三種麻醉藥物對灰倉鼠麻醉效果的分析和選擇應用

徐藝玫，烏守巴特，史 深，廖力夫

（新疆實驗動物研究中心，烏魯木齊 830002）

灰倉鼠屬于嚙齒目，倉鼠科，倉鼠亞科，倉鼠屬動物，體重45g左右。廣泛分布于中亞地區，棲息生境從荒漠平原至海拔3000m以上的高山草甸均有分布，是新開發的一種實驗用動物，廣泛應用于鼠疫、包蟲病、黑熱病等動物實驗，具有一定的實際應用價值。選擇合適灰倉鼠的最佳麻醉劑量，有利于進行灰倉鼠手術或實驗需要，確保灰倉鼠進入麻醉狀態，滿足手術的需要和確保灰倉鼠的安全，獲得準確可靠的實驗結果。本文研究了氯胺酮、水合氯醛和氨基甲酸乙酯對灰倉鼠麻醉的效果。

1 材料和方法

1.1 實驗動物

普通級灰倉鼠60只，雌雄各半，體重40～60g，由新疆實驗動物研究中心提供。

1.2 試劑及儀器

水合氯醛，由中國醫藥集團上海化學試劑有限公司生產（批號990511），化學純，用氯化鈉注射液配制成10％的水溶液。氨基甲酸乙酯，北京化學試劑公司生產（批號021118），化學純，用生理鹽水配制成10％水溶液［1］。鹽酸氯胺酮，上海第一生化藥業有限公司生產（批號030905），0.01g/mL；氯化鈉注射液、分析天平、電子天平、計時器、點溫計及相關器材。

1.3 實驗方法［2，3］

通過預實驗進行麻醉劑量的測定，下閾劑量為動物皆可進入深麻狀態（皮膚疼痛反應消失，眼瞼刺激無反應，肌肉松弛，呼吸平順），上閾劑量低于動物出現死亡的劑量。

通過預試驗測定后，將60只灰倉鼠隨機分為6組，每組10（♀♂各半）只，分別為A1、A2、B1、B2、C1、C2組，并稱量體重，按照以下劑量進行實驗，氯胺酮0.1mL/10g（A1）和0.08mL/10g（A2）、水合氯醛0.06mL/10g（B1）和0.04mL/10g（B2）和氨基甲酸乙酯0.16mL/10g（C1）和0.12mL/10g（C2）。

在相同實驗室條件下，室溫18℃～20℃，相對濕度40％～60％，采用腹腔注射，并分組實驗，當藥物注射完畢，用秒表開始計時，觀測和記錄誘導時間、測量維持時間以及恢復自主意識時間，同時，在維持時間用點溫計測量直腸溫度，記錄各個組的觀察指標。

1.4 觀察和記錄指標［4，5］

觀察灰倉鼠麻醉期間呼吸、體溫等生命體征及其他變化，疼痛反應和眼部情況（瞬目、眼球運動與瞳孔反應）、肢體運動等，測量體溫，記錄觀察指標。

誘導時間：指灰倉鼠注射麻醉藥物至出現麻醉狀態的時間。

維持時間：指灰倉鼠出現麻醉臨床表現至蘇醒（爬動站立）的時間。體溫在麻醉維持期內測得。

恢復自主意識時間：指灰倉鼠從蘇醒到能夠完全自由活動的時間

體溫：麻醉維持期內測得灰倉鼠的體溫（直腸測量）。

臨床表現：觀察誘導期、麻醉期、恢復期灰倉鼠的表現。

1.5 統計學處理

數據以平均值±標準差表示，利用計算機軟件SPSS11.0版進行數據處理。同種麻醉藥物不同劑量組進行單因素方差分析。

2 結果

2.1 麻醉誘導期及麻醉維持期的臨床表現

2.1.1 誘導期：在麻醉藥物注入灰倉鼠腹腔后，起初主動動作，緊接著后半身軀搖晃，后肢前行無力，呈拖行狀，反應逐漸遲緩，失去抓咬能力，最后臥地。此期時間的長短，隨劑量大小而不同，同一給藥劑量動物個體略有差異。在藥物起效至進入深麻狀態之間，動物受藥物影響期間還有一個淺麻狀態的表現，灰倉鼠表現為停止爬動，而后呈側臥狀，部分出現角弓反張癥狀，置仰臥體位后不能自行翻正。之后，用鉗夾指間組織尚不能引起趾蹼反射，此時灰倉鼠進入麻醉維持期。

