ＨＰＬＣ測定痛寧膠囊中乙酰水楊酸和咖啡因的含量

摘要：建立同時測定痛寧膠囊中乙酰水楊酸和咖啡因含量的方法。方法采用ODS柱，流動相：乙腈－水－甲酸（20∶30∶1），流速1.0ml/min，檢測波長276nm，外標法計算。結果：線性范圍分別是：乙酰水楊酸0.3～3.0mg·ml-1，r=0.9999；咖啡因0.03～0.28mg·ml-1，r=0.9999，RSD分別為0.8%、1.2%。結論：本法操作簡便，結果準確，可以有效地控制質量。

關鍵詞：高效液相色譜法；乙酰水楊酸；咖啡因

中圖分類號：R453文獻標識碼：A文章編號：1672-3198（2007）10-0292-01

1儀器與試藥

Waters1525高效液相色譜儀，2487檢測器（均為美國Waters公司）；乙酰水楊酸對照品、咖啡因對照品（均由中國藥品生物制品檢定所提供）；乙腈為色譜純，痛寧膠囊（貴州圣都制藥有限公司，批號06121028、07021005、07021006）。

2方法與結果

2.1溶液的配制

（1）精密稱取105℃干燥至恒重的乙酰水楊酸和咖啡因對照品適量，用流動相作溶劑分別稀釋至50ml制成含乙酰水楊酸6mg/ml和咖啡因0.7mg/ml的濃溶液備用；

（2）分別取上述濃溶液各2ml，稀釋至10ml制成含乙酰水楊酸1.2mg/ml的對照溶液①（見下圖）、含咖啡因0.14mg/ml的對照溶液②（見下圖）及含上述濃度的乙酰水楊酸+咖啡因混合對照溶液③（見下圖）備用；

（3）按樣品相同處方配制空白輔料，按上述方法處理后制成空白對照溶液④（見下圖），備用。

2.2色譜條件與系統適用性試驗

色譜柱：C18柱（4.6×250nm），流動相：乙腈-水-甲酸（20∶30∶1），流速：1.0ml·min-1，柱溫：30℃，進樣量：10μl，檢測波長：276nm。分離圖譜及保留時間的確定：分別取2.1.2下對照溶液①②③（見下圖）和空白對照溶液，分別進樣，記錄色譜圖。

結果表明，乙酰水楊酸和咖啡因分離良好，分離度大于9，拖尾因子分別為0.89和0.88；溶劑及輔料不干擾測定。測得理論塔板數按咖啡因的峰面積計算為2800。

2.3線性試驗

精密吸取2.1項下制備的乙酰水楊酸和咖啡因對照品濃溶液各1至10ml，用流動相定容至10ml制成混合溶液，測定，結果乙酰水楊酸、咖啡因回歸方程分別為：

2.4精密度試驗

精密吸取2.3項下混合溶液，進樣，計算乙酰水楊酸RSD為0.5%，咖啡因RSD為0.4%（n=6）。

2.5穩定性試驗

精密吸取2.3項下混合溶液，在0～10h內每隔0.5h進樣，24h后再次進樣，計算乙酰水楊酸RSD為0.5%，咖啡因RSD為0.4%。（n＝12）

2.6回收率試驗

在已知含量樣品中精密加入已知量的乙酰水楊酸和咖啡因，依法測定，計算回收率（結果見下表）。

2.7樣品測定

（1）取樣品10片，精密稱定后研細，精密稱取適量（約相當于乙酰水楊酸0.1g），依法制備成供試品溶液，測定。按外標法以峰面積計算每片中乙酰水楊酸與咖啡因的標示含量。（2）依檢驗標準方法測定樣品含量。結果見表。

2討論

（1）分別取對照品適量，用流動相稀釋至適宜濃度，在230～350nm區間作UV-Time掃描，結果顯示咖啡因

甲酸是抑制其水解，最后選擇流動相組成為乙腈－水－甲酸（20∶30∶1）。

（3）咖啡因對照品經105℃干燥至恒重即為無水咖啡因，測得結果×1.093換算成樣品中含水咖啡因。

參考文獻

［1］國家藥品監督管理局《國家藥品標準》(WS-10001-(HD-0235)-2002).

［2］魏玲，俞如英.HPLC法測定阿斯匹林腸溶片中水楊酸的溶媒考察［J］.藥物分析雜志，2001，21(4)：298.

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