甲砜霉素緩釋片的制備及釋放度研究

胡盛松，袁梅蕊

（湖南中醫藥大學第一附屬醫院藥劑科，湖南 長沙 410007）

甲砜霉素是氯霉素的同類物，抗菌譜和抗菌作用與氯霉素相仿，具廣譜抗微生物作用，用于敏感菌如流感嗜血桿菌、大腸埃希菌、沙門菌屬等所致的呼吸道、尿路、腸道等感染。目前國內現有的普通片日服3～4次，給藥次數多，易漏服，而且血液中藥物濃度波動較大，有峰谷現象。筆者參照文獻[1－3]將甲砜霉素制成緩釋制劑，以減少服藥次數，避免峰谷現象，降低藥物的毒副作用，提高患者的順應性。現將甲砜霉素緩釋片的制備方法及體外釋放度考察情況報道如下。

1 儀器與試藥

ZRS－4型智能溶出度測定儀（天津大學無線電廠）；LC－10AT型高效液相色譜儀（日本島津）；Adventurer AR1140型電子分析天平（美國奧豪斯國際貿易有限公司）；DP－120型單沖壓片機（東港市制藥設備廠）。甲砜霉素（中國藥品生物制品檢定所，批號為130433－200501，供含量測定用）；甲砜霉素原料藥（武漢鑫華醫藥化學原料生產責任有限公司）；預膠化淀粉、微晶纖維素（浙江湖州展望化學藥業有限公司）；乳糖（上海昌為藥用輔料有限公司）；羥丙基甲基纖維素（HPMC，上海卡樂康包衣技術有限公司）；硬脂酸鎂（山東聊城阿華制藥有限公司）；乙腈為色譜純；水為重蒸水。

2 方法與結果

2.1 制備方法

取甲砜霉素適量，加入HPMC、預膠化淀粉充分混合均勻，加入適量85％乙醇制軟材，制粒，50℃左右干燥，整粒，加入潤滑劑滑石粉及助流劑硬脂酸鎂，壓片即得。

2.2 緩釋片體外釋放度測定

2.2.1 色譜條件

色譜柱：Kromasil C18柱（250 mm×4.6 mm，5μm）；流動相：乙腈－水（1∶4）；檢測波長：225 nm；柱溫：30℃；流速：1.0mL/min；進樣量：10μL。

2.2.2 溶液制備

取甲砜霉素緩釋片適量，精密稱定（約相當于甲砜霉素10mg），置100mL量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。稱取甲砜霉素對照品約10mg，精密稱定，置100mL量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得對照品溶液。取不含甲砜霉素的陰性樣品，按樣品溶液制備法制備陰性對照品溶液。

2.2.3 方法學考察

空白干擾試驗：分別吸取2.2.2項下溶液各10μL，在2.2.1項下色譜條件進行測定。結果在供試品溶液色譜中，與對照品溶液色譜相應位置上有保留時間一致的色譜峰，而陰性對照品溶液對測定無干擾（見圖1）。

標準曲線制備：精密稱取甲砜霉素對照品50mg，置50mL量瓶中，加流動相適量，充分振蕩，使其溶解，定容。分別精密稱取該溶液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0mL，置25mL量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，按上述色譜條件進樣，以峰面積 A對質量濃度 C進行回歸，得直線回歸方程 A=28.3 C－2.85，r=0.999 9（n=5）。

圖1 高效液相色譜圖

精密度試驗：精密量取同一對照品溶液，重復進樣6次，依法測定并計算含量。結果的 RSD為1.17％（n=6）。

穩定性試驗：取同一供試品溶液，分別在0，2，4，6，8，10h時進樣，依法測定并計算含量。結果的 RSD為1.42％（n=6）。

加樣回收試驗：精密稱取已知含量的供試品溶液6份，分別精密加入甲砜霉素對照品，依法測定并計算回收率。結果平均回收率為99.2％，RSD為1.43％（n=6）。

2.2.4 樣品測定

按2005年版《中國藥典（二部）》[4]方法測定。以pH=6.8的磷酸鹽緩沖液為溶出介質，轉速為150 r/min，在1，2，4，6，8，10，12h時分別取溶液5mL，濾過，并立即在操作容器中補充磷酸鹽緩沖液5mL，取續濾液作為供試品溶液。按上述色譜條件測定，按外標法分別計算出每片在不同時間點的累積釋放率。