2.1.2 麻醉維持期：動物平靜，仰臥或側臥，痛覺消失，肢體肌肉松弛，眼睜，瞳孔散大。麻醉維持時間因藥量的增多而延長。此期的氯胺酮對非疼痛刺激無肢體動作反應，但用鉗夾指間組織尚能引起趾蹼反射；水合氯醛和氨基甲酸乙酯對非疼痛刺激無肢體動作反應，鉗夾指間組織未能引起趾蹼反射，而且肌肉完全松弛、角膜反射微弱，本期嚴重刺激都不引起有害反射即為進入深麻狀態。

2.2 三種麻醉藥物劑量對灰倉鼠誘導時間及麻醉時間

三種麻醉藥物均能使灰倉鼠出現麻醉狀態，并且麻醉維持時間組與組間有顯著差異（P＜0.05）。三種麻醉藥物六個劑量組對灰倉鼠的麻醉誘導時間都很短，分別為2.28±0.46min、3.50±0.47min、2.14±0.24min、2.68±0.49min、3.16±0.16min和3.67±0.33min，平均2.90min（2.1～3.7min）；維持時間分別為29.3±3.7min、17.4±2.7min、89.4±3.9min、61.8±3.1min、487.9±9.5min、393.1±7.8min（表1）。

2.3 體溫

麻醉維持期內體溫與麻醉深度有關，麻醉劑量增加，麻醉深度增加，體溫下降，相同的麻醉藥物間無顯著差異（P＞0.05）。

表1 不同麻醉藥物對灰倉鼠的麻醉效果［6］（n=10）Tab.1 Effects of different anesthetic agents in surgery for Cricetulus migratorus（n=10）

3 討論

實驗動物的麻醉在動物實驗過程中是相當關鍵的環節，對于麻醉方法、麻醉劑量及麻醉維持效果時間的把握將影響整個實驗進程。氯胺酮、水合氯醛和氨基甲酸乙酯是目前國內較常用的、效果和安全性有保證的麻醉藥物。但是三種麻醉藥物對灰倉鼠的適用濃度及相關作用時間的報道很少，通過以上三種麻醉藥物的麻醉效果測定，為灰倉鼠有關實驗的麻醉提供參考依據。氯胺酮麻醉維持時間最短，適用于短期的手術實驗，如采血。氨基甲酸乙酯麻醉持續時間最長，適用于昆蟲的吸血感染實驗，應用在媒介感染的動物模型制備中，并且隨劑量的增加，誘導時間減少而麻醉時間相應延長。

3.1 麻醉藥物反應

氯胺酮為苯環已哌啶的衍生物，主要是阻斷大腦聯絡徑路和丘腦反射到大腦皮層各部分的徑路，不引起中樞神經系統深度麻醉，對動物體表有明顯鎮痛作用注射后灰倉鼠很快進入麻醉狀態，肌肉松弛，保護性反射（如角膜反射）仍存在，呼吸平穩通暢，麻醉過程中無嘔吐，不需禁食，具有省時省力、操作簡便、起效快、但維持時間較短，一般僅15～30min，蘇醒期短，蘇醒后可立即站立行走；在安全范圍內可通過調節劑量來改變麻醉維持期。蘇醒后連續觀察48h無異常，無一例死亡，安全可靠。氯胺酮適用于實驗動物的前期引導麻醉、采血或者短時間手術的麻醉，不適合用作胸腹等手術時間較長的實驗［7］。

水合氯醛為無色透明棱狀結晶，有穿透性的臭氣及腐蝕性苦味。配制后的溶液有沉淀時，可以先在水浴鍋中適量加熱促其融解。實驗發現，水合氯醛在空氣中可漸漸揮發，因此配制好的藥液除要密封保存之外還要保持新鮮度。麻醉持續時間60～90min左右。水合氯醛對動物的胃腸道、上呼吸道影響較大，高濃度使用時受試動物出現口、鼻腔分泌物增多，有阻礙動物呼吸的狀況發生：在蘇醒過程中出現蜷縮、不愿爬行等現象。該麻醉藥物適用于心肌功能實驗和電生理實驗［8］。

氨基甲酸乙酯為無色、無味的結晶粉末，易溶于水。使用時用生理鹽水配制成10％的水溶液。麻醉時多用腹腔注射，因為氨基甲酸乙酯用作靜脈注射時會導致溶血［9］。藥物腹腔注射后，肌肉松弛較好，作用溫和，可用做深度麻醉。一次給藥可維持6～8h麻醉作用，麻醉過程平穩，對循環及呼吸功能影響較小，使用時受試動物出現口、鼻腔分泌物增多。氨基甲酸乙酯適用于呼吸系統、興奮藥物、觀察保留自主神經反射活動的麻醉動物實驗方面的研究［9］。目前，我們應用在白蛉的吸血感染實驗和相關感染動物模型的制備中。

