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齒蘭環斑病毒與建蘭花葉病毒分子檢測研究

2008-04-29 00:44:03聞偉剛崔俊霞陳先鋒
植物保護 2008年6期

聞偉剛 譚 鐘 崔俊霞 陳先鋒

摘要齒蘭環斑病毒(Odontoglossum ringspot virus,ORSV)與建蘭花葉病毒(Cymbidium mosaic virus,CyMV)是嚴重危害蘭科植物的兩種主要病毒。本研究根據病毒外殼蛋白基因設計特異性引物,應用ELISA、普通RT-PCR、巢式RT-PCR和免疫捕獲RT-PCR4種方法進行了檢測研究與比較。結果表明:普通RT-PCR與ELISA方法檢測靈敏度相當;巢式RT-PCR檢測靈敏度要比普通RT-PCR與ELISA方法高出104倍以上;免疫捕獲RT-PCR檢測靈敏度介于普通RT-PCR和巢式RT-PCR之間。采用巢式RT-PCR方法對我國臺灣進境的蝴蝶蘭植株樣本檢測,1號樣本出現與陽性對照一致的特異條帶。雙向測序分析,擴增產物序列與ORSV外殼蛋白基因具有100%的同源性,表明1號蝴蝶蘭樣本攜帶ORSV。

關鍵詞齒蘭環斑病毒;建蘭花葉病毒;巢式RT-PCR;免疫捕獲RT-PCR;檢測靈敏度

中圖分類號S 436.8

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