慢性心力衰竭患者外周血中ｓＣＤ１４水平變化及臨床意義

[摘要] 目的 研究心力衰竭患者外周血sCD14水平的變化特點，探討sCD14水平與慢性心力衰竭患者心功能及單核細胞的相關性。方法 選取慢性心力衰竭患者126例，入院次日清晨抽取靜脈血，并以50例健康人作為對照。根據NYHA分級將慢性心力衰竭患者按心功能I、II、III、IV四個等級分為四組。ELISA法測定血清中的sCD14含量，并計算外周血中單核細胞的數量及百分比。結果 心功能I、II級慢性心力衰竭患者外周血清中sCD14水平、單核細胞數量及百分比與健康對照組相比無明顯差異(P>0.05)，心功能III、IV級慢性心力衰竭患者外周血中sCD14水平、單核細胞數量及百分比與健康對照組及心功能I、II級患者相比均顯著增加(P<0.05);心衰患者sCD14水平與心衰分級、單核細胞數量及百分比均呈顯著正相關(r=0.731，P=0.011;r=0.872，P=0.013;r=0.769，P=0.027)。結論 慢性心力衰竭患者外周血中的sCD14水平隨著心功能加重而逐漸增高。

[關鍵詞] 慢性心力衰竭; 細胞因子; 可溶性CD14(sCD14); 單核細胞

[中圖分類號] R541.6 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-9701(2009)23-17-03

The Research of the Levels of Soulable-CD14 in Peripheral Blood in Patients with Chronic Heart Failure

WU Xiuping

The Department of Medicine Out-patient of Yanling Hospital ofGuangdong Province，Guangzhou，510507，China

[Abstract] ObjectiveTo investigate the levels of soulable-CD14(sCD14) in peripheral blood in patients with chronic heart failure and the correlation of the level of sCD14 with the quantities of peripheral blood mononuclear cells. Methods126 patients with chronic heart failure were assigned four groups according to NYHA(NYHA I group，NYHA II group，NYHA III group and NYHA IV group)，and 50 healthy volunteers were enrolled as control group. The levels of sCD14 in peripheral blood were measured by ELISA and calculated the the quantities of peripheral blood mononuclear cells. ResultsThere were no difference of the levels of sCD14 and the quantities of mononuclear cells in NYHA I group and NYHA II group compared with control group(P>0.05). The levels of sCD14 and the quantities of mononuclear cells in NYHA III group and NYHA IV group were significantly higher than those in NYHA I group，NYHA II group and control group(P<0.05). The levels of sCD14 were markedly positively correlated with heart function classification and the quantities of mononuclear cells respectively(r=0.731，P=0.011;r=0.872，P=0.013;r=0.769，P=0.027). ConclusionThe levels of sCD14 were significantly increased with the increasing of severity degree of heart function.

[Key Words]Chronic heart failure; Cytokine; Soulable-CD14; Mononuclear cells

可溶性CD14(sCD14)參與調控炎癥因子的釋放，大量的實驗表明炎癥因子在慢性心力衰竭的發生與發展過程中起著重要的作用[1]，但慢性心力衰竭患者外周血中的sCD14水平如何尚未見報道。

本研究旨在研究慢性心力衰竭患者外周血中sCD14水平的變化特點，探討sCD14水平與慢性心力衰竭患者臨床癥狀嚴重程度的相關性。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選取我院內科臨床確診無明顯肺部感染的慢性心力衰竭患者126例，其中男性78例，女性48例;年齡33～81歲;排除血液病、腫瘤及嚴重腸道疾病等。

根據NYHA分級方案將慢性心力衰竭患者按心功能I、II、III、IV四個等級分為a、b、c、d四組，根據臨床癥狀輕、中、重程度分為a、b、(c+d)三組，另選擇健康體檢者50例作為對照組，年齡40～79歲。

1.2 標本采集及處理

入院次日清晨靜脈采血5mL，促凝，3000r/min 離心4min，取血清置于-20℃冰箱保存待測;EDTA-K2 抗凝管采靜脈血2mL，用于血細胞分析。

1.3 方法

1.3.1 sCD14測定方法 采用萊德爾公司sCD14 Human ELISA Test Kit，按試劑盒說明書操作采用Bio Rad 公司Bench mark酶標儀制定標準曲線和樣本檢測。

1.3.2 單核細胞數量及比率的測定 采用日本東亞1800i五分類細胞儀，檢測EDTA抗凝靜脈血細胞，計算單核細胞數量及比率。

1.4 統計學處理

所有的數據采用均數±標準差(χ±s)表示，使用SPSS13.0統計軟件處理數據，多組均數比較采用方差分析。相關性分析采用直線相關回歸。P<0.05表示差異有顯著性。

2 結果

2.1 不同心功能分級慢性心力衰竭患者外周血中sCD14水平

心功能I、II級慢性心力衰竭患者外周血清中sCD14水平比健康對照組相比無明顯差異(P=0.7610;P=0.3620)，心功能III、IV級慢性心力衰竭患者外周血中sCD14水平與健康對照組及心功能I、II級患者相比均顯著增加(P=0.0002，P=0.0269，P=0.0319;P=0.000，P=0.0001，P=0.0001)。見表1。