3.2 麻醉效果

良好的麻醉效果是實施動物實驗的一個關鍵，其中最為重要的是采用何種麻醉劑和麻醉方法，即不同動物的麻醉藥物的選擇和劑量，以及麻醉藥物的配比都是動物實驗中的重要環節。在對實驗動物施行預定的手術操作前，必須首先對動物進行較理想的麻醉，才能保證實驗的順利進行和獲得正確的實驗結果。影響實驗動物麻醉的因素很多，如同一種麻醉劑在相同的劑量下，取不同的質量濃度會有不同的麻醉效果。再如低質量濃度下生效相對緩慢，但對動物組織器官生理上不會造成太大影響；高質量濃度生效快，但同時也增加了麻醉的副作用和死亡率。由于三種麻醉藥物各有自己的特點，在做動物實驗時要根據各自的實驗目的選用不同的麻醉劑，或聯合使用麻醉劑，以獲得較理想的實驗結果。

本實驗刻意選取了麻醉藥物的特定劑量以掌握它的作用時間，三種麻醉藥物維持動物的麻醉時間隨濃度升高呈上升趨勢，可以滿足現在一般動物實驗所需的麻醉時間。麻醉劑量的控制十分重要，應選擇對實驗動物的麻醉效果最適合的劑量，使麻醉產生對實驗動物的生理功能影響降低到最低限度，從而可以充分保障實驗結果的穩定性。

3.3 注意事項

動物實驗麻醉劑的選擇要考慮動物品種、實驗時間的長短和手術大小三個方面。根據灰倉鼠的體重選擇麻醉劑量，氯胺酮應用（0.08～0.1）mL/10g的劑量就可以獲得不同的麻醉維持時間；水合氯醛則選擇（0.04～0.06）mL/10g的劑量，劑量過大則會導致動物死亡，注射少了起不到麻醉效果；氨基甲酸乙酯則在（0.12～0.16）mL/10g之間比較合適，劑量過大會導致深麻醉時間過長，影響動物的生理狀況，從而使實驗結果不理想。

麻醉過程中，如果麻醉過淺，動物會因疼痛而掙扎，甚至出現興奮狀態，呼吸心跳不規則，影響觀察。麻醉過深，可使機體的反應性降低，甚至消失，呼吸、心跳停止，導致動物死亡。因此，在麻醉過程中必須善于掌握給藥的速度和判斷麻醉程度，隨時觀察動物生命體征的變化。

由于動物間存在個體差異，動物對麻醉的敏感性不同，同一劑量藥物在不同動物體內反應不同，劑量過大往往對體弱的灰倉鼠產生不良反應，如抑制呼吸造成死亡，劑量過小又不能滿足實驗需要。因此，在實驗過程中要隨時觀察動物的反應，準確掌握用藥劑量，以保證實驗順利進行［10］。

［1］陳良兒，宋良萍.氨基甲酸乙酯家兔麻醉濃度的評價［J］.中華醫學寫作雜志，2003，10（6）：507-508.

［2］徐平.實驗動物管理與使用操作技術規程［M］.上海：上海科學技術出版社，2007：171-181.

［3］鄧小明，朱科明.常用實驗動物麻醉［M］.上海：第二軍醫大學出版社，2001，34.

［4］陳麗玲，劉汝文，鄭紅，等.兩種麻醉劑對樹鼩麻醉效果的初步觀察［J］.實驗動物與比較醫學，2009，29（3）：194-195.

［5］閆明霞，趙方瑜，劉蕾，等.復合麻醉對免疫缺陷動物麻醉效果的比較［J］.上海交通大學學報（農業科學版），2009，27（2）：108-112.

［6］劉雪萍，謝莉萍，韋祝梅，等.四種麻醉藥物對食蟹猴麻醉效果分析和選擇應用［J］.中國比較醫學雜志，2010，20（2）：45-47.

［7］王紅偉，任愛紅.氯胺酮臨床作用的研究進展［J］.河南科技大學學報（醫學版），2009，27（3）：236-238.

［8］沙愛龍.三種麻醉劑對動物組織器官生理特性影響的探討［J］.北京聯合大學學報（自然科學版），2007，2l（3）72-74.

［9］周昆，屈彩芹.動物實驗常用麻醉劑的比較與選擇［J］.實驗動物科學，2008，25（2）：41-43.

［10］單靖華，孫銀貴.氯胺酮兩種注射方式對小鼠的麻醉效果的觀察［J］.濰坊醫學院學報，2008，30（6）：561-562.