上海青浦地區犬弓形蟲病血清學調查與分析

劉　雁　李　堅　袁明龍

摘要調查了解上海青浦地區犬弓形蟲病的感染情況，結果表明：不同養殖場所犬（城鎮控養犬、農村犬、養殖場犬、寵物診所就診犬）弓形蟲病感染率在5%~9%。隨犬只年齡增長，該病感染率逐步增高。犬只小于1歲感染率最低（＜5%），大于5歲感染率最高（＞20%），不同性別之間感染率無顯著差異（P>0.05）。寵物診所病例調查顯示弓形蟲病占所有病例的4.93%。IHA與ELISA檢測結果經t檢驗比較差異不顯著（P＞0.05）。當地不同養殖場所犬均存在弓形蟲病感染，應加以重視并進行綜合防制。2種檢測方法中，IHA方法適用于大規模流行病學調查。

關鍵詞犬；弓形蟲病；血清學調查；上海青浦

中圖分類號S852.72+9文獻標識碼A文章編號 1007-5739（2009）07-0201-02

弓形蟲病（Toxoplasmosis）是由剛第弓形蟲（Toxoplasma gondii）引起的呈世界性分布的一種人獸共患的原蟲病[1]，感染弓形蟲可能會使孕婦的胎兒出現先天畸形、缺陷、死亡等不良后果，感染此病的人也有可能死亡。許多國家人的平均感染率在25%~50%，犬的平均感染率在20%~30%[2]，在我國弓形蟲的感染率也有所上升。犬弓形蟲病的多數犬為隱性型，但近年來暴發或呈急性型經過有增多的趨勢。由于隱性型無臨床特征，急性型與犬瘟熱等癥狀相似，故給人們對于此種病犬的防范與控制帶來相當大的困難。因此，對該病防制必須以預防感染為主，而犬作為重要的中間宿主，對其進行感染的調查具有重要意義。本研究就上海市青浦地區11個鎮（街道）散養準養犬、養殖場犬弓形蟲感染率進行血清學調查，采用間接血凝試驗對來自不同養殖場所的865條犬只進行血清學抗體檢測；對2 192例寵物診所病例進行該病發病情況的統計分析；對128份犬血樣進行間接血凝試驗（IHA）與酶聯免疫吸附試驗（ELISA）檢測，并將2種方法進行比較。根據調查結果，采取綜合防制措施，在當前飼養寵物犬逐年增多的形勢下，對于保護犬的健康及人類公共衛生安全具有重要意義。

1材料與方法

1.1試驗材料

1.1.1檢測血清。上海市青浦區11個鎮（街道）散養準養犬、養殖場犬分別按不少于飼養數1%、10%比例采集血樣分離血清，寵物診所就診犬隨機采樣分離血清。

1.1.2檢測試劑。弓形蟲間接血凝試驗凍干抗原、標準陽性、陰性血清、稀釋液，均在有效期內使用，由中國農業科學院蘭州獸醫研究所生產。弓形蟲IgG抗體酶免檢測試劑盒，均在有效期內使用，由海泰生物制藥有限公司生產。

1.2 試驗方法

1.2.1調查與試驗設計。犬弓形蟲感染的血清學調查：按不同養殖場所、不同年齡、不同性別、不同時間開展血清學調查；對寵物診所就診犬進行感染與發病情況的調查。犬弓形蟲不同檢測方法比較試驗：對散養準養犬血清采用間接血凝試驗（IHA）與酶聯免疫吸附試驗（ELISA）進行比較試驗。

1.2.2檢測方法。依據《弓形蟲病診斷技術》NY/T 573-2002，采用間接血凝試驗（IHA）檢測弓形蟲IHA血清滴度，大于1∶64即判為弓形蟲陽性。依據弓形蟲IgG抗體酶免檢測試劑盒檢測說明書，采用酶聯免疫吸附試驗（ELISA）檢測弓形蟲IgG抗體，S/N≥3.0即判為弓形蟲陽性。

