丙型肝炎患者HCV RNA與轉氨酶的關系

葉劍榮 袁利群

丙型肝炎患者HCV RNA與轉氨酶的關系

葉劍榮 袁利群

目的了解丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV RNA)與天冬氨酸轉移酶(AST)及丙氨酸氨基轉移酶(ALT)之間的關系。方法對119例(自2008年1月～2009年5月)來自湖南省人民醫院住院和門診丙型肝炎患者進行HCV RNA、抗-HCV及AST、ALT檢測。采用熒光定量逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)法檢測標本中的HCV RNA，同時采用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)法檢測抗-HCV，用全自動生化檢測儀測定AST、ALT水平。分析分別在HCV RNA大于臨界值組和HCV RNA小于臨界值組的病人血清中轉氨酶與其的關系。結果本研究的119例標本中有116例抗-HCV均為陽性，其中HCV RNA高于上限值(≥1000copies/mL)87例，二都有很好的相關性；共有70例存在ALT異常，73例存在AST異常，ALT、AST水平與HCV RNA含量對數值無顯著相關性，但ALT、AST陽性率與HCV RNA大于臨界值有一定的吻合關系。結論HCV RNA是反映HCV復制的可靠指標。結合AST、ALT結果可幫助臨床了解HCV在體內的復制狀況及肝臟的損傷情況。RT-PCR法檢測HCV RNA具有非常好的臨床應用價值。

丙型肝炎病毒；丙型肝炎病毒抗體；天冬氨酸轉移酶；丙氨酸氨基轉移酶；聚合酶鏈反應

丙型肝炎由丙型肝炎病毒(HCV)感染所致，主要由血液/體液傳播，占輸血后肝炎的70%，HCV感染是全世界范圍內造成慢性肝病的主要原因。WHO估計全球有1.7億人感染丙型肝炎病毒[1]。在我國健康人群中抗-HCV陽性率為0.7%～3.1%，約3800萬人[2]。HCV感染易導致慢性化，50%～80%的成人急性感染易發展為慢性肝炎。其20%～30%將發展成肝硬化。而其中肝硬化患者中每年有1%～4%發展成肝細胞癌[3]。目前發現的HCV感染多見于非輸血人群間經破損的皮膚和黏膜的傳播。因此HCV的檢測除針對供血者外，也應對所有疑似丙肝感染的患者進行檢測，以減少繼發性感染的發生[4]。筆者對本院住院和門診119例丙型肝炎患者同時進行抗-HCV、HCV RNA、ALT和AST的檢測，以探討它們相互之間的關系。

1 資料與方法

1.1 標本來源 2008年1月～2009年5月湖南省人民醫院住院和門診的119例丙肝患者標本。無菌抽取患者空腹靜脈血3ml，4h內分離血清，進行各項檢測，不能及時檢測的，置于-40℃保存，一周內檢測。

1.2 檢測試劑 HCV-RNA檢測試劑由深圳匹基生物工程股分有限公司提供。HCV-Ab由珠海麗珠試劑有限公司提供。AST、ALT試劑由上?？迫A東菱診斷用品有限公司提供。

1.3 檢測儀器 Bio-Radi Cycler PCR基因擴增儀，美國伯樂公司提供；FAME 24/20全自動酶免分析儀，來自瑞士哈美頓公司(HAMILTON)；OLYMPUS AU640全自動生化分析儀，由日本OLYMPUS公司生產。

1.4 檢測方法 各檢測項目嚴格按照說明書操作。

1.5 數據處理 本研究HCV RNA檢測試劑盒的定量檢測線性范圍為1.0×103～5.0×107，以HCV RNA拷貝數=1000copies/mL作為臨界值，當≥1000copies/mL時提示病人體內帶有一定的HCV，該病人具有一定的傳染性。

抗-HCV按照試劑盒說明要求：陽性對照A值應≥0.5，陰性對照A值應≤0.12，臨界值(C.0.)=0.12+陰性對照平均A值。故以樣品A值≥臨界值(C.0.)判為HCV抗體陽性，樣品A值＜臨界值(C.0.)判為HCV抗體陰性。

ALT，AST均以試劑盒說明要求結果≥40U/L為陽性結果。

所收集整理得到的數據采用SPSS13.0統計軟件進行處理，統計學分析采用x2檢驗與多元線性回歸分析，以P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

HCV RNA和抗-HCV相關性：在檢測的119例標本中，116例為抗-HCV陽性。而在整個抗-HCV陽性標本中進一步應用HCV RNA定量檢測判定大于臨界值有84例，為原抗-HCV陽性標本75%。由此可見抗-HCV陽性者與HCV RNA有較好相關性。結果見表1。

在HCV RNA大于臨界值或抗-HCV陽性標本中多伴有AST、ALT升高，采用多元線性回歸分析后發現ALT水平與HCV RNA含量對數值無顯著相關性(P=0.328)，AST水平與HCV RNA含量對數值也無顯著相關性(P=0.156)。