2.3 處方及工藝單因素考察

HPMC（K100－LV）用量：在保持片重不變的條件下，研究不同用量HPMC（K100－LV）對甲砜霉素體外釋放度的影響。結果見圖2A。可見，隨著HPMC用量的增大，藥物的釋放速率逐漸變慢。當HPMC的用量大于7％時，由于已經形成了連續的凝膠層，用量再增加，緩釋作用增加的程度也不明顯。因此，處方中HPMC的用量選定為7％。

填充劑：固定處方中其他成分不變，且填充劑用量為50mg，分別選用微晶纖維素、乳糖、預膠化淀粉為填充劑，考察填充劑種類對藥物釋放的影響。結果見圖2B。可見，使用相同用量的填充劑，釋放速率預膠化淀粉最慢，乳糖次之，微晶纖維素最快。由于預膠化淀粉本身有黏性，有助于骨架的形成，故有較明顯的緩釋作用，故選用預膠化淀粉作填充劑。

填充劑用量：處方中其他物料不變，僅改變預膠化淀粉用量，分別加入50，100，150mg，考察釋放度。結果見圖2C。可見，隨著預膠化淀粉用量的增大，釋放速率逐步減慢。調節骨架片中預膠化淀粉的用量對緩釋片的釋放速率有較大影響，最后預膠化淀粉用量定為150mg。

圖2 處方單因素考察

壓力：對同一處方采用不同壓力制備不同的片劑，調節壓力分別為3～5，5～8，8～10 kg，以調節緩釋片的硬度。結果見圖2D。可見，3個不同壓力值的樣品釋放度并無明顯區別，表明壓力在一定范圍內對藥物釋放幾乎無影響。

2.4 釋放度測定方法及條件選擇

測定方法：以磷酸鹽緩沖溶液為釋放介質，分別在轉籃法和槳法在轉速為150 r/min的情況下考察釋放度。結果見圖3A。可見，當轉速相同時，轉籃法比槳法的釋放速率略慢，這可能是由于部分溶蝕的凝膠骨架堵塞了轉籃的網眼，影響了轉籃的空隙率；也可能是由于骨架片容易上浮貼在轉籃的頂部，減少了與介質的接觸面積，從而影響了擴散速率。

圖3 釋放度測定方法與條件選擇

轉籃轉速：考察了緩釋片在轉籃轉速分別為50，100，150 r/min時藥物的釋放情況。結果見圖3 B。可見，轉速增加對溶出速率的影響較大，因此確定以150 r/min作為測定溶出速率的轉速。

2.5 驗證試驗

按照篩選的處方進行3次驗證試驗，并按上述篩選的釋放度方法進行測定，以驗證該處方的重現性和可操作性。結果表明，放大后釋放度總體上變化不大。因此該工藝穩定，處方的重現性可靠。

2.6 釋藥機制

將所制得的甲砜霉素緩釋片3批樣品用Peppas方程擬合。結果3批樣品 n值分別為0.65，0.72，0.68，均在0.45～0.89之間。根據Peppas方程理論，說明其釋放機制應該是擴散和溶蝕同時起作用。

3 討論

在本制劑中，HPMC的含量是影響藥物釋放機制的最主要因素。HPMC含量增加，水化速度加快，可迅速形成凝膠層，使藥物釋放速率趨于緩慢。預膠化淀粉作為不溶性或部分可溶性賦形劑，可造成空間效應，還會改變聚合物凝膠的物理滲透性，故能在片劑，表面形成有限的阻礙凝膠層，并與其他聚合物聯合應用而成為緩釋制劑中有效的賦形劑，能使緩釋片具有較高的藥物緩釋特性。根據Peppas方程擬合結果表明，藥物以擴散、溶蝕并存的混合型機制釋放。該處方設計合理，方法簡單，工藝重現性好，適合工業生產。

[1]朱來峰，張靜芳.鹽酸氨溴索緩釋片的制備及釋放度研究[J].海峽藥學，2009，12（5）：20－22.

[2]袁偉清.瑞貝克緩釋片的制備及其體外釋放度的試驗研究[J].中外醫學研究，2009，7（6）：103.

[3]陳寶林，楊 昕.不同廠家卡馬西平溶出度考察[J].醫藥導報，2007，26（9）：1 064－1 067.

[4]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（二部）[M].北京：化學工業出版社，2005：附錄74.