柴胡炮制后皂苷成分的變化分析

陳 帥， 李 燕， 孫秋實(shí)， 楊 方， 李 悅， 吳 彤

（上海醫(yī)藥工業(yè)研究院，上海 200040）

柴胡為傘形科植物柴胡Bupleurum chinenseDC.或狹葉柴胡Bupleurum scorzonerifoliumWild.的干燥根，味苦，微寒，歸肝、膽經(jīng)，具有疏散退熱，舒肝、升陽(yáng)的作用［1］。歷代本草和現(xiàn)代中醫(yī)的肝病用藥中多以柴胡為君藥。但柴胡的不同炮制品治療病癥側(cè)重點(diǎn)不一，在用于治療肝病時(shí)，常用其醋制品，2005版《中國(guó)藥典》中就收載了醋炙柴胡這一炮制品種。對(duì)于中藥炮制，國(guó)內(nèi)研究主要集中在炮制原理的探究和炮制方法的改進(jìn)等方面［2］，對(duì)炮制前后的藥材化學(xué)成分變化的研究較少，僅局限于針對(duì)某一種成分的變化進(jìn)行研究，如總皂苷、揮發(fā)油［3］等。本實(shí)驗(yàn)對(duì)柴胡炮制后及皂化反應(yīng)后皂苷成分的變化進(jìn)行了系統(tǒng)的分析研究，結(jié)果顯示炮制后，柴胡中總皂苷的含量都有所下降，柴胡皂苷b2的含量都大幅增加，柴胡皂苷a、c、d以及a+c+d的含量略微有所減少。皂化反應(yīng)后，柴胡皂苷a+c+d的含量變化很小，柴胡皂苷b2的含量都大幅增加。揭示了柴胡炮制后皂苷類化合物變化規(guī)律，為柴胡飲片的炮制及質(zhì)控提供較為全面的參考。

1 儀器、材料和試劑

1.1 儀器、材料 UV-8500紫外分光光度儀;HP1100高效液相色譜系統(tǒng):G1322A脫氣機(jī)，G1316A柱溫箱，G1311A四元泵，G1314A VWD紫外檢測(cè)器。

1.2 試劑 甲醇、乙腈、乙醇、氫氧化鈉、氫氧化鉀、磷酸、碳酸鈉、對(duì)二甲氨基苯甲醛、氨水、正丁醇、磷酸二氫鉀均為分析純;水（超純水）。柴胡皂苷a、c、d、b2均為本實(shí)驗(yàn)室自制（純度大于98%）。

1.3 藥材 見表1。

表1 柴胡及醋制柴胡藥材編號(hào)及產(chǎn)地Tab.1 Serial numbers and places of production of the medicinal materials and the processed bupleurum

2 方法與結(jié)果

2.1 柴胡皂苷b2的含量測(cè)定

2.1.1 分析條件

色譜柱:Diamonsil C18（250 mm×4.6 mm）;流速:1 mL/min;柱溫:35℃;檢測(cè)波長(zhǎng):248 nm。見表2。

表2 乙腈-水梯度洗脫條件Tab.2 Gradient elution program of acetonitrile and water

2.1.2 提取方法的考察

2.1.2.1 提取方式的選擇

取CH-5號(hào)藥材0.1 g兩份，精密稱量，置于茄形瓶中，一份精密的加入20 mL 5%氨水甲醇溶液于80℃水浴回流2 h，過濾，蒸干，精密加入5 mL甲醇溶液定容;另一份于試管中超聲兩次，每次加入5%氨水甲醇溶液10 mL，超聲1 h，離心，將兩次上清液合并蒸干，精密加入5 mL甲醇溶液定容，按2.1.1項(xiàng)色譜條件進(jìn)行分析，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示柴胡皂苷b2回流的提取效果優(yōu)于超聲，所以選擇回流這種提取方式。

2.1.2.2 提取時(shí)間的選擇

取CH-5號(hào)藥材0.1 g，精密稱量，置茄形瓶中，分別精密的加入20 mL 5%氨水甲醇溶液于80℃水浴回流，分別1 h、2 h、3 h、4 h，回流后過濾，蒸干，分別精密加入5 mL甲醇溶液定容，進(jìn)樣，按2.1.1項(xiàng)色譜條件進(jìn)行HPLC分析。1 h、2 h、3 h、4 h提取后含量幾乎沒有明顯的變化，為了既節(jié)約時(shí)間又使其充分的回流，并結(jié)合文獻(xiàn)的報(bào)道，選擇2 h為回流提取的時(shí)間。

