子宮內膜異位癥患者 survivin蛋白的表達及臨床意義

胡玉紅,石 瑾,張 燕

(佳木斯大學附屬第一醫(yī)院婦產(chǎn)科,黑龍江 佳木斯 154003)

子宮內膜異位癥(endometriosis,EM T)簡稱內異癥。指具有活性的子宮內膜組織(腺體和間質)出現(xiàn)在子宮內膜以外的部位[1]。它雖為良性疾病,但卻具有類似惡性腫瘤的“惡性”行為,至今無特效療法,發(fā)病機制尚未完全闡明。survivin是最近被發(fā)現(xiàn)的凋亡抑制蛋白 (IAP)基因家族中的新成員,細胞凋亡與內異癥的關系逐漸成為近年的研究熱點。本研究通過免疫組化方法檢測三組內膜組織中 survivin蛋白的表達情況,并探討在 EM T發(fā)病機制中的作用及臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

所有研究樣本均來自 2008— 03～ 2009— 03期間在我院婦產(chǎn)科行開腹手術,且術后病理檢查證實為 EM T的患者。選取36例異位內膜組織 (異位內膜組),增生期 20例,分泌期16例。另選取36例因 EM T行子宮切除手術的在位子宮內膜組織 (在位內膜組 ),增生期 18例 ,分泌期 18例 ,。選擇 25例正常子宮內膜組織 (正常內膜組 )作為對照組,標本均取自同期因宮頸癌手術且術后經(jīng)病理證實為正常子宮內膜的患者,增生期 12例,分泌期13例。所有病例均月經(jīng)周期規(guī)律,術前6個月無激素治療史。月經(jīng)周期劃分根據(jù)末次月經(jīng)及子宮內膜病理檢查結果確定。

1.2 主要試劑

鼠抗人 survivin單克隆抗體,SP試劑盒及 DAB顯色試劑盒購自北京中杉金橋生物技術有限公司。

1.3 實驗方法

所有標本均于術后取材,用10%福爾馬林液固定;石蠟包埋;連續(xù)切片,厚約4μm。切片常規(guī)脫蠟水洗。采用免疫組化 SP法進行免疫組織化學染色,嚴格按說明書進行實驗操作。陰性對照用磷酸鹽緩沖液代替一抗,陽性對照為已知陽性切片。

1.4 結果判斷

按照試劑盒說明,以細胞漿或細胞核內出現(xiàn)棕黃色或褐色顆粒為判斷標準;根據(jù)陽性細胞顯色深淺分級:不顯色或顯色不清為陰性(-);淺黃色為弱陽性(+ );棕黃色為中度陽性(++);深褐色為強陽性(+++)。

1.5 統(tǒng)計學分析

實驗數(shù)據(jù)用 SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行結果分析,計數(shù)資料采用卡方檢驗。

2 結果

2.1 survivin蛋白在三組內膜中的表達

根據(jù)免疫組織化學染色結果顯示,三組內膜中均有 survivin蛋白的表達,異位內膜組和在位內膜組表達高于正常內膜組 (P＜0.01或P＜0.05),而異位內膜組陽性表達率高于在位內膜組 (P＜ 0.05)。見表1。

表1 survivin蛋白在三組內膜中的表達

2.2 Survivin蛋白在三組內膜中的表達與月經(jīng)周期的關系

Survivin蛋白在異位內膜組和在位內膜組中,分泌期與增生期陽性表達均較強,在位內膜組分泌期強于增生期(P＜0.05);異位內膜組各期表達差異無顯著性(P＞ 0.05);正常內膜組中,分泌期與增生期陽性表達表達均較低,兩者差異無顯著性 (P＞ 0.05)。見表2。

表2 survivin蛋白在三組內膜中的表達與月經(jīng)周期的關系

3 討論

Survivin蛋白是最近新被發(fā)現(xiàn)的一種結構獨特 IAP族的凋亡抑制因子,與細胞分裂、增殖有關,在胚胎組織和惡性腫瘤中表達,正常成年分化組織一般不表達或弱表達[2]。survivin作為 IAP家族的特殊成員,具有細胞增殖和抑制細胞凋亡的雙重作用,在內異癥的發(fā)生發(fā)展過程中可能起著重要作用。更多的研究證實,凋亡是子宮內膜細胞保持周期性結構和功能穩(wěn)定的關鍵因素,異位內膜細胞得以在宮腔外種植并繼續(xù)存活,與其對凋亡的抵抗力增強有關。并且隨著 EM T的嚴重程度增加而進一步降低,推測異位內膜細胞在盆腔內得以繼續(xù)存活及種植,很可能與其對凋亡的抵抗力增強有關[3]。Garcia-Velasco等[4]研究發(fā)現(xiàn),子宮內膜凋亡呈規(guī)律的周期變化,分泌期的凋亡活動顯著比增殖期活躍,并與正常子宮內膜作比較,推測 EM T患者的在位內膜可能因抑制凋亡能力增強,從而在其逆流入腹腔后出現(xiàn)異常存活現(xiàn)象,支持逆流種植學說。本研究發(fā)現(xiàn),三組內膜中均有 survivin蛋白的表達,異位內膜組和在位內膜組 survivin蛋白陽性表達率高于正常內膜組 (P＜0.01或P＜0.05),而異位內膜組陽性表達率高于在位內膜組 (P＜0.05)。異位內膜組中survivin蛋白在的高表達,在提示 survivin蛋白可能是通過抑制異位內膜細胞的凋亡使其增殖失控,進而促進內異癥的發(fā)生發(fā)展。另外分析在三組內膜的不同月經(jīng)周期(增生期和分泌期 )中 survivin蛋白表達情況,在正常內膜組中,分泌期與增生期陽性表達表達均較低 ,兩者差異無顯著性 (P＞ 0.05)。在異位內膜組和在位內膜組中,分泌期與增生期陽性表達均較強,在位內膜組分泌期強于增生期 (P＜0.05);而異位內膜組各期表達差異無顯著性 (P＞ 0.05)。這與 Konno等[5]研究結果一致。異位內膜組織中,survivin蛋白在各期均有表達且顯著高于對照組,無周期性變化。提示,survivin蛋白表達升高導致異位內膜細胞的抑制凋亡能力明顯增強,使得細胞增殖和凋亡的失衡,有利于經(jīng)期反流到腹腔的異位內膜細胞在盆腔內繼續(xù)存活、種植,從而促進了 EMT的發(fā)生。因此,我們可以針對 survivin在異位內膜中高表達的特性,應用survivin抑制劑來促進異位內膜細胞凋亡 ,延緩復發(fā),在治療EM T中可能會具有一定臨床意義,為 EMT的治療提供新的途徑。

[1]樂杰.婦產(chǎn)科學[M].第7版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2008,325

[2]Chawla Sarkar M,Bae SI,Reu FJ,et al.Downregnlation of Bcl-2,FLIP or IAPs(XIAP and snrvivin)by siRN As sensitizes resistant melanoma cells to Apo2L/TRAIL- induced apoptosis[J].Cell Death Differ,2004,30:1160-1175

[3]郭悅慈,章漢旺.survivin與子宮內膜異位癥 [J].國外醫(yī)學計劃生育分冊,2004,23(3):144-146

[4]Garcia-Velasco J A,Arici A.Apoptosis and the pathogenesis of endometriosis[J].Semi Reprod M ed,2003,21(2):165-172

[5]Konno R,Yanakwa H,U tsunanomiya H,et al.Ex pression of survivin and Bcl-2 in the nomal human endom etrium[J].Mol Hum Reprod,2000,6:529-534