ABO血型定型困難原因分析及解決方法探討

楊珊

準(zhǔn)確鑒定血型，尤其是ABO疑難血型是保障輸血安全的最重要的環(huán)節(jié)。本文分析回顧了2006～2009年本中心輸血研究室收檢的柳州市、縣醫(yī)院因ABO血型定型困難而送檢的各類(lèi)患者疑難血型鑒定標(biāo)本，以及本中心檢驗(yàn)科因ABO正反定型不符而送檢的獻(xiàn)血者疑難血型鑒定標(biāo)本的血型鑒定記錄，分析ABO血型定型困難的原因，探討解決ABO血型定型困難的方法。現(xiàn)將分析結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 對(duì)象

2006～2009年本中心輸血研究室收到的柳州市、縣醫(yī)院因ABO血型定型困難而送檢的各類(lèi)患者疑難血型鑒定標(biāo)本，以及本中心檢驗(yàn)科因ABO血型正反定型不符而送檢的獻(xiàn)血者疑難血型鑒定標(biāo)本的血型鑒定記錄。

1.2 試劑

抗-A、抗-B、抗-AB、抗-H、抗-A1均由上海血液生物醫(yī)藥有限公司生產(chǎn)，AC、BC、OC由本室自制。

1.3 方法

ABO血型正反定型、亞型鑒定，吸收放散試驗(yàn)，A、B、H血型物質(zhì)測(cè)定按文獻(xiàn)[1]操作。

2 結(jié)果

2.1 107例ABO血型定型困難原因統(tǒng)計(jì)見(jiàn)表1。

其他原因引起的ABO血型定型困難包括1例串錢(qián)狀假凝集,2例溶血。

2.2 抗原方面原因引起ABO血型定型困難統(tǒng)計(jì)見(jiàn)表2。

抗原減弱或缺乏17例均為各類(lèi)患者(其中白血病5例,貧血3例,骨折3例,上消化道出血2例,肺癌1例,孕婦1例,垂體腺瘤1例,左葉頂枕出血1例)。17例亞型均為獻(xiàn)血員。

2.3 抗體方面原因引起ABO血型定型困難統(tǒng)計(jì)見(jiàn)表3。

檢出IgG+IgM抗體者均為各類(lèi)患者,且多數(shù)有輸血史、妊娠史。

3 討論

ABO抗原受控于A、B、H基因，不同個(gè)體紅細(xì)胞膜上表達(dá)不同的抗原，形成A、B、O、AB4種血型。ABO血型系統(tǒng)的共同特點(diǎn)是紅細(xì)胞上含有某種抗原，血清中就不存在對(duì)應(yīng)的抗體，ABO血型系統(tǒng)正常的型別均符合這種規(guī)律，故可根據(jù)此規(guī)律用血型單克隆抗體檢測(cè)紅細(xì)胞上的抗原(正定型)，或用標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞檢測(cè)被檢者血清中的抗體(反定型)來(lái)判斷被檢者的血型[2-3]。為保證ABO血型定型正確，必須做正反定型。本文107例收檢標(biāo)本，均是在ABO正反定型時(shí)發(fā)現(xiàn)不符而送檢本中心輸血研究室進(jìn)行進(jìn)一步確認(rèn)。

表1 107例ABO血型定型困難原因統(tǒng)計(jì)

表2 抗原方面原因引起ABO血型定型困難統(tǒng)計(jì)

表3 抗體方面原因引起ABO血型定型困難統(tǒng)計(jì)

送檢的ABO血型定型困難的原因以抗原和抗體方面引起為主。抗原方面引起的原因?yàn)榭乖瓬p弱或缺乏。健康者抗原減弱最可能的解釋是亞型，而患者抗原減弱或缺乏常與疾病相關(guān)。報(bào)道較多的是白血病引起的抗原減弱或消失[4]。本文檢出17例亞型均為獻(xiàn)血者，檢出5例白血病引起的抗原減弱。對(duì)抗原減弱或缺乏的標(biāo)本，可以通過(guò)紅細(xì)胞與抗-A，抗-B血清吸收放散試驗(yàn)來(lái)證實(shí)抗原的存在，對(duì)分泌型患者可以通過(guò)檢測(cè)唾液中含有的A物質(zhì)、B物質(zhì)、H物質(zhì)進(jìn)一步證實(shí)抗原的存在。亞型的鑒定主要依據(jù)紅細(xì)胞與抗-A、抗-B、抗-AB、抗-H、抗-A1的反應(yīng)格局以及紅細(xì)胞與抗-A，抗-B血清吸收前后效價(jià)變化，以及吸收抗-A，抗-B后紅細(xì)胞是否放散出抗-A，抗-B的情況，并對(duì)唾液血型物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)來(lái)確定。

