Ⅱ型糖尿病大鼠神經視網膜組織中差異蛋白質分析

摘要 以高脂飲食聯合小劑量鏈脲菌素(Streptozotocin， STZ ) 注射方法誘導大鼠II型糖尿病 (T2DM) 模型為研究對象， 采用比較蛋白質組學技術鑒定和分析早期糖尿病神經視網膜差異表達蛋白。通過聯用液氮內研磨、冰浴超聲、高速離心提取全蛋白技術，提取每只大鼠神經視網膜全蛋白質總量約900 μg。采用雙向凝膠電泳(2DE) 分離技術，獲得2500個以上可辯認的蛋白質斑點。通過蛋白質組學比對技術篩選出糖尿病狀態下神經視網膜差異表達蛋白，用基質輔助激光解吸電離飛行時間串聯質譜 (MALDITOF MS/MS) 和肽質量指紋圖譜 (PMF) 鑒定出20個差異蛋白點。按照Gene Ontology (GO)分類體系，對差異蛋白歸類分析，揭示其亞細胞定位和分子功能。應用Pathway Studio軟件對差異表達蛋白的生物學意義進行分析，認為凋亡是早期糖尿病視網膜病變(Diabetic retinopathy，DR) 重要的細胞事件;AnnexinΙ、CRYAB、mtHsp70蛋白是與病理過程相關的關鍵蛋白，對研究DR致病機制有重要意義。