蜂毒素基因的突變與表達及其構效關系研究
2006-01-01 00:00:00趙亞華白云崔紅廖富蘋高向陽
生命科學研究 2006年4期
摘要：為獲得保留有抗菌活性而降低溶血活性作用的蜂毒素，對其分子結構進行了改造。其中一條序列缺失Lys·7，另一條缺失Ieu·9。用PCR技術獲得兩條新的蜂毒素基因，將其克隆到酵母表達載體pPICzα-A，獲得重組質粒pPICZα—A-Me1 1和pPICZα-A-Me1 2。將2個重組質粒分別轉化畢赤酵母菌CSll5。篩選獲得重組酵母菌。對重組酵母菌培養條件進行優化，在YEPD中含甘油2％，pH為7，重組酵母菌培養48 h后，0.5％的甲醇誘導72h，表達目的蛋白通過Tricion-SDS-PAGE確定分子質量為5．4 kD。殺菌效價分別達0．947、1．085。結果表明兩條蜂毒素基因成功的在畢赤酵母中表達，經突變后表達的蜂毒素降低了溶血活性，同時保留了抗菌活性。
關鍵詞：蜂毒素；畢赤酵母；培養條件；抗菌活性；溶血活性
中圖分類號：Q786
文獻標識碼：A
文章編號：1007-7847(2006)04-0313-07
