電位滴定法測定羅庫溴銨原料藥含量的方法改進(jìn)

宋更申，周麗，姜建國，閆凱，龐文哲

（1.河北省藥品檢驗(yàn)所，石家莊市 050011；2.石家莊四藥有限公司，石家莊市 050021）

羅庫溴銨（Rocuronium bromide）是一種新型非去極化神經(jīng)肌肉阻滯劑，適用于全身麻醉，可使骨骼肌松弛并用于氣管內(nèi)插管[1]。羅庫溴銨的含量測定方法多采用加醋酸汞的高氯酸滴定指示劑法或加醋酸汞的高氯酸電位滴定法。醋酸汞屬于有機(jī)汞鹽，有機(jī)汞鹽的毒性大于金屬汞和無機(jī)汞化合物，它的使用會對環(huán)境造成污染和威脅；同時，采用指示劑法指示終點(diǎn)，容易受到個人因素的影響，操作誤差較大。《歐洲藥典》6.0版（EP 6.0）[2]采用加冰醋酸后直接進(jìn)行電位滴定的方法，但該方法終點(diǎn)突躍不明顯。為了消除汞的污染，提高終點(diǎn)突躍的靈敏度并使方法易于操作，筆者參考《中國藥典》2005年版[3]的相關(guān)規(guī)定和有關(guān)文獻(xiàn)[4，5]，通過研究建立了革除汞鹽的高氯酸電位滴定法測定羅庫溴銨原料藥的含量。該方法操作簡便快速、靈敏度高、結(jié)果準(zhǔn)確，可為羅庫溴銨的質(zhì)量控制提供參考。

1 儀器與試藥

DL50型自動電位滴定儀、DG113-SC復(fù)合電極（瑞士Mettler toledo公司）；BP 211D型電子天平（德國Sartorius公司）。

羅庫溴銨對照品（河北省藥品檢驗(yàn)所標(biāo)定，批號：LK-2008001，含量：100.0%）；羅庫溴銨原料藥（河北九派制藥有限公司提供，批號：081021、081022、081023，含量分別為99.7%、99.6%、99.8%）；冰醋酸、醋酐均為分析純；0.1mol·L－1高氯酸滴定液（河北省藥品檢驗(yàn)所標(biāo)定，0.1001 mol·L－1）。

2 方法與結(jié)果

2.1 改進(jìn)方法

2.1.1 自動電位滴定儀條件。采用Mettler DG113-SC復(fù)合電極；參數(shù)設(shè)置：閾值（判斷滴定是否達(dá)到終點(diǎn)的參數(shù)，是dE與dV的比值。）100，預(yù)饋3.5 mL，總體積（滴定儀停止滴定的體積）7 mL。

2.1.2 操作方法。取本品約0.35 g，精密稱定，加冰醋酸15 mL使之溶解，再加醋酐45 mL，照電位滴定法（《中國藥典》2005年版附錄ⅦA[3]），用高氯酸滴定液（0.1001 mol·L－1）滴定，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1 mL高氯酸滴定液（0.1 mol·L－1）相當(dāng)于60.97 mg的C32H53BrN2O4。

2.1.3 穩(wěn)定性試驗(yàn)。精密稱取羅庫溴銨（批號：081021）3份各約0.35 g，分別置于滴定杯中，加冰醋酸15 mL使溶解，再加醋酐45 mL，放置0、2、4 h后，照“2.1.1”項下的條件，用高氯酸滴定液（0.1001 mol·L－1）測定含量。結(jié)果，平均含量為99.6%，RSD＝0.03%。表明該方法在4 h內(nèi)測定結(jié)果穩(wěn)定。

2.1.4 最低檢測限。按“2.1.2”項下的方法和“2.1.1”項下的條件（預(yù)饋改為0 mL），逐步減小羅庫溴銨的稱樣量，當(dāng)稱樣量減小到1.71 mg時，樣品消耗的滴定液體積為0.028 mL，滴定終點(diǎn)突躍仍然比較明顯，表明該方法檢測靈敏度高。

