探訪瑞普生物豬瘟脾淋苗生產(chǎn)4S模式——訪瑞普（保定）生物藥業(yè)有限公司技術(shù)總監(jiān)尤永君

本刊記者 范旭

目前，瑞普（保定）公司在豬瘟脾淋疫苗的生產(chǎn)過程中采用了4S（標(biāo)準(zhǔn)化）模式，為此，我們邀請(qǐng)了瑞普（保定）公司技術(shù)總監(jiān)尤永君就4S（標(biāo)準(zhǔn)化）模式的有關(guān)情況進(jìn)行了訪談。

記者：目前國內(nèi)的豬瘟感染情況如何？其流行特點(diǎn)有哪些？

尤永君：豬瘟（CSF）是國際動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）和中國的A類法定傳染病之一，雖納入我國重大動(dòng)物疫病的強(qiáng)制性免疫體系，但仍是危害我國養(yǎng)豬業(yè)的“第一殺手”。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，每年因疾病死亡的豬只數(shù)占豬總數(shù)的8%～10%，而其中1/3是由豬瘟引起的。目前，在我國豬瘟呈三個(gè)明顯的流行特點(diǎn)：第一，大規(guī)模暴發(fā)已不多見，多呈散發(fā)，免疫豬群以非典型豬瘟為主；第二，豬群的隱性感染或帶毒現(xiàn)象普遍存在；第三，常與藍(lán)耳病病毒（PRRSV）、豬圓環(huán)病毒（PCV2）等疾病呈二重或多重感染。

記者：我國豬瘟的防控策略是怎樣的？

尤永君：我國豬瘟的防控策略，目前和今后很長一段時(shí)間仍然以疫苗免疫為主。而疫苗質(zhì)量直接決定了豬瘟的防控效果。每年因疫苗質(zhì)量問題導(dǎo)致免疫失敗的現(xiàn)象屢見不鮮。

當(dāng)前，市場(chǎng)上應(yīng)用的豬瘟疫苗主要有豬瘟脾淋苗和豬瘟細(xì)胞苗，其中細(xì)胞苗又包括牛睪丸細(xì)胞苗和ST傳代細(xì)胞苗。無論哪種疫苗，生產(chǎn)用種毒均為豬瘟病毒兔化弱毒株（C株），該毒株的免疫原性、有效性和安全性已得到全球的廣泛認(rèn)可。

豬瘟脾淋苗因其具有較好的免疫效果和保護(hù)率，深受廣大養(yǎng)殖戶的青睞，占有較大的市場(chǎng)份額，但由于脾淋苗受生產(chǎn)環(huán)境、家兔質(zhì)量、生產(chǎn)工藝、內(nèi)控指標(biāo)等多種因素的影響，導(dǎo)致現(xiàn)有市場(chǎng)上豬瘟脾淋苗的質(zhì)量參差不齊。因此，為了實(shí)現(xiàn)豬瘟脾淋苗標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)，加強(qiáng)豬瘟脾淋苗的生產(chǎn)環(huán)境、家兔質(zhì)量、生產(chǎn)工藝、病毒含量、純凈性等方面的研究勢(shì)在必行！

瑞普(保定)公司以豬瘟脾淋苗質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)化為科研課題，就生產(chǎn)及檢驗(yàn)用兔的標(biāo)準(zhǔn)、生產(chǎn)環(huán)境、生產(chǎn)流程、關(guān)鍵工藝及質(zhì)控體系等方面進(jìn)行了潛心研究，在國內(nèi)首次采用流水線式脾淋抗原采集工藝，建成了工藝先進(jìn)、產(chǎn)能最大的豬瘟脾淋苗GMP生產(chǎn)車間，創(chuàng)建了豬瘟脾淋苗生產(chǎn)的“4S（標(biāo)準(zhǔn)化）”模式，保證了豬瘟脾淋苗質(zhì)量的批內(nèi)一致、批間穩(wěn)定，徹底解決了豬瘟脾淋苗生產(chǎn)流程難以標(biāo)準(zhǔn)化的問題。

記者：瑞普公司的豬瘟脾淋苗“4S（標(biāo)準(zhǔn)化）”生產(chǎn)模式都包括那些體系？這些體系都有哪些特點(diǎn)？

尤永君：瑞普生物豬瘟脾淋苗4S模式包括標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)車間（GMP）、標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)用兔、標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)工藝(SOP)和標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)控體系。

標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)車間（GMP）

為確保豬瘟脾淋苗的質(zhì)量，瑞普(保定) 生物藥業(yè)有限公司嚴(yán)格按照獸藥GMP要求，采用國內(nèi)最先進(jìn)的家兔飼養(yǎng)設(shè)施、流水線式脾淋抗原采集設(shè)備等，建成了國內(nèi)面積最大、產(chǎn)能最大、生產(chǎn)設(shè)施最先進(jìn)的豬瘟脾淋苗專用GMP生產(chǎn)車間，從硬件設(shè)施上保證了豬瘟脾淋疫苗生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)化，年產(chǎn)豬瘟脾淋苗達(dá)1.26億頭份。

