活血藥、破血藥對動脈粥樣硬化大鼠血脂、血液流變學的影響

謝海波，莫新民，羅堯岳

（1.湖南中醫藥大學第一附屬醫院，湖南 長沙 410007；2.湖南中醫藥大學,湖南 長沙 410007）

動脈粥樣硬化(AS)是心腦血管疾病的主要病理基礎之一，是一種常見病、多發病。根據AS的表現，中醫可將其歸為“血瘀”、“瘕結”等范疇，常采用活血化瘀藥治療。活血化瘀藥有活血止痛、活血調經、活血療傷、破血消癥之分[1]。總的來說，根據活血化瘀程度不同，可分為活血和破血兩類。本研究選用活血藥當歸、川芎和破血藥三棱、莪術，開展兩類藥對血脂和血液流變學的對比研究，探討兩者的作用差異，為臨床處方選藥提供實驗依據。現將實驗方法及結果報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動物 雄性Wistar大鼠，8周齡，體質量 （200±10）g，60只。由湖南中醫藥大學實驗動物中心提供，合格證號：SCxk豫2005-001。

1.1.2 藥物 當歸、川芎、三棱、莪術均購于湖南中醫藥大學第一附屬醫院，常規煎煮，制成含生藥0.18 g/mL的藥液，5℃保存備用。

1.1.3 試劑 膽固醇由中國醫藥（集團）上海化學試劑公司提供（批號：20080923）；膽酸鈉由上海藍季科技發展有限公司提供（批號:080628）；維生素D3注射液由蘇州第六制藥廠生產（批號:070621）；丙基硫氧嘧啶由南通精華制藥股份有限公司生產（批號:080701）；阿托伐他汀（立普妥）由大連輝瑞制藥有限公司分裝（批號:85837034）；豬油購自農貿市場。總膽固醇(TC)試劑盒：德國羅氏診斷有限公司提供（批號:11491458216）；甘油三酯(TG)試劑盒：德國羅氏診斷有限公司提供（批號:11730711216）；低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)試劑盒：德國羅氏診斷有限公司提供（批號:04711220190）；高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)試劑盒：德國羅氏診斷有限公司提供（批號:04713214190）。

1.1.4 儀器 P800全自動生化分析儀：日本生產；T5-Ⅱ臺式離心機：長沙平凡儀器儀表有限公司提供；SA-6000自動血流變測試儀：北京賽科希德科技發展有限公司提供；L500臺式低速自動平衡離心機：湘儀離心機儀器有限公司提供。

1.2 方法

1.2.1 動物分組 動物適應性飼養1周后按隨機數字表法將60只大鼠分為5組，即空白組、模型組、活血藥（當歸、川芎）組、破血藥（三棱、莪術）組、他汀組，每組12只。

1.2.2 造模方法 空白組每日給予普通飼料，其它各組大鼠首先腹腔注射維生素D370萬IU/kg，分3次，每2 d注射1次，然后各組每日每只給予高脂飼料（2%膽固醇，0.5%膽酸鈉，3%豬油，0.2%丙基硫氧嘧啶和94.3%基礎飼料）20 g，連續喂飼12周[2-3]。隨機抽取2只大鼠，處死后速取主動脈，浸入4%多聚甲醛溶液中，固定48 h，石蠟包埋切片，HE染色，光學顯微鏡下觀察發現已形成粥樣硬化斑塊，提示造模成功。

1.2.3 給藥劑量及方法 造模成功后，灌胃給藥，每天1次，灌胃體積10 mL/kg，空白組、模型組灌服等體積白開水；活血藥組灌服當歸、川芎煎液，給藥劑量為1.8 g/（kg·d）；破血藥組灌服三棱、莪術煎液，給藥劑量1.8 g/（kg·d）；他汀組灌服阿托伐他汀各組給藥體積10 mL/(kg·d)，給藥劑量0.001 8 g/kg，均按60 kg成人體表面積換算，連續給藥4周。