1.2.3數據處理。按檢測所得數據計算弓形蟲感染率（陽性率），用生物統計學方法，分析比較差異性。

2結果與分析

2.1不同養殖場所犬弓形蟲感染情況

城鎮控養犬、農村犬、養殖場犬感染率分別為5.76%、9.00%、6.00%，農村犬的感染率最高，其次為養殖場犬，城鎮控養犬最低，經t檢驗差異不顯著（見表1）。

2.2不同年齡犬弓形蟲感染情況

按年齡＜1歲、1~2歲、2~5歲、≥5歲等4個年齡段對犬進行檢測，＜1歲城鎮控養犬、農村犬的感染率最低，都低于5%；隨著年齡增長，感染率不斷提高；≥5歲感染率最高，感染率≥20%。經方差分析，不同年齡犬之間感染率差異顯著，城鎮控養犬與農村犬之間感染率差異不顯著（見圖1）。

2.3不同性別犬弓形蟲感染情況

對341條公犬、209條母犬檢測的弓形蟲感染陽性率分別為7.63%、6.22%，二者經χ2比較差異不顯著（P＞0.05）（見表2）。

2.4寵物診所犬弓形蟲感染與病例調查

在寵物診所就診犬中隨機抽檢315份血清，經檢測感染率為5.40%（見表3）。

2 192例寵物診所就診病例中，病毒病占46.94%，弓形蟲病占所有病例的4.93%，占寄生蟲病例的34.62%，其他病例所占比例都低于病毒病、寄生蟲病例（見表4）。

2.5不同時間血清學調查情況比較

2005~2007年開展散養犬與養殖場犬感染調查，感染陽性率都在逐年降低，從2005年散養犬、養殖場犬的感染率10.94%、8.00%，至2007年感染率都下降在5%以下（見圖2）。

2.6不同檢測方法比較試驗

采用間接血凝試驗（IHA）與酶聯免疫吸附試驗（ELISA）2種不同檢測方法檢測散養準養犬128份，二者檢測結果經t檢驗，差異不顯著（P＞0.05）（見表5）。檢測陽性13份血清來自同一動物，3份ELISA陽性，IHA陰性，1份IHA陽性，ELISA陰性。

3結論與討論

（1）不同養殖場所犬弓形蟲感染情況表明，上海青浦地區近3年城鎮控養犬、農村犬、養殖場犬都存在不同程度的感染狀況，平均感染陽性率為7.09%，農村犬最高達到9.00%，城鎮控養犬最低為5.76%。這主要是由于農村犬養殖管理條件較差，大多為散放飼養，與貓這個終末宿主接觸機會較多，增加了感染弓形蟲的幾率，而城鎮控養犬絕大多數為飼養在室內，即使到戶外也有主人看護，這減少了與貓等不利因素接觸。養殖場由于本身是養犬的專業場所，有較為規范的飼養管理條件，因此也減少了感染的幾率，但作為養殖場在調查中也有6.00%的感染陽性率，也應引起養殖場的注意。

（2）不同年齡犬弓形蟲感染調查結果經方差分析差異顯著，隨著年齡增長犬感染率也越來越高，＜1歲城鎮控養犬、農村犬的感染率最低（＜5%）；1~2歲犬的感染率在5%~8%；2~5歲犬的感染率在7%~15%；≥5歲犬的感染率最高（≥20%）。這一方面是因為犬感染弓形蟲后抗體一旦產生，能終生存在于犬體內，另一方面也說明隨著年齡增長，犬感染弓形蟲的幾率也在不斷增長。城鎮控養犬與農村犬感染率比較，經方差分析差異不顯著，說明城鎮控養犬與農村犬同樣存在隨年齡增長而增加感染幾率的情況。