家兔的飼養(yǎng)環(huán)境對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量至關(guān)重要。由公式R=(A+B+C)*D±E（R:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的總 反 應(yīng)；A:動(dòng)物種間的共同反應(yīng)；B:動(dòng) 物 品種，品系特有的反 應(yīng)；C:動(dòng) 物的個(gè)體反應(yīng)；D:環(huán)境因素；E:實(shí)驗(yàn)誤差）可知，飼養(yǎng)環(huán)境D對(duì)疫苗質(zhì)量R至關(guān)重要。環(huán)境因素包括物理因素（溫度、濕度、氣流、光照、噪聲、籠具、飼養(yǎng)密度等）、化學(xué)因素［飼料、飲水、空氣、臭氣（如氨氣濃度）、殺蟲劑、消毒劑等］、人為因素（主要是飼養(yǎng)管理程序）、生物因素（各種病原體包括細(xì)菌、病毒、寄生蟲等）等，其中環(huán)境溫度對(duì)家兔疫苗熱反應(yīng)影響較大。（見表1）

由表1可見，保持環(huán)境因素的穩(wěn)定對(duì)生產(chǎn)高質(zhì)量豬瘟脾淋苗至關(guān)重要。瑞普（保定）生物藥業(yè)有限公司建成了國內(nèi)最大的GMP標(biāo)準(zhǔn)化飼養(yǎng)兔舍，制定了標(biāo)準(zhǔn)化的飼養(yǎng)管理程序，實(shí)行全進(jìn)全出制，防止其他病原菌的侵入，克服了環(huán)境因素對(duì)家兔豬瘟種毒熱反應(yīng)的影響。

標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)用家兔

生產(chǎn)用家兔的質(zhì)量是影響脾淋疫苗質(zhì)量的重要因素之一。注射豬瘟種毒后家兔熱型反應(yīng)情況與家兔的來源、遺傳背景、品種、日齡、健康情況、有無豬瘟抗體、體重等因素有密切的關(guān)系。

為了克服生產(chǎn)用家兔對(duì)疫苗品質(zhì)的影響，瑞普生物根據(jù)30多年生產(chǎn)數(shù)據(jù)監(jiān)測(cè)情況制定了生產(chǎn)用家兔質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。（見表2）

標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)工藝 (SOP)

瑞普生物優(yōu)化豬瘟脾淋苗生產(chǎn)工藝流程，包括人性化的屠宰模式、兩次體表消毒制度、鏈條懸掛式無菌脾淋采集模式、終端無害化處理制度等，規(guī)范了整個(gè)豬瘟脾淋苗的生產(chǎn)過程。嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程生產(chǎn)，對(duì)生產(chǎn)環(huán)節(jié)的各個(gè)動(dòng)作進(jìn)行分解，每個(gè)人只做一個(gè)動(dòng)作。在百級(jí)層流環(huán)境下，對(duì)經(jīng)過兩次消毒的家兔胴體進(jìn)行懸掛式解剖，暴露內(nèi)臟，幾乎不和其他可能造成污染的部位接觸，分開采集脾臟和淋巴，減少傳統(tǒng)方式的剪鑷碰觸內(nèi)臟，尤其是腸道破損而造成的污染；同時(shí)采集的脾淋組織采用冰鎮(zhèn)方式，避免環(huán)境溫度對(duì)抗原效價(jià)產(chǎn)生影響。整個(gè)過程完全在軌道上進(jìn)行，大大提高了生產(chǎn)速度和效率，從而標(biāo)準(zhǔn)化豬瘟脾淋苗生產(chǎn)工藝！

標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)控體系

用不同劑量的豬瘟C株疫苗免疫豬，證實(shí)免疫劑量與保護(hù)水平密切相關(guān)。劑量不足時(shí)，攻毒后不能阻止強(qiáng)毒在體內(nèi)的復(fù)制和帶毒。合格疫苗每頭份抗原含量應(yīng)＞50PD50，即將疫苗50倍稀釋免疫仍能保護(hù)50%。歐洲疫苗抗原含量標(biāo)準(zhǔn)≥100PD50，而我國規(guī)定脾淋組織疫苗的免疫劑量為150RID，折算為37PD50，這一劑量遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于國際標(biāo)準(zhǔn)。

記者：按照4S（標(biāo)準(zhǔn)化）模式生產(chǎn)的豬瘟脾淋疫苗有哪些特點(diǎn)？

表1 環(huán)境溫度對(duì)大耳白家兔定型熱比率的影響

表2 瑞普生物生產(chǎn)用家兔標(biāo)準(zhǔn)

尤永君：瑞普生物嚴(yán)格按照內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)豬瘟脾淋疫苗（商品名：文易寧），每頭份疫苗至少含有750RID（＞180PD50），只需注射一個(gè)劑量就足以抵抗亞臨床感染。疫苗純凈，無細(xì)菌、支原體、外源病毒污染，在生產(chǎn)過程中只采集定型熱家兔的脾臟和淋巴，采取組織搗碎和超聲波破碎相結(jié)合的方式，充分的釋放抗原。同時(shí)采用低溫連續(xù)流離心純化技術(shù)去除組織碎片，大大降低疫苗的副反應(yīng)。

（本次采訪中我們還得到了瑞普公司吳雅清博士、李建麗博士、徐兆強(qiáng)博士的大力支持，在此表示感謝。）