1.2.4 血脂檢測 實驗結束時，大鼠在禁食8 h（不禁水）后，斷頭采血，離心后取血清，用酶法在全自動生化分析儀上測定TC、TG、HDL-C、LDL-C。

1.2.5 血液流變學的檢測 在大鼠禁食8 h（不禁水）后，斷頭采血4 mL，采用SA-6000自動血流變測試儀測全血黏度、血漿黏度。注意采血后及時送檢。

1.3 統計學分析

采用SPSS 13.0軟件包進行分析處理，所有數據均以“±s”表示，組間比較方差齊時用方差分析，方差不齊時用秩和檢驗。

2 結果

2.1 活血藥、破血藥對各組大鼠血脂的影響

模型組血清TC、TG、LDL-C、HDL-C明顯高于空白組，差異具有統計學意義（P＜0.01）；活血組、破血組、他汀組血清TC均低于模型組，差異具有統計學意義（P＜0.05），三者組間比較無統計學差異；活血組、破血組血清TG均低于模型組，差異具有統計學意義（P＜0.05），兩者組間比較無統計學差異；破血組血清LDL-C低于活血組，但兩者組間無統計學差異。結果見表1。

2.3 活血藥、破血藥對各組大鼠血液流變學變化的影響

模型組全血黏度（低切、中切、高切）、血漿黏度明顯高于空白組，差異具有統計學意義（P＜0.01）；活血組、破血組、他汀組全血黏度（低切、中切、高切）、血漿黏度低于模型組，差異具有統計學意義（P＜0.05），三者組間比較無統計學差異。結果見表2。

表1 活血藥、破血藥對各組大鼠血脂的影響 （n=10，±s，mmol/L）

表1 活血藥、破血藥對各組大鼠血脂的影響 （n=10，±s，mmol/L）

注：與模型組比較△P＜0.05，△△P＜0.01；與活血組比較*P＜0.05，**P＜0.01。下表同。

組別空白組模型組他汀組活血組破血組藥物劑量（g/kg）——0.0018 1.8 1.8 TC 1.59±0.39△△** 3.97±0.77* 2.95±0.46△2.85±0.55△2.62±0.46△△TG 0.45±0.11△△1.06±0.36* 0.74±0.22 0.55±0.21△0.52±0.16△△LDL-C 0.24±0.05△△** 1.22±0.40 0.75±0.15△0.90±0.33 0.68±0.13△HDL-C 1.52±0.36△△2.49±0.43 2.06±0.22 1.89±0.48 2.09±0.32

表2 活血藥、破血藥對各組大鼠血液流變學變化的影響 （±s，n=10，mpa·s）

表2 活血藥、破血藥對各組大鼠血液流變學變化的影響 （±s，n=10，mpa·s）

組別 藥物劑量（g/kg）全血黏度（低切）全血黏度（中切）全血黏度（高切） 血漿黏度空白組模型組他汀組活血組破血組——0.001 8 1.8 1.8 12.06±1.30△△15.40±1.98* 12.30±1.58△12.51±1.91△12.68±1.79△6.28±0.65△△8.05±0.94* 6.49±0.78△△6.59±0.73△6.74±0.82△4.59±0.47△△6.65±1.03* 5.08±0.70△5.09±0.78△5.15±0.94△1.34±0.22△△** 1.95±0.17** 1.72±0.14△1.68±0.14△△1.73±0.12△

3 討論

大量的流行病學、臨床及實驗研究證實，血液中TC含量增高與AS發生的關系密切，是冠心病（CHD）發病率和致死率增高的獨立危險因子。LDL是TC轉運并進入細胞的主要載體。LDL受體是細胞表面的一種糖蛋白，在人體代謝中它通過介導細胞攝取LDL及增加LDL的降解來調節血漿TC水平。目前，已經把降低LDL-C作為高膽固醇血癥患者治療的主要目標。HDL顆粒具有膽固醇逆轉運的作用，直接或間接將膽固醇轉送至肝臟降解，以減少膽固醇在動脈壁的沉積。血清HDL-C含量降低是CHD的獨立危險因素，TG的增高亦是CHD的獨立危險因素。有學者[4-5]研究表明CHD血瘀證患者TG和LDL-C水平明顯增高。亦有人[6]研究認為血瘀證是一種因血液的流動性和黏性異常而引起的血流量紊亂癥，與血液流變學異常改變密切相關。有學者[7]提出血液流變學已成為血瘀證診斷與臨床療效客觀評定的核心指標。