2.1.2.3 提取次數(shù)的選擇

取CH-5號(hào)藥材0.1 g兩份，精密稱量，置于茄形瓶中，分別精密的加入5%氨水甲醇溶液20 mL于80℃水浴回流，一份回流2 h，過濾，蒸干，精密加入5 mL甲醇溶液，定容;另一份先回流2 h后，將上清液過濾，再加入20 mL 5%氨水甲醇溶液于濾渣中，再回流2 h，合并兩次濾液，蒸干，精密加入5 mL甲醇溶液，定容，按2.1.1項(xiàng)色譜條件進(jìn)行HPLC分析。結(jié)果顯示回流一次和兩次對(duì)于柴胡皂苷b2的提取效果并無明顯差異，所以選擇回流1次。

2.1.2.4 提取溶劑的選擇

柴胡提取溶劑的選擇取CH-5號(hào)藥材0.1 g兩份，精密稱量，置于茄形瓶中，一份加入5%氨水甲醇溶液20 mL，另一份加入5%氨水95%乙醇溶液20 mL，于80℃水浴回流2 h，過濾，蒸干，精密加入5 mL甲醇溶液，定容，按2.1.1項(xiàng)色譜條件進(jìn)行分析。結(jié)果顯示對(duì)于柴胡皂苷b2的提取，加入5%氨水甲醇溶液的提取效果優(yōu)于加入5%氨水95%乙醇溶液，所以對(duì)于柴胡的提取選擇加入5%氨水甲醇溶液。

醋制柴胡提取溶劑的選擇 取CH-5-4號(hào)藥材0.1 g 4份，精密稱量，置于茄形瓶中，分別精密的加入20 mL甲醇、5%氨水甲醇、95%乙醇、5%氨水95%乙醇溶液于80℃水浴回流2 h，過濾，蒸干，精密加入5 mL甲醇溶液定容，按2.1.1項(xiàng)色譜條件進(jìn)行分析，結(jié)果顯示5%氨水甲醇溶液對(duì)醋柴胡中柴胡皂苷b2的提取效果也較好。

綜上，得出柴胡皂苷b2的最佳提取方法:藥材粉末0.1 g，加入5%氨水甲醇溶液20 mL，于水浴回流2 h。

2.1.3 含量測(cè)定

取不同柴胡樣品，按供試品溶液制備方法操作并按2.1.1項(xiàng)色譜條件進(jìn)行HPLC分析，記錄柴胡皂苷b2的峰面積，計(jì)算含量，結(jié)果見表3。見圖1～4。

柴胡皂苷b2的含量測(cè)定結(jié)果顯示柴胡炮制后，柴胡皂苷b2的含量從10.7%～78.2%都有不同程度的提高。

2.1.4 方法學(xué)考察

2.1.4.1 對(duì)照品溶液的制備

表3 不同批次柴胡中柴胡皂苷b2的含量Tab.3 Content determination of saikosaponin b2of various samples

圖1 對(duì)照品柴胡皂苷b2HPLC圖譜Fig.1 HPLC chromatogram of saikosaponin b2 reference substance

圖2 藥材CH-5中柴胡皂苷b2含量測(cè)定HPLC圖譜Fig.2 HPLC chromatogram of saikosaponin b2in medicinal material CH-5

圖3 藥材CH-5-1中柴胡皂苷b2含量測(cè)定HPLC圖譜Fig.3 HPLC chromatogram of saikosaponin b2in medicinal material CH-5-1

柴胡皂苷b2自制。取柴胡皂苷b2對(duì)照品適量，精密稱量，加甲醇制成每1 mL中含0.067 8 mg的溶液，即得。

2.1.4.2 供試品溶液的制備

取柴胡藥材0.1 g，精密稱量，置于茄形瓶中，分別精密的加入5%氨水甲醇溶液20 mL于80℃水浴回流2 h，將濾液過濾，蒸干，精密加入5 mL甲醇溶液定容，即為供試品溶液。

圖4 藥材CH-5-2中柴胡皂苷b2含量測(cè)定HPLC圖譜Fig.4 HPLC chromatogram of saikosaponin b2in medicinal material CH-5-2

