學生在顯微鏡實驗教學中存在問題分析及對策

摘要：顯微鏡的正確使用直接關系到觀察對象的準確指認。文章結合實驗教學實踐經驗，分析了實驗教學中學生使用顯微鏡存在的問題及產生的原因，對相關問題提出了相應對策。

關鍵詞：臨床檢驗學；實驗教學；顯微鏡

臨床檢驗學（以下簡稱臨檢）實驗中對有形成分的形態觀察，顯微鏡是必需的工具。顯微鏡的種類繁多，最常使用的是普通光學顯微鏡（以下簡稱顯微鏡）。實驗時，是否正確和規范地使用顯微鏡關系到能否準確指認觀察對象。如何通過實驗教學，讓學生很好地掌握顯微鏡的使用方法，促進學生提高使用顯微鏡的能力，提高實驗教學

質量，滿足臨床實驗對學生素質的要求，是教學工作者應該認真思考、積極探索并致力解決的問題。筆者認為，

目前實驗教學中學生使用顯微鏡存在以下問題。

不了解顯微鏡的結構

在臨檢實驗教學中，通過對幾個年級學生的書面問卷調查，筆者發現很多學生對顯微鏡結構知道得不是很全面，如調焦系統的粗動調焦（以下稱粗調）與微動調焦（以下稱微調），反光鏡、聚光器及光圈等。不熟悉顯微鏡的結構，學生便很難正確和規范地使用顯微鏡，更談不上把握使用要領和使用能力的提高，使相關的形態學實驗教學很被動。針對這一問題，筆者在教學計劃中專門安排具體的實驗課，詳細講解顯微鏡的結構及其作用，同時充分利用課余時間讓學生熟悉顯微鏡的結構，把顯微鏡的使用作為技能考核內容，同時也把顯微鏡的一些重要結構及其作用的內容在理論考試中體現出來。通過觀察、練習和不斷強化，學生能較快地熟悉顯微鏡的結構特征，并能準確地說出其相應部件的作用，為正確、規范使用顯微鏡奠定了堅實的基礎。

不能正確認識光線強弱對標本觀察效果的影響

很多學生片面認為：觀察標本時，視野（通過顯微鏡所能看到的標本所在的空間范圍）的光線越強，視野會越清楚，標本會越清晰。其實不然。辨別和指認標本，主要是利用不同有形成分或同一成分不同結構在觀察視野中的顏色或（和）亮度反差。這種反差愈大，結構的典型特征愈突出、愈明顯、愈容易辨認。如果視野光線太強，血涂片中染色的有形成分（如白細胞）各部位亮度和顏色對比反差減低，細微結構模糊不清，不同成分的典型特征（如白細胞核染色質、胞漿中的顆粒）不明顯，造成錯誤的指認；液體中有形成分（如尿液中的管型、細胞）與液體環境的亮度反差本來就小，如果光線太強，則很難找到要被觀察的對象，即使找到，也很難鑒別。另外，視野光線太強容易造成視覺疲勞。因此，觀察標本時，視野的光線要明暗適宜。要有理想的明暗適宜的光線，需要把調節反光鏡、聚光器的位置及光圈的大小有機地結合起來。實驗教學中除了用講解和演示的方法教會學生怎樣調節光線之外，還應該有意識地讓學生比較視野中強光線和明暗適宜的光線，比較兩種光線條件下有形成分的觀察效果。

另外，學生在轉換物鏡時不注意調節光線。不同倍數的物鏡在同樣的光線下通過通光孔時，視野中的光線強弱會不同。高倍鏡轉低倍鏡時，視野光線變強；低倍鏡轉高倍鏡時，光線又變弱。因此，在轉換物鏡時要及時調節光線，才能觀察到良好的物像。在實驗教學中，教師要詳細講解和規范示教，更應讓學生對比光線的變化對物像觀察的影響。通過對比，印象鮮明、深刻、持久，真正起到事半功倍的效果。

不了解調焦系統，盲目調節

（一）不熟悉粗調與微調的作用方向，盲目調節

顯微鏡焦距的調節需要通過粗調或微調來實現。粗調與微調的作用方向是一致的，只是調節的幅度大小不同而已。它們的作用方向是：使物鏡頭與標本分離、靠攏。

熟悉和掌握粗調和微調的兩種作用的方向，對于觀察標本時顯微鏡的調焦非常有用，特別是物鏡頭轉換（如高倍鏡轉換到低倍鏡、低倍鏡直接轉換到油鏡頭等）后，如何快速、簡便、準確地調節焦距獲得清晰的物象，尤其重要。在實驗教學中，對顯微鏡的使用方法，教師應充分利用教學資源進行分析講解。通過示范操作，使學生了解粗調和微調的兩種作用方向；通過分組指導，使用教學標本（如血涂片），讓學生實際操作，使學生熟悉并掌握粗調和微調的作用方向。學生通過反復調節、細心體會，使用顯微鏡的能力有了長足的進步，很快便能準確地完成焦距調節。