2.1.5 線性關(guān)系考察。分別精密稱取羅庫溴銨（批號：081021）0.1501、0.2011、0.2509、0.3021、0.3502、0.3751、0.4013 g置于滴定杯中，按“2.1.2”項下方法測定滴定液所消耗的體積。以各樣品所消耗高氯酸滴定液的體積（V）對稱樣量（W）進(jìn)行線性回歸，得回歸方程：V＝16.3326W－0.0016（r＝0.9999），表明羅庫溴銨稱樣量在0.1501～0.4013 g范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.1.6 重復(fù)性試驗(yàn)。精密稱取羅庫溴銨（批號：081021）6份各約0.35 g，分別置于滴定杯中，照“2.1.2”項下方法測定并計算含量。結(jié)果平均含量為99.7%，RSD＝0.1%，表明該方法的重復(fù)性良好。

2.1.7 中間精密度試驗(yàn)。取批號為081021的樣品，由3名不同試驗(yàn)者在不同時間、以不同廠家不同批號的試劑、采用不同儀器，測定羅庫溴銨的含量。結(jié)果平均含量為99.7%，RSD＝0.2%，表明本方法中間精密度良好。

2.1.8 回收率試驗(yàn)。精密稱取羅庫溴銨對照品約0.28、0.35、0.42 g（分別相當(dāng)于測定濃度的80%、100%、120%）各3份，共9份，按“2.1.2”項下方法測定并計算回收率，結(jié)果見表1。

表1 回收率試驗(yàn)結(jié)果Tab 1 Results of recovery test

由表1結(jié)果表明，本方法低、中、高濃度平均回收率分別為99.90%%、99.95%、99.98%，表明該方法回收率良好。

2.2 EP6.0方法[2]

取本品0.4000 g，精密稱定，加40 mL冰醋酸使之溶解，照電位滴定法，用高氯酸滴定液（0.1 mol·L－1）滴定，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1 mL高氯酸滴定液（0.1 mol·L－1）相當(dāng)于60.97 mg的C32H53BrN2O4。

2.3 樣品的含量測定

取3批樣品，分別按“2.1.2”和“2.2”項下方法測定，并計算羅庫溴銨的含量，結(jié)果見表2。

由表2可見，2種測定方法結(jié)果無差異。

3 討論

表2 2種方法標(biāo)示含量檢測結(jié)果比較（%）Tab 2 Comparison of results determined by two kinds of methods（%）

羅庫溴銨系溴化物，用高氯酸滴定時產(chǎn)生氫溴酸，不利于反應(yīng)的定量進(jìn)行，故在滴定前加入醋酸汞，可以使溴離子與汞離子生成解離性很小的溴化高汞，以排除干擾；醋酐可解離生成酸性較醋酸合質(zhì)子強(qiáng)的醋酐合乙酰陽離子，從而可增強(qiáng)待測物的堿性，所以滴定前加入適量的醋酐，可增加羅庫溴銨的堿性，使滴定終點(diǎn)突躍敏銳。由于醋酸汞對環(huán)境的危害較大，從環(huán)保角度考慮，采用加入醋酐的方法替代加醋酸汞的方法。經(jīng)驗(yàn)證，該方法準(zhǔn)確性、線性、重復(fù)性等均滿足《中國藥典》2005年版的相關(guān)規(guī)定。

試驗(yàn)中，筆者不斷調(diào)整冰醋酸與醋酐的比例來對樣品進(jìn)行含量測定，通過增加醋酐的量，來增加其堿度，使終點(diǎn)突躍更為明顯。當(dāng)冰醋酸與醋酐的比例為1∶3時，終點(diǎn)突躍明顯，同時用該比例的溶劑測定“2.5”項下的不同稱樣量樣品的含量，終點(diǎn)突躍同樣比較明顯；且該比例試劑的總體積符合Mettler DL 50自動滴定儀對試劑體積的要求。

[1]裴 凌，盛卓人.羅庫溴銨歐洲研討會綜述[J].國外醫(yī)學(xué)-麻醉學(xué)與復(fù)蘇分冊，1995，16（4）：219.

[2]歐盟藥典委員會.歐洲藥典6.0[S].斯特拉斯堡：歐洲藥品質(zhì)量管理局，2008：2835～2837.

[3]國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典（二部）[S].2005年版.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：492、附錄ⅦA.

[4]宋更申，姜建國，張西如.頂空毛細(xì)管氣相色譜法測定羅庫溴銨中的殘留溶劑[J].中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)，2009，26（10）：849.

[5]陳廣東，劉 江，趙正保，等.高錳酸鉀滴定法快速測定肝速康膠囊中云芝多糖的含量[J].中國藥房，2006，17（17）：1338.