的準備.
關鍵詞:可溶性GST-rhTRAIL55-281;最佳表達條件;純化;活性;抗腫瘤藥物
中圖分類號:R392.11
文獻標識碼:A
文章編號:1007—7847(2005)03—0267—05