金標法篩查ＨＢｓＡｇ漏檢標本實驗室檢測結果分析

[摘要] 目的 探討無償獻血者標本金標法篩查HBsAg的漏檢原因及對策。方法 金標法初篩合格后，經ELISA法檢測結果呈陽性的標本，再用與初篩同批號金標試紙條重新檢測，對漏檢原因進行分析。結果 11265份初篩合格標本共檢出陽性32份，漏檢率0.28%，32份漏檢標本用金標法重新檢測，陽性16份，弱陽性5份，陰性11份。結論 加強操作人員業務培訓和責任心教育，準確掌握反應條件，特別是反應時間，可以進一步降低初篩標本陽性漏檢率。

[關鍵詞]金標法; HBsAg; 漏檢; 實驗室檢測

[中圖分類號] R512.62;R446 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-9701(2009)23-115-02

金標法檢測HBsAg具有簡便、快速、無需特殊儀器設備、可單份操作等優點，是血站系統對無償獻血者獻血前HBsAg篩查的主要方法[1]。但在利用金標法初篩HBsAg的過程中，常會出現HBsAg漏檢。為了降低漏檢率，筆者對金標法初篩合格的血液，經ELISA法檢測后發現的陽性標本，再用與初篩相同批號金標試紙條重新檢測作對比試驗，分析漏檢原因，探討解決辦法，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 對象 經金標法初篩HBsAg合格后的無償獻血者標本11265份。

1.1.2 試劑 HBsAg金標法試紙條(廈門新創公司提供)，ELISA HBsAg試劑盒(由廈門新創公司和北京高達公司提供)，所有試劑均為市售合格試劑盒，在有效期內使用。

1.1.3 儀器 TECAN Freedom Evolyzer(瑞士)。

1.2 方法

初篩合格的無償獻血者血液標本，按《獻血者健康檢查要求》(GB18467-2001)，使用兩個不同廠家ELISA法試劑進行復檢，復檢結果一陰一陽者再進行雙孔復試，一種試劑陽性即定為陽性。陽性標本，用與初篩同批號金標試紙條重新檢測。所有操作均嚴格遵守操作規程，并按試劑使用說明書判斷結果。

2 結果

2008年1～8月金標法初篩合格的11265份無償獻血者標本，在實驗室分別采用廈門新創和北京高達ELISA法HBsAg試劑盒進行檢測，共檢出陽性32份，漏檢率0.28%(32/11265)。ELISA法S/CO≥1的32份標本用與初篩相同批號金標法試紙重新檢測，30min內觀察，結果見表1。

32份漏檢標本金標法重新檢測陽性與反應時間的對應關系見表2。

3 討論

11265份金標法HBsAg初篩合格標本在實驗室用ELISA法試劑檢測，共檢出32例陽性，這32份陽性標本再用與初篩相同批號金標試紙條重新檢測，21份呈陽性反應。從表1可以看出，20份S/CO>10標本，金標法重新檢測19例為陽性，1例為陰性;12份S/CO<10標本，金標法重新檢測2例為陽性，10例為陰性。說明低值漏檢主要是金標法靈敏度低所致。2例S/CO>20，金標法重新檢測呈弱陽性反應，這與ELISA法判斷結果雖然一致，但顯色線的強弱與S/CO值關系不一致。表2顯示10min內只有16例陽性，4例11～20min內呈陽性反應，1例20～30min呈陽性反應。

HBsAg金標法初篩漏檢原因主要是:(1)金標試劑本身的局限性。金標法試劑的靈敏度不及ELISA法，會造成部分弱陽性標本的漏檢[2];(2)加樣量不規范。試劑說明書規定加樣量為60μL，如果血量過少，會造成HBsAg濃度比實際濃度降低，引起漏檢;如果血量過多特別是再混有紅細胞，會造成血液外溢，且濾膜無法有效阻擋紅細胞，使紅細胞和血清一起向檢測線移動，造成檢測背景呈紅色，影響弱陽性結果判斷;(3)溫度、濕度等環境因素過高或過低，都會影響抗原抗體反應，也可影響血清在濾膜上的層析速度，進而影響試驗結果[3];(4)實驗人員操作不規范，經驗不足或操作失誤等;(5)高值漏檢可能與“帶現象”或HBsAg變異型、亞型或試紙條自身原因有關;(6)反應時間不足是重要原因。

根據金標法檢測HBsAg的特點，建立切實有效的預防措施，以減少漏檢，節約寶貴血液資源。 ①建立標準操作規程并嚴格遵守，加強操作人員業務培訓和責任心教育。②耐心做好獻血者的解釋工作，保證反應時間不低于10min，爭取做到20min。③盡量保持適宜的環境溫度、濕度。④未用完的試紙條，要密封保存，防止受潮。⑤選購靈敏度高、特異性好、加樣量少、反應速度快的優質試紙。最好用ELISA法先篩選。發現試紙性能不穩定立即更換。

[參考文獻]

[1]王凱. HBsAg金標快速檢測在街頭獻血中的必要性[J]. 中國誤診學雜志，2003，3(6):905.

[2]趙曉華，李錦，李軍，等. 5個廠家HBsAg金標診斷試劑的比較[J]. 中國輸血雜志，2002，15(4):272-273.

[3]錢立瓊，譚全旭，王鵬. 一種用于快速金標法檢測HBsAg的加溫箱[J]. 中國輸血雜志，2004，17(5):380.

(收稿日期:2009-06-19)