抗體方面原因引起的ABO血型定型困難主要為冷自身抗體，IgG+IgM抗體，以及抗體減弱或缺乏。由于冷自身抗體存在于健康者和患者中。健康者冷自身抗體效價(jià)一般不高，且在4℃以下時(shí)才有活性。某些疾病情況下如淋巴細(xì)胞白血病、淋巴瘤或感染、支原體肺炎、鏈球菌感染均可導(dǎo)致冷自身抗體效價(jià)升高[5]。解決強(qiáng)冷自身抗體對(duì)ABO定型的影響，最好從采集標(biāo)本時(shí)就注意。將抽取的血液樣本注入含抗凝劑的試管內(nèi)，迅速混勻并立即將試管置于370C中，這樣可以防止冷自身抗體在體外附著到那些用來(lái)做血型定型的細(xì)胞上，另取一份血樣本注入不含抗凝劑的試管中，讓此樣本在室溫或更低溫度下凝固，將此試管置于4оC讓冷反應(yīng)抗體附著到那些細(xì)胞上，取此管血清用于反定型[6]。定型前用37оC鹽水洗滌紅細(xì)胞，在4оC、37оC、室溫下進(jìn)行正反定型，并設(shè)自身對(duì)照，可以得到正確的ABO血型鑒定結(jié)果。應(yīng)注意與細(xì)菌污染造成的全凝集相區(qū)別，全凝集的細(xì)胞沒(méi)有血型選擇性，用加溫和洗滌紅細(xì)胞凝集不能消出[5]。

本文檢出的IgG+IgM抗體，均為患者標(biāo)本，多數(shù)有輸血史、妊娠史，IgG抗體可能為同種抗體或自身抗體。強(qiáng)致敏的紅細(xì)胞在室溫鹽水中可能有弱凝集，可利用56οC放散3分鐘，移去附著在紅細(xì)胞上的抗體再進(jìn)行ABO血型鑒定，可得到正確的ABO定型結(jié)果[6]。

血清抗體減弱或消失可以通過(guò)在4оC反應(yīng)，并增加抗原抗體反應(yīng)時(shí)間而檢出減弱抗體。在排除不規(guī)則抗體存在的情況下，采用吸收放散試驗(yàn)可以檢出減弱抗體，即用標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞(抗原)在最適溫度下(4οC)，充分吸收待檢血清中的抗體，然后通過(guò)放散試驗(yàn)檢測(cè)出弱抗體。因?yàn)槲辗派⒌倪^(guò)程實(shí)際上起到濃縮抗體和抗體粗純化的作用。吸收放散試驗(yàn)法可以用于檢測(cè)抗原也可以用于檢測(cè)抗體，所以在有限條件下，靈活運(yùn)用吸收放散試驗(yàn)?zāi)軌驕?zhǔn)確鑒定ABO血型[7-8]。

本文1例串錢(qián)狀假凝集發(fā)現(xiàn)于一名多發(fā)性骨髓瘤患者，患者紅細(xì)胞在電鏡下呈串錢(qián)狀凝集，用生理鹽水稀釋或洗滌紅細(xì)胞可使凝集消失。發(fā)現(xiàn)2例O型患者反定型時(shí)出現(xiàn)溶血，表明存在抗原抗體反應(yīng)并有補(bǔ)體激活，應(yīng)視為陽(yáng)性反應(yīng)。因?yàn)橛没颊叩男迈r血清做反定型時(shí)，由于補(bǔ)體作用發(fā)生溶血，如未注意溶血現(xiàn)象，會(huì)使結(jié)果判斷錯(cuò)誤或遺漏。

[1] 中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部.中國(guó)輸血技術(shù)手冊(cè)(血站部分)[M].天津:天津科學(xué)技術(shù)出版社,1997:60-85.

[2] 安萬(wàn)新.輸血檢驗(yàn)學(xué)[M].大連:大連出版社,2002:90-91.

[3] 王培華.輸學(xué)技術(shù)學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2002:133-155.

[4] 胡榮華,王淑芬,馬麗榮,等.白血病引起的ABO血型抗原暫時(shí)減弱1例[J].中國(guó)輸學(xué)雜志,1989,2(2):83-84.

[5] 韓秀綿,趙繼芬,么孝恩.對(duì)有高效價(jià)冷凝集素患者的輸血體會(huì)[J].中國(guó)輸血雜志,1992,5(3):135-136.

[6] 肖星甫,季陽(yáng),尚書(shū)頌.輸血技術(shù)手冊(cè)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1998:533-535.

[7] 吳敏慧,劉毅.ABO血型正反定型不符確認(rèn)試驗(yàn)結(jié)果分析[J].臨床輸血與檢驗(yàn),2005,7(3):198-199.

[8] Engelfriet CP.What is the best technique for the detection of red cell alloantibodies[J].Vox Sang,1995,69(3):292-300.