劉保廷
尿沉渣檢查是尿液分析的重要組成部分,顯微鏡檢查作為傳統(tǒng)方法既費(fèi)時又難以標(biāo)準(zhǔn)化,人為影響因素多。難以提高尿沉渣分析的準(zhǔn)確性和工作效率,尿沉渣自動分析儀得到廣泛的應(yīng)用。UF-100型全自動尿沉渣分析儀(簡稱UF-100)操作簡便,結(jié)果重復(fù)性好,解決了尿沉渣檢測難以標(biāo)準(zhǔn)化的問題,提高了工作效率,但也存在一些干擾因素,為了探討UF-100的臨床應(yīng)用價值及干擾因素,我們將UF-100與顯微鏡鏡檢尿沉渣結(jié)果進(jìn)行了對比分析,現(xiàn)報道如下。
1.1 一般資料 隨機(jī)抽取2009年1月~12月我院各科室門診及住院患者集新鮮清潔中段晨尿尿液標(biāo)本846份,門診493例,病房353例標(biāo)本,男性標(biāo)本519份,女性標(biāo)本327份,患者年齡12~76歲,每份尿液標(biāo)本充分混勻分成2管每管各10ml,一管用于UF-100分析,另一管用于顯微鏡鏡檢。
1.2 儀器和試劑:UF-100(日本東亞公司)及其配套試劑、原裝配套UF-100質(zhì)控產(chǎn)品(批號A6017)、OLYMPUS CX-31顯微鏡、水平式離心機(jī)、尿沉渣定量計數(shù)板。
1.3 方法:①UF-100檢測 嚴(yán)格按照操作說明書正規(guī)操作,每日上機(jī)前均用質(zhì)控品進(jìn)行監(jiān)控校準(zhǔn)。分裝后的一管尿液標(biāo)本在UF-100檢測系統(tǒng)進(jìn)行檢測,記錄紅、白細(xì)胞、管型。②顯微鏡檢測取另一管尿液標(biāo)本,以相對離心力400g離心5min,然后手持離心管45~90°吸棄上清液,保留0.2ml沉渣量,輕輕搖勻,用一次性滴管取1滴置于清潔載玻片上,加蓋玻片,于高倍鏡下連續(xù)計數(shù)至少10個視野中紅細(xì)胞、白細(xì)胞、管型數(shù),分別取其平均值,兩種儀器操作全部必須在收到標(biāo)本后2h內(nèi)完成。
UF-100檢查紅細(xì)胞正常范圍:男0~12/μl,女0~24/μl;白細(xì)胞正常范圍:男0~12/μl,女0~26/μl,管型正常范圍0~0.6/μl。顯微鏡檢查紅細(xì)胞正常范圍:0~3/高倍視野,白細(xì)胞正常范圍:0~5/高倍視野,管型0~1/片,超過此值為陽性[1]。846例受檢尿液中,UF-100檢測紅細(xì)胞陽性261例,鏡檢法檢測出異常為195例,符合率74.7%,假陽性率為25.3%,UF-100檢測白細(xì)胞陽性202例,鏡檢法檢出異常194例,符合率96.0%,假陽性率為4.0%。UF-100檢測透明管型陽性573例,鏡檢法檢測出異常為510例,符合率89.0%,假陽性率為11.0%;UF-100檢測病理管型陽性524例,鏡檢法檢測出異常為412例,符合率78.6%,假陽性率為21.4%。
UF-100尿沉渣分析儀是利用流式細(xì)胞和電阻抗原理對尿樣直接進(jìn)行熒光染色,以激光散射強(qiáng)度,散射波幅度及熒光強(qiáng)度和熒光波幅度技術(shù),識別和計數(shù)尿中紅細(xì)胞、白細(xì)胞、上皮細(xì)胞、管型、細(xì)菌、結(jié)晶體、精子及酵母菌等。通過尿液中有形成分的尺寸、外形、對比度及材料等特性,對每種微粒成分進(jìn)行分類[2]。標(biāo)本不需要離心,且具有手工操作無法比擬的重復(fù)精度及極低的互染率,實(shí)現(xiàn)了尿沉渣檢測的自動化和標(biāo)準(zhǔn)化,大大加快了尿液的分析速度,具有自動進(jìn)樣、自動分析等優(yōu)點(diǎn)。其操作簡單、快速,提高了工作效率。但由于尿中各種有形成分較為復(fù)雜,出現(xiàn)UF-100檢測結(jié)果與顯微鏡檢不一致的情況。它所提供的各類成分中,有假陽性現(xiàn)象,草酸鈣結(jié)晶是RBC假陽性的主要因素,還有酵母菌、細(xì)菌、粘液絲等。
UF-100和鏡檢紅細(xì)胞不符合的66份標(biāo)本中,經(jīng)顯微鏡檢查到46份草酸鈣結(jié)晶,酵母樣菌9份,大量細(xì)菌6份,精子、卵磷脂小體或脂肪滴5份。因紅細(xì)胞的形態(tài)大小、染色性與草酸鈣結(jié)晶非常相似,因此對紅細(xì)胞計數(shù)結(jié)果影響較大;酵母樣菌影響的原因可能是酵母樣菌的形態(tài)大小與紅細(xì)胞類似,儀器分析時得不到準(zhǔn)確信息所致;尿液中的細(xì)菌數(shù)量超出儀器測定范圍,會導(dǎo)致紅細(xì)胞計數(shù)可信度降低,因此細(xì)菌可對紅細(xì)胞數(shù)量的測定產(chǎn)生一定程度的干擾,使結(jié)果產(chǎn)生假陽性升高。
