摘 要:根據大腸桿菌對精氨酸密碼子使用的偏好,設計引物開通過酶促法合成了人β防御素3(hBD-3)全基因序列,克隆進PCEX—4T—2中構建PCEX—4T—2—hBD—3融合表達載體.將表達載體轉化E.coli宿主菌DH50,進行IPrC誘導表達.控制誘導條件,提高可溶性蛋白的表達量.將菌體進行反復凍溶使細胞膜穿孔,釋放可溶性蛋白.融合蛋白CST—hBD—3經凝血酶切割得到重組人防御素蛋白.用瓊脂孔穴擴散抑菌法檢測表明,重組人β防御素3對金黃色葡萄球菌有抑菌活性.
關鍵詞:hBD—3;融合表達:反復凍融
中圖分類號:Q786
文獻標識碼:A
文章編號:1007-7847(2005)02—0129—05