無飼養(yǎng)層培養(yǎng)人胚胎干細胞方法的建立

摘 要：人胚胎干細胞(hunlanenlbl3，omcstemcell，hES細胞)是當(dāng)前醫(yī)學(xué)研究的熱點之一．然而hES細胞培養(yǎng)條件苛刻，通常需要采用鼠胚胎成纖維細胞(1llOUSeembryonic fibroblast，MEFs)飼養(yǎng)層來維持其未分化狀態(tài)，成為目前hES細胞研究的瓶頸之一．本實驗成功地將hKS細胞接種在細胞外基質(zhì)包被的六孔板上培養(yǎng)，傳代20次后細胞仍然保持良好的未分化狀態(tài)，各種hES細胞生物學(xué)特性(如表面標(biāo)志物SSEA-3、SSEA—4、TRA—1—60和TRA—1—81。OCr—4，堿性磷酸酶及體內(nèi)外分化潛能等)均無改變；其凍存、復(fù)蘇效果與生長在飼養(yǎng)層上的hES細胞無明顯差異．因此，該無飼養(yǎng)層培養(yǎng)體系可以用于培養(yǎng)hES細胞，并為hES細胞轉(zhuǎn)基因研究及大規(guī)模培養(yǎng)打下良好的基礎(chǔ)．

關(guān)鍵詞：人胚胎干細胞；無飼養(yǎng)層培養(yǎng)體系；基因轉(zhuǎn)染

中圖分類號：Q813．1⁺1

文獻標(biāo)識碼：A

文章編號：1007-7847(2005)02—0134—05