2.1.4.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線

取柴胡皂苷b2對(duì)照品溶液，精密吸取1.0、2.5、5.0、10.0、15.0、20.0 μL，按 2.1.1 項(xiàng)色譜條件進(jìn)行HPLC分析，以進(jìn)樣量（μg）為橫坐標(biāo)，峰面積值（A）為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程:A=75.6C－8.90，R2=1。結(jié)果表明柴胡皂苷b2在0.067 8～1.36 μg范圍內(nèi)，進(jìn)樣量與峰面積之間線性關(guān)系良好。

2.1.4.4 精密度

取對(duì)照品溶液，在2.1.1項(xiàng)色譜條件下進(jìn)行測(cè)定，連續(xù)進(jìn)樣5次，記錄柴胡皂苷b2的峰面積，并計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，RSD為0.69%。

2.1.4.5 重復(fù)性

取樣品CH-5-1，5份，每份0.1 g，精密稱定，照供試品溶液制備方法分別制成供試品溶液，按2.1.1項(xiàng)色譜條件測(cè)定，記錄柴胡皂苷b2的峰面積，計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，RSD為0.49%。

2.1.4.6 穩(wěn)定性

取樣品CH-5-1，0.1 g，精密稱定，照供試品溶液制備方法制成供試品溶液，按2.1.1項(xiàng)色譜條件分別于0、2、4、6、8 h 測(cè)定，記錄柴胡皂苷 b2的峰面積，計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，RSD為1.7%，表明樣品在8 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.1.4.7 加樣回收率

取6份已知含量的同一批柴胡樣品CH-5-1，各0.05 g，精密稱定，分別加入對(duì)照品溶液0.067 8 mg/mL，3.7、5、6 mL，按供試品溶液制備方法制備樣品試液，按2.1.1項(xiàng)色譜條件進(jìn)樣分析，記錄柴胡皂苷b2的峰面積并計(jì)算其含量，平均加樣回收率為97.4%，RSD為2.6%。

2.2 柴胡皂苷a、c、d的含量測(cè)定

2.2.1 分析條件

色譜柱、流動(dòng)相、流速和柱溫條件參考2.1.1項(xiàng);檢測(cè)波長(zhǎng):204 nm。

2.2.2 對(duì)照品溶液的制備

柴胡皂苷a、c、d均為實(shí)驗(yàn)室自制。分別取柴胡皂苷a、c、d對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成濃度分別為 0.216、1.44、0.278 mg/mL的溶液，即得。分別取柴胡皂苷 a、c、d，0.8、0.09、1 mL 于 2 mL 量瓶中，用甲醇定容，得到混合對(duì)照品溶液Ⅰ，取混合對(duì)照品溶液Ⅰ0.5 mL于1 mL量瓶中，用甲醇定容，得到混合對(duì)照品溶液Ⅱ。即每1 mL混合對(duì)照品溶液Ⅱ中分別含柴胡皂苷 a、c、d為 0.008 64 mg、0.006 48 mg、0.013 9 mg。

2.2.3 供試品溶液的制備

取柴胡藥材0.1 g于茄形瓶中，精密稱定，分別加入20 mL 5%氨水-甲醇溶液于80℃水浴回流2 h，將濾液過濾蒸干，精密加入10 mL甲醇溶液定容，即為供試品溶液。

2.2.4 含量測(cè)定

取不同批次的柴胡樣品，按供試品溶液制備方法操作并按2.2.1項(xiàng)色譜條件進(jìn)行HPLC分析，記錄柴胡皂苷a、c、d的峰面積，計(jì)算含量，結(jié)果見表4，圖5～8。

表4 不同批次柴胡中柴胡皂苷a、c、d的含量Tab.4 Content determination of saikosaponin a、c、d of various samples

圖5 對(duì)照品柴胡皂苷c、d、a HPLC圖譜Fig.5 HPLC chromatogram of saikosaponin c、d、a reference substance

結(jié)果顯示柴胡皂苷a+c+d的含量在炮制后含量略微有所減少，減少的程度從－0.375%～25.2%。表明原生皂苷在酸的條件下轉(zhuǎn)化為次生皂苷，次生皂苷b2的含量有所增加，而原生皂苷柴胡皂苷a+c+d的含量有所減少。

