摘要 本文首次報道了遼寧省藥用植物白頭翁葉斑病的發生危害、癥狀描述及病原菌的形態特征,并進行了病原菌的分離和純化。分離得到的菌株按照柯赫氏法則進行了致病性測定。初步研究結果表明,白頭翁葉斑病是由銀蓮花殼二孢(Ascochyta anemones Kab.et Bub.)真菌侵染所致。針對此病害的發生特點,本文初步提出了相應的防治措施。
關鍵詞 白頭翁;葉斑病;病原鑒定;銀蓮花殼二孢(Ascochyta anemones Kab. et Bub.)
中圖分類號
白頭翁[Pulsitilla chinensis(Bge.)Regel]為毛茛科白頭翁屬多年生草本藥用植物,其莖葉、花和根均可入藥,具有抗腫瘤活性,抗肝損傷,抗生育,抗炎抑菌,治療慢性結腸炎和潰瘍性結腸炎等作用。長期以來白頭翁主要源于野生,主要分布于遼寧、內蒙古、河北等地。隨著遼寧農業產業結構調整的不斷深入,藥用植物栽培已經成為農民致富的重要途徑。近年來野生白頭翁的歸圃栽培越來越受到人們的重視,在此過程中發現白頭翁病害問題日趨嚴重,影響白頭翁種植業的發展。白頭翁葉斑病是遼寧省近年來發生的一種新病害,迄今尚未見對該病的系統研究報道,現將白頭翁葉斑病初步調查和病原鑒定結果報道如下。
1 材料與方法
1.1 病害調查及癥狀觀察
2007年6~10月系統調查了遼寧省沈陽市東陵地區人工栽培田白頭翁葉斑病,采取隨機取樣法,統計發病情況。
1.2 病葉采集和病原菌分離
采集典型癥狀的病葉進行分離。分離前,將病葉用清水沖洗干凈,采用常規組織分離法分離獲得病菌純培養。
1.3 致病性測定
取白頭翁健葉,無菌水反復沖洗。用分離、純化后的菌懸液進行懸滴接種,接種后進行保濕培養。共進行葉背面接種、葉正面接種、葉背面刺傷接種和葉正面刺傷接種4個處理,每處理6個葉片,每個葉片3個懸滴點,逐日觀察記錄發病狀況。

2 結果與分析
2.1 發病調查
經調查,病田率為100%,病株率為56%~90%,病情指數為11.24~32.97。病害始發期為6月上旬,發病高峰期集中在7~10月。
2.2 癥狀描述
田間調查發現,白頭翁葉斑病主要危害葉片,葉柄和莖也可發病。病斑近圓形或不規則形,灰褐色或紫褐色,邊緣深褐色,直徑3~13 mm,有輕微輪紋,后期病斑常匯合連片,上著生小黑點(分生孢子器)。發病嚴重時,葉片焦枯或提早落葉,植株長勢衰弱,嚴重影響白頭翁的產量和質量。
2.3 病原鑒定
鏡檢后發現病葉上有大量分生孢子器。分生孢子器散生或聚生,初埋生后突破表皮,球形或扁球形;頂端具乳頭狀突起,直徑90~180um,高60~1 60um;孔口圓形,胞壁加厚,呈暗褐色;器壁膜質,褐色,由2~3層細胞組成,壁厚5~8 um;分生孢子圓柱形,兩端鈍圓,正直或微彎,無色,中央生1隔膜,分隔處縊縮或無縊縮,(8~1 5)um×(3~4)p.m。參照相關文獻[3—5],鑒定確認白頭翁葉斑病菌為銀蓮花殼二孢(Ascochytaanemones Kab. et Bub.),屬半知菌亞門、腔胞綱、球殼目、殼二孢屬真菌。
2.4 致病性測定
本試驗采用的4個接種處理方式均可使白頭翁發病,并可從接種的葉片上重新分離到銀蓮花殼二孢菌(Ascochyta anemones Kab.et Bub.),證明該菌為白頭翁葉斑病致病菌。試驗發現,不同處理的發病率和發病時間均不相同,且對照沒有產生病斑(表1)。
3 結論與討論
白頭翁葉斑病屬藥用植物新病害,目前尚未見有關該病害病原菌生物學特性、發病規律及防治技術的系統研究報道。經過柯赫氏法則接種證病試驗,確認白頭翁葉斑病菌為銀蓮花殼二孢(Ascochy-ta anemones Kab.etBub.)。
目前有關白頭翁葉斑病侵染過程及侵染循環不詳,無法滿足生產上的病害防治需求。根據該病菌的種類和病害發生特點,收獲后應徹底清理田間枯枝落葉集中燒毀,減少病原菌存活量。合理密植,降低田間濕度,增施磷、鉀肥,提高植株抗病性。發病初期噴施1:1:100的波爾多液、或50%代森錳鋅500倍液,或70%甲基托布津800倍液,或50%乙霉威(萬霉靈)600倍液噴灑防治,每7~10d噴1次,連續噴2~3次。
為了保障白頭翁產業的健康發展,為病害防治提供科學依據,有關白頭翁葉斑病病原學、發病規律及防治技術有待于進一步研究。