BactoScan 8000S在原料奶細菌總數快速檢測中的應用

■ 趙澤民 徐亞麥 李洪奎 王力 黑龍江龍丹乳業科技股份有限公司

原料奶生產和運輸的過程中，不可避免地會被空氣、容器、乳房本身、擠奶人員、工具以及牛舍中的糞便和草料等中的微生物污染，從而影響原料奶的酸度、粘度、氣味、游離脂肪酸含量及保存期。如何才能迅速、準確判斷出原料奶的衛生質量，是所有乳品企業和奶農最關心的問題。本文從國內外乳品企業最常用的微生物檢測方法比較入手，重點介紹了BactoScan 8000S儀器的工作原理、檢測過程、數據分析等，并論述了使用這種儀器對成品質量控制的重要意義。

▲ BactoScan 8000S儀器

表1 常用菌落總數測定方法

1 現有測定方法比較

常用菌落總數測定方法如表1所示。

由該表可以看出，國標方法和美蘭試驗檢測周期較長，不適合企業快速了解原料奶質量；顯微鏡計數法是通過對原料奶進行涂片、染色，然后進行顯微鏡觀察計數的，該方法方便、快捷，但不適用于企業大批量檢驗；BactoScan 8000S儀器測定方法的原理是顯微鏡計數方法，但它的染色及計數過程都是由儀器自動完成，適合企業大批量檢驗，并且可以在收奶現場快速完成測定，為生產部門快速完成所需奶質的篩選。

尤其要提到的是，BactoScan 8000S儀器測定方法和顯微鏡計數方法的計數結果是按單個細菌計數的，即它的計數結果既包含活的菌體，也包含死亡的菌體。而國標平板方法的計數結果是按菌落計數的（每個菌落不一定是一個菌體，可能包含若干個菌體）；同時，由于該測定方法所規定的培養條件下生長的僅是一部分或一群能在營養瓊脂上生長發育的、適中溫性需氧細菌，一些對營養和生長條件較為苛刻的或活力較弱不能在固體培養基上發育的細胞不能被檢出。因此，BactoScan 8000S儀器的計數結果更加準確，對于控制原料奶質量具有重要的實際意義。

2 BactoScan 8000S儀器測定原理

樣品從吸管吸入，進入混合室，同時梯度液（Gradient）、酶液（Enzy）、沖洗液（Lying）也進入混合室，經混合后進入離心室。在3種藥液的作用下，經過高速離心，使細菌沉淀下來，其余部分直接進入孵化器底部后再傳到廢液桶。細菌沉淀下來的部分再經由過濾器過濾，之后進入孵化器的每一個小瓶中，同時染色劑（Dye）也從其固定容器室傳至每一個小樣瓶中，同樣品一起倒入孵化器中的漏斗中。然后從漏斗中的吸管吸出，直線傳至顯微鏡下的轉盤上，光束的脈沖被轉換成電子脈沖，然后統計計數，并顯示在電腦的屏幕上。

3 檢測過程

3.1 檢測條件及所需材料

測量對象：原料奶；測量溫度：2～42℃；測量速度：80個樣/h；試劑：稀釋液粉（Lysing Powder），緩沖液粉（Buffer Powder），梯度液母液（Gradient Stock Solution），染色液（Enzyme Stock Solution），乳化劑（BSC 8000 Emulsifier），清潔劑（BSC 8000 Detergent），酶劑母液（Staining Medium Stock solution）。

表2 原料奶細菌數量檢驗情況

表3 原料奶投入生產后成品（奶粉產品）菌落總數測定情況

3.2 操作步驟

樣品分析前需要搖勻或預熱，使用一個空白樣品來清除懸浮液樣品的遺留物，然后測試4個空白樣品，所有的測試結果必須低于20，并且平均值低于10。空白數值符合要求后將準備檢測的樣品放在傳送帶右邊，在電腦上設定做樣批次、數量，然后按自動測量按鈕，機器就自動做樣了。

4 結果與討論

表2～3列出了采用國標法和BactoScan 8000S儀器法檢測原料奶細菌數量的對比情況，及根據不同指標的原料奶配料后成品的微生物指標情況。

總體來看，BactoScan 8000S儀器測定的結果比國標平板法的數值高一個數量級，這主要是因為BactoScan 8000S儀器測定的計數結果是按單個細菌計數的，其中還包含死去的菌體。千萬不要小看這些死去的菌體，他們產生的酶類在適當的條件下可能被激活，酶的存在可使產品中的營養成分發生分解，產生不良的氣味和口感，影響產品的品質。

檢測過程中發現，BactoScan 8000S儀器測定結果好于國標平板法，它更能反應出原料奶的衛生狀況和新鮮程度。3號原料奶的平板測定結果好于5號原料奶，但通過BactoScan 8000S檢測的結果卻是趨于一致的，而最終在成品粉上也反應出結果的一致性。這說明3號原料奶中存在部分衰亡的菌體，國標平板法未能完全檢出。

另外，由于BactoScan 8000S儀器測定結果包含活力較弱或死亡的細菌，所以該方法僅限于原料奶的檢測，而不適用于乳制品成品的檢驗。

5 結語

實踐證明，企業采用BactoScan 8000S儀器檢測原料奶細菌數量的方法方便快捷，是乳品企業監測原料奶衛生質量的好方法，對原料奶及成品質量控制有重要意義。

建議企業在收奶的過程中，采用BactoScan 8000S儀器對原料奶進行檢測，根據檢測結果對奶質進行評價、分類，并對原料奶的去向進行跟蹤，以便今后做好成品質量的追溯。

［1］張麗宏，王克新，房玉國.食品中菌落總數測定方法探討.中國乳品工業，2005，33（4）:56～57

［2］顧瑞霞.乳與乳制品的生理功能特性.北京：中國輕工業出版社，2001

［3］GB/T 4789.2—2003中華人民共和國國家標準·食品衛生微生物學檢驗菌落總數測定.北京：中國標準出版社，2003