魏會平[8]等探討了當歸注射液對大鼠實驗性彌散性血管內凝血（DIC）血液動力學的影響，結果表明：當歸注射液可明顯降低DIC時的血黏度增高，抑制血小板黏附和聚集，增強紅細胞的變形性。王普霞[9]等通過大鼠血瘀模型血液流變性及凝血試驗，證實莪術不同炮制品均具有一定的抗血小板聚集、抗凝血及調節血液流變性作用。黨春蘭等[10]研究了中藥三棱對血液流變學指標的影響，結果表明三棱組的全血黏度、血細胞壓積以及血沉速率與空白對照組相比均有明顯減小。姜華[11]等觀察了川芎微乳對氣虛血瘀型大鼠血液流變學指標的影響，發現川芎微乳可明顯降低氣虛血瘀型大鼠全血黏度和全血還原黏度、紅細胞比容以及紅細胞聚集指數，且該作用呈劑量依賴性。阿魏酸是當歸的有效成分之一，現代藥理研究表明阿魏酸具有抑制肝合成膽固醇的作用，可競爭性抑制肝細胞中羥戊酸-5-焦鱗酸脫氫酶活性，同時通過抗氧化、自由基清除以及抗血栓3種作用相互協調產生抗動脈粥樣硬化的作用。

本研究模型組血脂及血液流變學各項指標明顯高于空白組，說明經高脂喂飼可以引起大鼠血脂和血液流變學的改變，與目前的文獻報道相符。活血藥（當歸、川芎）、破血藥（三棱、莪術）在降TC、TG方面無明顯差異，破血藥（三棱、莪術）降低LDL-C的幅度大于活血藥 （當歸、川芎），但未顯示統計學差異。活血藥（當歸、川芎）、破血藥（三棱、莪術）均能降低AS大鼠全血黏度（低切、中切、高切）、血漿黏度。

[1]雷載權.中藥學[M].上海:上海科學出版社，1995:300-301.

[2]章義利，周秀云，應斌宇，等.大鼠動脈粥樣硬化模型的建立方法[J].溫州醫學院學報，2007，37(4):331-333.

[3]張海平，吳翊馨.動脈粥樣硬化模型大鼠接受有氧運動后的組織學變化[J].中國組織工程研究與臨床康復，2007，11(45):9 051-9 052.

[4]屠浩明.高脂血癥血脂水平與中醫辨證分型的相關性研究[J].安徽中醫臨床雜志，2003，15(6):470-471.

[5]李 俊，李小敏，劉映峰，等.冠心病冠狀動脈造影結果與中醫證型及血脂、脂蛋白關系的研究[J].中國中醫急癥，2000，9(3):123-124.

[6]梁子鈞.血瘀證和活血化瘀的血液流變學(hemorheology)研究[J].蛇志，2002，14(3):18-27.

[7]廖福龍.老年血液流變學改變及與中醫血瘀證的關系[J].老年醫學與保健，1998，4(4):4-5.

[8]魏會平，劉圣君，劉艷凱，等.當歸注射液對大鼠實驗性彌散性血管內凝血血液動力學的影響[J].時珍國醫國藥，2008，19(7):1 606-1 607.

[9]王普霞，周百祥.莪術不同炮制品活血化瘀作用研究[J].中成藥，2004，26(11):905.

[10]黨春蘭，辛小南.三棱對家兔血液流變學的影響[J].河南醫科大學學報，1996，31(3):31-32.

[11]姜 華，張 艷，李卿姬.川芎微乳對氣虛血瘀型大鼠血液流變學的影響[J].中西醫結合心腦血管病雜志，2009，7(6):671-672.