UF-100和鏡檢白細(xì)胞不符合的8份標(biāo)本中,經(jīng)鏡檢確認(rèn)5份為扁平上皮細(xì)胞,2份小圓上皮細(xì)胞,1份因滴蟲引起,小圓上皮細(xì)胞和滴蟲與白細(xì)胞相似,因此影響了白細(xì)胞的檢測。表層鱗狀上皮細(xì)胞、移型上皮細(xì)胞等大細(xì)胞,具有較強(qiáng)的前向散射光強(qiáng)度和熒光強(qiáng)度的特性,分布在高的熒光脈沖寬度區(qū)域和低于管型的散射光脈沖寬度區(qū)域。而白細(xì)胞小得多,在實(shí)際應(yīng)用中,大量的上皮細(xì)胞會使白細(xì)胞不同程度增高,可能將上皮細(xì)胞核誤認(rèn)為白細(xì)胞。
UF-100和鏡檢透明管型不符合的63例標(biāo)本中,經(jīng)鏡檢確認(rèn)36份為標(biāo)本中的黏液絲或有形雜質(zhì),27份為尿中白細(xì)胞、結(jié)晶或前列腺按摩后含卵磷脂小體較多的尿液。UF-100和鏡檢病理管型不符合的112份標(biāo)本中,在鏡檢確認(rèn)79份為標(biāo)本尿液中的黏液絲、假管型或有形雜質(zhì),33份為尿中白細(xì)胞或結(jié)晶。病理管型由于它們的體積與透明管型相符,但含有內(nèi)含物(如線粒體、細(xì)胞核等),所以有極高的前向散射光脈沖寬度(FCW)和熒光脈沖寬度(FLW),但標(biāo)本中因成份復(fù)雜,常有細(xì)胞粘附在黏液絲上,細(xì)菌、霉菌、上皮細(xì)胞等物質(zhì)也會干擾,導(dǎo)致儀器對病理性管型檢測的失真[3]。從結(jié)果上看,兩種方法檢測病理管型的一致性較差,這與有關(guān)文獻(xiàn)[4]報道相一致。
經(jīng)典的顯微鏡尿沉渣檢測方法的不足為速度慢,不能滿足目前臨床的需求。隨著檢驗(yàn)儀器的更新升級,現(xiàn)在臨床檢驗(yàn)室檢查尿沉渣基本實(shí)現(xiàn)了儀器自動檢測,全自動尿沉渣分析儀,是一套使整個尿液分析過程完全實(shí)現(xiàn)自動化的系統(tǒng),具有檢測快速、準(zhǔn)確、直觀的優(yōu)點(diǎn),無論是檢測項(xiàng)目、檢驗(yàn)速度等方面均比手工操作有了很大的改進(jìn),既方便了病人在短時間內(nèi)得到多項(xiàng)檢測結(jié)果,也為檢驗(yàn)人員減輕了工作量。但在實(shí)踐中,也發(fā)現(xiàn)儀器對白細(xì)胞、紅細(xì)胞、管型數(shù)量的檢測與鏡檢結(jié)果常常不一致。
綜上所述,干擾尿檢結(jié)果的因素很多,僅靠UF-100全自動尿沉渣分析儀檢測是不夠的。傳統(tǒng)的顯微鏡沉渣鏡檢,具有直觀、經(jīng)濟(jì)的特點(diǎn),不僅能區(qū)分各種細(xì)胞、管型結(jié)晶等有形成分,還能在定量板上定量分析,使尿液檢測結(jié)果更加準(zhǔn)確。所以我們建議采用UF-100全自動尿沉渣分析儀時,只有當(dāng)尿中RBC、WBC、亞硝酸鹽、蛋白全部為陰性時,可以省去顯微鏡鏡檢,對其中一項(xiàng)陽性者,應(yīng)結(jié)合傳統(tǒng)的沉渣鏡檢來驗(yàn)證、校準(zhǔn)和補(bǔ)充。防止漏檢,以便為臨床提供快速、準(zhǔn)確的尿常規(guī)檢驗(yàn)結(jié)果。
[1] 李焱鑫,鐘亞玲.UF-100尿沉渣分析儀不能取代鏡檢[J].臨床檢驗(yàn)雜志,2005,23(2):155-157.
[2] 熊立凡.臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)[M].3版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2004:164-226.
[3] 葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].3版.南京:東南大學(xué)出版社,2006:240-312.
[4] 周強(qiáng),羅森珊,文燕.流式尿沉渣分析儀,尿干化學(xué)分析儀檢測,尿紅、白細(xì)胞的研究[J],國外醫(yī)學(xué).臨床生物化學(xué)與檢驗(yàn)學(xué)分冊,2005:591-597.