在119例分析樣本中，共檢測出ALT異常者70例，其中HCV RNA含量＜1000Copies/mL時ALT異常為11例(34%)，≥1000Copies/mL時，ALT異常者為59例(68%)，在HCV RNA含量≥1000Copies/mL組明顯高于HCV RNA含量＜1000Copies/mL組。同樣119例分析樣本中，共檢測出AST異常者73例，其中HCV RNA含量＜1000Copies/mL時AST異常為15例(47%)，≥1000Copies/mL時，AST異常者為58例(67%)。

ALT、AST在HCV RNA含量＜1000Copies/mL和≥1000Copies/mL兩個區間范圍中的陽性率各自比較差異有統計學意義(均P＜0.05)。見表2，表3。

表1 HCV RNA在抗-HCV不同組中的比較(n=119)

表2 ALT在HCV RNA不同組中的比較

表3 AST在HCV RNA不同組中的比較

3 討論

抗-HCV和HCV RNA是目前診斷HCV感染的主要病原學指標，抗-HCV間接反映HCV的感染和既往感染，而HCV RNA是診斷HCV病毒血癥的“金標準”[6]。文獻報道，采用PCR檢測方法可將HCV窗口期縮短41～60D，從而提高HCV診斷率[7]。李竹萍等[8]認為，患者雖處于血液中帶有感染病毒，但病毒未產生相應抗體期時或HCV病毒變異、異常亞型等原因，加之ELISA試劑因受原材料所限，不同廠家的試劑所包被的抗原片段不同，均可造成漏檢。

據文獻報道，抗-HCV和HCV RNA符合率一般60%～70%，本文中二者符合率為75%，說明兩者間具有較好的一致性。在所檢測的119例標本中有35例標本抗-HCV和HCV RNA檢測結果不符，其中抗-HCV陽性而HCV RNA小于臨界值標本32例，這可能是由于患者已處于感染恢復期或經抗病毒治療，病毒復制減弱或停止，HCV RNA已消失或含量很低而檢測不出，而此時抗體仍持續存在。本組中另有3例患者抗-HCV陰性而HCV RNA大于臨界值，這可能是由于患者處于感染的“窗口期”，或患者免疫功能低下，機體尚未產生抗體或產生的抗體很少而檢測不出。有臨床資料顯示，在急性丙型肝炎的恢復期，丙型肝炎病毒復制停止致HCV RNA檢測值低于臨界值以下，而抗-HCV仍可存在一段時間，這也可能是抗HCV陽性而RNA檢測低于臨界值的原因。對于抗-HCV和HCV RNA有較好的相關性的慢性丙型肝炎，盡管肝內丙型肝炎病毒持續存在，但病毒血癥可能出現波動即血清HCV RNA呈波浪狀起伏，當HCV RNA達到波谷時，HCV RNA檢測小于臨界值，該情況的患者建議應隨訪復查。

Adinolfi[9]認為，血清HCV RNA水平與肝損傷程度相關。本組中表2、表3結果說明此結論。Zechini[10]認為，轉氨酶水平特別是AST的水平，與肝損傷的程度有關。本組中表3結果支持此結論。Lshikawa[11]也報道ALT和TBIL的水平高低與HCV在體內復制的活躍程度有一定的相關性。Sabin等[12]曾對輸血后丙肝進行研究認為HCV RNA水平與ALT水平正相關。本文經統計學分析顯示，ALT、AST異常率在HCV RNA大于臨界值組中明顯高于HCV RNA小于臨界值組，但ALT、AST水平與HCV RNA含量對數值無顯著相關性，說明HCV RNA水平與肝損傷程度相關，便是不能反映肝臟損傷的程度，即HCV RNA水平與ALT、AST水平無相關性，與趙輝等[5]的研究結果一致。這有可能與病例分布的差異有關，表明病毒含量不能反映肝臟組織的損傷程度，也有可能與HCV發病機制有關。

綜上所述，HCV RNA是反映HCV復制的可靠指標，結合LAT、AST結果可幫助臨床了解HCV在體內的復制狀況及肝臟的炎性反應狀態。但由于約有20%～30%的HCV慢性感染病人ALT持續正常，臨床癥狀缺失或非常輕微，造成ALT、AST水平與HCV RNA含量相關性較低，其作用有限，個別病人有時肝臟炎性反應狀態與病毒含量及ALT、AST水平并不平行，所以在臨床診療的過程中應結合其他臨床指征具體病例具體分析治療。

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Objective To evaluate the relationship of hepatitis C virus RNA (HCV RNA) and AST and ALT. Methods One hundred and nineteen hospitalized and clinical hepatitis C patient s were enrolled in this study. HCV RNA was qauantitated by FQ-RT-PCR. Anti-HCV was detected byenzyme linked immunosorbent assay (ELISA) and AST, ALT level was measured by automatic biochemical detection system. Results Among 119 patients,116 patients with positive anti-HCV, 87 patients were positive of HCV RNA, 70 with higher ALT, 73 with higher AST, there was some relationship between HCV RNA, anti-HCV and the positive rate of AST, ALT. Conclusion HCV RNA is a reliable marker of replication. AST, ALT level refiect replication status and infiammation state of the liver. HCV RNA detected by FQ-RT-PCR is clinically practical.

hepatitis C virus; Anti-HCV; AST; ALT; PCR

10.3969/j.issn.1009-4393.2010.12.058

410005 湖南省人民醫院檢驗科 (葉劍榮 袁利群)