發光桿菌碳端截短的Mcf毒素殺蟲活性研究
2009-04-29 00:44:03譚思維丁學知夏立秋吳峰孫運軍張友明
生命科學研究 2009年4期
譚思維 丁學知 夏立秋 吳 峰 孫運軍 張友明
摘要：發光桿菌能產生很多毒素殺死昆蟲宿主，這些毒素中有一種叫Mcf致軟因子，可以在大腸桿菌中表達并毒殺毛蟲，通過同源性比對分析，在Mcf氨基酸序列中N端有一個BH3的區域，擁有BH3結構域的蛋白具有細胞凋亡的功能，推測保留N端BH3結構域的碳端截短Mcf毒素具有殺蟲毒力，從發光桿菌屬(Photorhabdus luminescens subsp.laumondii)中克隆了殺蟲毒素基因mcf的5端3960bp的核酸序列(包含BH3結構域)，將該基因連接到E.coli表達載體pET28a上，并轉入BL21(DE3)，經IPl-G誘導后，在SDS-PAGE上發現145kD的目的蛋白條帶，利用親和層析純化得到純毒素，分別對甜菜夜蛾一齡幼蟲喂食生測和對甜菜夜蛾四齡幼蟲(Spodoptera ecigua)注射生測。顯示該毒素具有喂食毒力和血腔毒力，證明含有BH3區域的碳端截短Mcf毒素有殺蟲的生物活性。
關鍵詞：發光桿菌；甜菜夜蛾；Mcf毒素；BH3結構域
中圖分類號：Q939.96文獻標識碼：A文章編號：1007－7847(2009)04－0303－06
