黃金蟬若蟲體蛋白水解液的熒光標記及電噴霧質譜鑒定

摘 要 采用2\\[2(7H二苯并\\[a，g\\]咔唑乙氧基)乙基］氯甲酸酯(DBCECCl)作為柱前衍生試劑， 于室溫下，在硼酸鈉緩沖液(pH 9.0)中，金蟬若蟲體蛋白水解液中氨基酸的完全衍生化在5 min即可完成。在Hypersil BDSC18色譜柱 (200 mm×4.6 mm，5 μm) 上， 采用梯度洗脫實現了各衍生物的完全基線分離。最佳熒光檢測為λex/λem=300/395 nm。在線串聯的ESI/MS正離子質譜數據顯示：所有衍生物均給出m/z 3385，294.5的特征碎片離子峰。熒光條件下的線性回歸系數大于0.9992； 檢出限為2.6～24 fmol。本方法靈敏、可靠、重現性好。對實際黃金蟬若蟲體蛋白水解液中氨基酸的測定，結果滿意。

關鍵詞 高效液相色譜離子阱/質譜； 熒光檢測； 柱前衍生； 2\\[2(7H二苯并\\[a，g\\]咔唑乙氧基)乙基］氯甲酸酯； 氨基酸