（3）公犬、母犬弓形蟲感染陽性率分別為7.63%、6.22%，二者經χ2檢驗比較，差異不顯著（P＞0.05），犬弓形蟲感染不存在性別差異。

（4）寵物診所就診犬弓形蟲感染率為5.40%，診所就診犬主要是城鎮控養犬，因此該感染率與城鎮控養犬5.76%感染率基本一致。診所犬病例調查統計表明，當地除了病毒病占46.94%外，在其他疾病中寄生蟲占了較大比例為14.23%，而弓形蟲病占了所有病例的4.93%，占寄生蟲病例的34.62%，可見弓形蟲在青浦地區犬中已有一定發病比例，應引起注意。

（5）近3年犬感染調查結果表明，當地無論是散養犬還是養殖場犬感染率在逐年下降，2007年時感染率分別為4.84%、4.62%，散養犬、養殖場犬感染陽性率分別下降了6.1個百分點、3.38個百分點。這主要是采取了綜合防制措施，感染率不斷降低，從而使犬弓形蟲得到了有效控制。

（6）犬易受弓形蟲的感染，世界范圍內的犬弓形蟲血清陽性率為19.6%~91.0%[3]，2007年上海市浦東地區城鎮控養犬、農村犬感染率為5.3%、5.9%[4]，本調查近3年城鎮控養犬、農村犬感染率為5.76%、9.00%，2007年感染率為3.92%、5.56%，說明近3年城鎮控養犬感染率略高于浦東地區，而農村犬感染率則較高，為減少犬弓形蟲感染，對犬加強管理及采取必要的防制感染措施，青浦地區在2007年無論城鎮控養犬還是農村犬感染率都低于上幾年，也略低于2007年浦東地區的感染率。

（7）弓形蟲病的調查與診斷離不開血清學檢測方法，選擇合適的方法診斷弓形蟲病直接關系到人與動物健康。本次試驗研究了2種較為常用的檢測方法，間接血凝試驗（IHA）與酶聯免疫吸附試驗（ELISA）檢測結果經t檢驗，差異不顯著（P＞0.05）。IHA檢測14份陽性中有13份與ELISA（下轉第204頁）

（上接第202頁）

檢測結果完全一致，1份陽性與ELISA檢測結果不同，ELISA檢測有3份陽性與IHA檢測結果不同。這2種方法中，間接血凝試驗（IHA）簡便、快速、靈敏、費用較低，適用大規模流行病學調查[5]；酶聯免疫吸附試驗（ELISA）可能更為靈敏，但實際操作試劑、儀器設備費用高。因此，本次流行病學調查采用IHA檢測方法。

（8）本調查的結果顯示，上海青浦地區養殖場、散養準養犬仍存在一定比例的弓形蟲感染情況，犬弓形蟲這一人畜共患病應受到各方面的重視與關注。加強犬的監測工作作為防控犬弓形蟲的重要手段，但由于犬的采樣存在較大的危險性，以及檢測試劑、采樣勞務等經費問題，開展更為全面的檢測需要經費、人員等的支持，才能更好開展此項工作，這有待于今后進一步解決。

4參考文獻

[1] 張仲秋，李金祥，徐百萬，等.人畜共患病培訓教材[M].北京：農業部獸醫局，2006.

[2] 全炳昭.犬弓形體病[J].中國獸醫雜志，2004，40（12）：38-42.

[3] BJORKMAN C，LUNDEN A，UGGLA A.Prevalence of antibodies to Neospora caninum and Toxoplasma gondii in Swedish dogs[J].Acta Vet Scand，1994（35）：445-447.

[4] 瞿浩生，劉明華，俞向前，等.上海浦東地區犬弓形蟲病的流行情況調查[J].中國獸醫寄生蟲病，2007，15（6）：34.

[5] 王艷華，張德林，李學瑞，等.弓形蟲病免疫學診斷方法研究進展[J].動物醫學進展，2007，28（6）：53-57.