2.2 不同心功能分級慢性心力衰竭患者外周血單核細胞數量的比較

心功能I、II級心力衰竭患者外周血單核細胞數量與健康對照組相比無明顯差異(P=0.5732，P=0.3824)，心功能I、II級心力衰竭患者外周血單核細胞百分比與健康對照組相比亦無明顯差異(P=0.9202，P=0.6106);心功能III、IV級慢性心力衰竭患者外周血中單核細胞數量與健康對照組及心功能I、II級患者相比均顯著增加(P=0.0026，P=0.0272，P=0.0479;P=0.0001，P=0.001)P=0.001);心功能III、IV級慢性心力衰竭患者外周血中單核細胞百分比與健康對照組及心功能I、II級患者相比亦顯著增加(P=0.0068，P=0.0337，P=0.0332;P=0.000，P=0.000，P=0.001)。見表2。

2.3 心衰患者sCD14水平與心功能分級的相關性

心衰患者sCD14水平與心衰分級呈顯著正相關(Y=1.937+ 0.25X3，r=0.731，P=0.011)。

2.4 心衰患者中sCD14水平與單核細胞絕對數及百分比的相關性

心衰患者sCD14水平與單核細胞數量及百分比均呈顯著正相關(Y=2.45+0.058X1，r=0.872，P=0.013;Y=2.99+0.077X2r=0.769，P=0.027)。

3 討論

CD14是位于單核/巨噬細胞表面的一種白細胞分化抗原，是LPS的重要受體，以膜結合型的CD14(Membrane bound form CD14，mCD14)和可溶性CD14(Soluble CD14，sCD14)兩種形式存在。sCD14較mCD14缺少甘油磷脂酰肌醇尾巴(GPI)，不能錨定在細胞膜上，而游離在外周血中。其來源主要通過以下幾種途徑:(1)由內源性酶促反應(由蛋白酶或磷脂酶催化)，使mCD14分解(脫去GPI成分)、脫落形成。(2)由CD14基因轉錄、合成的CD14蛋白不進行PI化或逃脫PI化，直接分泌入血。(3)還可由髓系細胞直接分泌[2]。

單核細胞表面的mCD14與入血的LPS或者LPS與LBP結合形成的復合物結合，將LPS信息傳遞給單核細胞，刺激其分泌TNF、IL-1等細胞因子，增強機體免疫反應性和炎癥反應，同時也介導其對LPS/LBP復合物的吞噬作用[3]。在LPS的刺激下，54%～60%mCD14從單核細胞表面脫落入血形成sCD14，導致血中sCD14水平的升高，減弱單核細胞、巨噬細胞對LPS的反應性，防止TNF的過度產生。而sCD14可與LPS-LBP復合體或LPS單體結合，將LPS信息傳遞不能表達mCD14的內皮細胞和平滑肌細胞，活化這些細胞，從而釋放IL、GF、NO，TNF-α等，并表達黏附因子，提高宿主對LPS的敏感性，增強宿主對革蘭氏陰性菌的抵抗力[4]。

大量的實驗表明，炎癥因子在心力衰竭的發生與發展過程中起著重要的作用。免疫激活學說的提出為心力衰竭的進一步治療提供了可能和新的思路。胃腸道是人體最大的“內毒素庫”，心衰發生后，腸源性內毒素血癥與炎性介質的誘生密切相關[5-6]，心衰患者外周血單核細胞、巨噬細胞等炎癥細胞的激活釋放出大量的細胞因子，如TNF-α，IL-1，IL-6等。大量的研究表明，針對心衰的神經內分泌系統激活拮抗治療可抑制心衰的進展[7]，仍不能完全阻斷CHF的進行性發展。在CHF發生發展過程中可能存在免疫激活的介入，通過向血液中釋放有害物質來加速心衰的進展，這可能是CHF的重要機制之一。

本研究結果顯示，心功能III、IV級慢性心力衰竭患者外周血中sCD14水平與健康對照組及心功能I、II級患者相比均顯著增加，表明sCD14可能參與了心力衰竭的免疫激活過程。本研究還發現，心功能III、IV級慢性心力衰竭患者外周血中單核細胞數量及百分比與健康對照組及心功能I、II級患者相比均顯著增加，因此可以推測對于慢性心力衰竭患者，隨著心功能的加重，sCD14水平升高，單核細胞在其中起到了重要作用。研究表明，單核細胞數量和活性的增加可引起mCD14表達的增高，從而導致外周血中sCD14升高。并且通過相關性研究也發現sCD14水平與心功能分級以及單核細胞數量及百分比均呈顯著正相關，進一步證實了單核細胞數量的增加是慢性心力衰竭患者外周血中sCD14升高的主要原因。而導致單核細胞增加的原因可能是由于心力衰竭患者處于非感染性炎癥狀態，在心衰患者腸道缺血、缺氧、水腫情況下，內毒素移位激活單核細胞釋放炎癥因子如IL-1，TNF-α等。

[參考文獻]

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(收稿日期:2009-06-03)