另外，多數學生在剛開始使用顯微鏡觀察有形成分時，沒有很好地使用微調。其實，微調的作用不僅在于調節焦距。當調節到觀察標本所需的焦距而辨別和指認有形成分時，再次使用微調非常重要。觀察標本時，明暗適宜的光線能形成標本的顏色、亮度反差，對微調來回地進行小幅度的順時針和反時針調節，可以增加這種反差。因此，觀察標本時，應該充分利用微調，才能獲得較好的觀察效果。

（二）把物鏡頭置于離載玻片很近的位置來調節焦距

物鏡頭轉換和調焦是應用顯微鏡時非常重要的步驟，它可以直接影響標本的觀察效果。部分學生錯誤地認為，物鏡離載玻片（標本）越近，越容易調到焦距，越方便找到物象。其實，這樣容易壓壞蓋玻片或載玻片，弄臟和損壞物鏡頭。導致這種錯誤認識的原因是學生不了解物鏡放大倍數、焦距、工作距離、長度的相互關系。

放大倍數是指顯微鏡經多次成像最終所成的像大小相對于原物體大小的比值。放大倍數由接目鏡（簡稱目鏡）和物鏡共同放大而成。工作距離是指物鏡前表面中心到被觀察標本之間滿足工作要求的距離范圍。工作距離通常可以近似地測出。物鏡焦距（mm）等于相當光學筒長與放大倍數的比值。相當光學筒長是物鏡上焦平面到目鏡下焦平面的距離，一般為160mm。通過實際測定近似值和計算，可獲得如表1中物鏡放大倍數與焦距及工作距離的數據。

從上面表中的數據不難看到，物鏡的放大倍數增加，焦距和工作距離反而變小。反之亦然。另外，我們通過觀察顯微鏡的物鏡頭長度，不難發現顯微鏡配套的物鏡頭長度與放大倍數的關系是：放大倍數增加，物鏡頭長度也增加。因此，轉換物鏡頭時要注意到焦距、工作距離和物鏡頭長度的變化，而不是盲目地把物鏡頭置于離標本很近的距離，心中毫無把握地調節。

另外，筆者發現一種非常有用也切實可行的轉換物鏡及調焦的方法。對于配套的物鏡頭，低倍鏡轉換到高倍鏡時，低倍鏡找到清晰的物象后，觀察標本需要轉換到高倍鏡或油鏡頭，可利用低倍鏡的調焦結果直接轉換到高倍鏡或油鏡頭，觀察者的眼睛不必離開觀察視野，然后調節微調便可找到清晰的物象，微調的作用方向應使物鏡和標本分離；高倍鏡或油鏡頭轉換到低倍鏡時，則與上面步驟剛好相反。當然，不管如何轉換物鏡，都要同時調節光線，才能獲得清晰的物象。

使用物鏡觀察標本時不按先低倍鏡后高倍鏡的順序

部分學生剛開始使用物鏡觀察標本時，直接用所需放大倍數的物鏡，而不按先低倍鏡后高倍鏡的順序。不同放大倍數的物鏡，能觀察到的視野范圍不同，倍數越高，觀察到的視野范圍越小，反之亦然。不管用何種放大倍數的高倍鏡或油鏡觀察標本，先用低倍鏡觀察都是實驗中不可或缺的重要步驟。如染色血片細胞的分類計數，先使用低倍鏡可以觀察細胞的染色情況、細胞的分布情況以及是否有染料雜質覆蓋在細胞上，這些均可以為準確指認細胞及觀察細胞的質和量的變化提供有力的依據。

觀察液體標本中的有形成分（如細胞、管型），先使用低倍鏡同樣重要。這些標本中不同特征的成分可能分布在不同的液層。適宜的視野光線條件下，用高倍鏡觀察同一種成分可獲得內容物（如胞漿中的顆粒）較清晰的物象效果。但是，在使用高倍鏡觀察不同液層的有形成分時，調節焦距時可移動的距離比低倍鏡要小。對于剛接觸顯微鏡的學生來說，容易把物鏡頭浸泡到液體中壓壞載玻片或蓋玻片。使用低倍鏡觀察調節焦距時，由于可移動的距離較大，方便查找、觀察不同的有形成分。

參考文獻：

[1]曾照芳，翟建才．臨床檢驗儀器學［M］．北京.：人民衛生出版社，2001．

[2]叢玉隆，王淑娟.今日臨床檢驗學[M]．北京：科學技術出版社，1997．

[3]袁繡芬，韓文祥，王曉萍．顯微鏡使用的誤區［J］．檢驗醫學教育，2002，（2）．

作者簡介：

曾順良（1972—），男，湖南益陽人，廣東省潮州衛生學校講師，主要從事《臨床檢驗學》、《生物化學》等課程教學。

（本文責任編輯：楊在良）