濃百合劑提取工藝優(yōu)化研究

楊 君,孫東寧,楊躍輝

濃百合劑為純中藥制劑,主要由麻黃、苦杏仁、黃芩、甘草等 16種中藥組成。具有清熱解毒、宣肺平喘、化痰止咳之功效,臨床上主要用于百日咳及其他咳喘癥等。該制劑經(jīng)多年的臨床應(yīng)用,療效確切,為了便于臨床應(yīng)用,最大限度地保留有效成分,確保臨床治療效果,筆者以正交試驗優(yōu)化原有制劑工藝,以處方中所含有效成分麻黃堿和偽麻黃堿含量為評價指標(biāo),篩選出合理的提取工藝,現(xiàn)將實驗結(jié)果報道如下。

1 實驗部分

1.1 主要儀器與試藥

1.1.1 主要儀器 高效液相色譜儀 A gilentlloo (美國安捷倫);TC-10KA型與 T-1000型電子天平[美國雙杰兄弟 (集團)有限公司 ];AS10200B超聲波消洗器(天津奧特賽恩斯儀器有限公司);砂芯過濾裝置(沈陽市華僑玻璃儀器廠)。

1.1.2 試藥 藥材 (購自安徽毫州市中藥飲片廠,并經(jīng)檢驗符合藥典規(guī)定);鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿(中國藥品生物制品檢定所,批號分別為1241-200001和 1237-200002);高效液相色譜儀所用試劑為色譜純,水為重蒸餾水,其他試劑均為分析純。

1.2 實驗方法與結(jié)果

1.2.1 溶液的制備 對照品溶液的制備:分別精密稱取鹽酸麻黃堿對照品 9.96m g、鹽酸偽麻黃堿對照品 10.14m g,置 100mL容量瓶中,用甲醇溶解稀釋至刻度,搖勻,作為對照品溶液。供試品溶液的制備:用移液管精密稱取濃百合劑 10mL置具塞錐形瓶中,精密加入 40mL甲醇,稱重、超聲40m in,放冷,再稱重,用甲醇補足重量,用微孔濾膜濾過,濾液作為供試品溶液。

1.2.2 正交試驗設(shè)計 根據(jù)水煎煮提取生產(chǎn)的實際情況,影響水提取的主要因素有浸泡時間(A)、加水量(B)、提取次數(shù) (C)、提取時間 (D)4個。現(xiàn)對這 4個因素進(jìn)行考察,每個因素 3個水平,按 L9(34)正交表進(jìn)行試驗,因素水平表見表1。以麻黃堿、偽麻黃堿含量為指標(biāo),綜合評價此提取工藝水平優(yōu)劣。

表1 因素水平表

1.2.3 制備工藝流程 稱取處方量藥材共 9份,按因素水平表的規(guī)定加熱煎煮、合并煎液、濾過,濾液濃縮至相對密度為 1.02(50℃)以上,分裝到100 mL的塑料瓶中。

1.2.4 鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿含量測定[1]色譜柱:Agilent SB C18-Aq(4.6 mm×150 mm, 5μm);流動相:乙腈-0.1%三乙胺水溶液(1.8∶98.8,冰醋酸調(diào) pH 值 3.0);流速: 1.0 mL/min;檢測波長:210 nm;柱溫:25℃;進(jìn)樣量:10μL。

1.2.5 正交試驗設(shè)計與實驗結(jié)果分析 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各 10μL,注入高效液相色譜儀,得出色譜圖,根據(jù)外標(biāo)法公式計算,得鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿含量,結(jié)果見表2,直觀分析見表 3。

2 結(jié)果

從表 3的直觀分析,以麻黃總生物堿含量為考察指標(biāo),濃百合劑水煎提取的最佳工藝條件為C2A1B2D3、C3A1B2D3,即加水提取 2次 (鹽酸麻黃堿)或 3次(鹽酸偽麻黃堿)、浸泡 0.5 h、每次加6倍量水、煎煮 2 h,考慮到實際生產(chǎn)的效率和經(jīng)濟效益,為降低成本、節(jié)約能源,確定水煎提取工藝條件為加水浸泡 0.5 h,提取 2次,每次加 6倍量水、提取 2 h。

表2 正交試驗設(shè)計與結(jié)果

表3 實驗結(jié)果分析

3 驗證試驗

為驗證篩選工藝的可行性和產(chǎn)品質(zhì)量指標(biāo)的穩(wěn)定性,按照篩選的最佳工藝條件,連續(xù)生產(chǎn) 3批濃百合劑,每組隨機取樣檢驗,并與原處方工藝生產(chǎn)的濃百合劑質(zhì)量進(jìn)行對比,結(jié)果見表 4。

表4 質(zhì)量考察結(jié)果(mg/mL)

根據(jù)中藥制劑穩(wěn)定性考察的基本要求,對篩選工藝生產(chǎn)的濃百合劑進(jìn)行穩(wěn)定性研究。具體操作:取濃百合劑樣品(批號為 20090113)分別于 0、1、2、3、6、9個月,對其外觀性狀、鑒別、檢查等穩(wěn)定性項目進(jìn)行測定。結(jié)果均無明顯變化,表明以篩選工藝生產(chǎn)的濃百合劑穩(wěn)定性良好。

4 討論

麻黃為本方君藥,其主要有效化學(xué)成分為麻黃堿、偽麻黃堿等生物堿類,易溶于水,而且其他藥材的主要成分或有效成分多為水溶性成分,故選擇水為浸出溶劑,采用煎煮法提取,以保證有效化學(xué)成分的提取完全。以麻黃堿、偽麻黃堿的含量為指標(biāo)做正交設(shè)計,確定濃百合劑的最佳水提取工藝。通過綜合分析,既要最大限度地提取有效成分,又要從經(jīng)濟效益方面考慮降低成本,得出最佳提取條件為處方量藥材,加 6倍量水浸泡 0.5 h,煎煮 2次,每次 2 h。在驗證試驗中,將篩選工藝生產(chǎn)的濃百合劑中麻黃堿、偽麻黃堿含量進(jìn)行了測定,并與原生產(chǎn)工藝生產(chǎn)的濃百合劑進(jìn)行比較,大大提高了有效成分的含量,提升了藥品質(zhì)量,增加了療效。此外,穩(wěn)定性試驗也驗證了該提取工藝的穩(wěn)定性,說明了其可行性。

[1] 姜清華,菅凌燕,王慧娟.RP-HPLC法測定濃百合劑中鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿的含量[J].化學(xué)與生物工程,2008, 25(11):72-74.