2.2.5 方法學(xué)考察

2.2.5.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線

取柴胡皂苷混合對(duì)照品溶液Ⅱ，精密吸取2.5、5.0、10.0、15.0、20.0 μL，按 2.2.1 項(xiàng)色譜條件進(jìn)行HPLC分析，以進(jìn)樣量（μL）為橫坐標(biāo)，峰面積值（A）為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程，結(jié)果見表5，表明柴胡皂苷 a、c、d 分別在0.216 ～1.73 μg、0.162～1.30 μg、0.350 ～2.78 μg 范圍內(nèi)，進(jìn)樣量與峰面積之間線性關(guān)系良好，符合外標(biāo)法定量測(cè)定要求。

2.2.5.2 精密度

圖6 藥材CH-5中柴胡皂苷c、d、a含量測(cè)定HPLC圖譜Fig.6 HPLC chromatogram of saikosaponin c、d、a in medicinal material CH-5

圖7 藥材CH-5-1中柴胡皂苷c、d、a含量測(cè)定HPLC圖譜Fig.7 HPLC chromatogram of saikosaponin c、d、a in medicinal material CH-5-1

圖8 藥材CH-5-2中柴胡皂苷c、d、a含量測(cè)定HPLC圖譜Fig.8 HPLC chromatogram of saikosaponin c、d、a in medicinal material CH-5-2

表5 柴胡皂苷a，c，d的線性關(guān)系測(cè)定結(jié)果

Tab.5 Results of linear ranges of saikosaponin a、c、d

指標(biāo)成分 回歸方程 R2 線性范圍/μg+3.24 0.999 0.216～1.73柴胡皂苷c Y=20.4X+0.233 0.999 0.162～1.30柴胡皂苷d Y=57.0X柴胡皂苷a Y=46.2X+8.22 0.999 0.350～2.78

取柴胡皂苷混合對(duì)照品溶液Ⅱ，在2.2.1項(xiàng)色譜條件下進(jìn)行HPLC分析，連續(xù)進(jìn)樣5次，記錄柴胡皂苷a、c、d的峰面積并計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，柴胡皂苷 a、c、d 的 RSD 分別為0.36%、0.63%、0.29%，表明色譜系統(tǒng)精密度符合要求。

2.2.5.3 重復(fù)性

取樣品CH-5-2，5份，每份0.1 g，精密稱量，按照供試品溶液制備方法分別制成供試品溶液，按2.2.1項(xiàng)色譜條件測(cè)定，記錄柴胡皂苷a、c、d的峰面積，計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，柴胡皂苷a、c、d的RSD分別為2.0%、1.8%、1.9%，表明方法的重復(fù)性較好。

2.2.5.4 穩(wěn)定性

取樣品CH-5-2，0.1 g，精密稱量，照供試品溶液制備方法分別制成供試品溶液，按2.2.1項(xiàng)色譜條件分別于 0、2、4、6、8 h 測(cè)定，記錄柴胡皂苷 a、c、d的峰面積，計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，柴胡皂苷a、c、d的RSD分別為0.85%、2.1%、1.9%，表明方法的穩(wěn)定性較好。

2.2.5.5 加樣回收率

取5份同一批柴胡樣品 CH-5-2，各0.05 g，精密稱量，分別加入混合對(duì)照品溶液（Ca=0.53 mg/mL，Cc=0.098 mg/mL，Cd=0.60 mg/mL）0.65 mL、0.75 mL、0.85 mL，按供試品溶液制備方法制備樣品試液，按2.2.1項(xiàng)色譜條件進(jìn)行測(cè)定，記錄柴胡皂苷a、c、d的峰面積，計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，柴胡皂苷a、c、d的平均加樣回收率為 94.0%、95.6%、98.9%，RSD分別為2.7%、3.2%、2.3%。

2.3 皂化后皂苷的含量測(cè)定

2.3.1 皂化方法的比較

結(jié)合文獻(xiàn)報(bào)道的兩種皂苷皂化的方法［4，5］，采用以下方法進(jìn)行了比較。

2.3.1.1 皂化方法Ⅰ

取柴胡藥材約0.1 g，精密稱量，置于茄形瓶中，加5%氫氧化鉀甲醇20 mL液浸漬過夜，加熱回流5 h，提取液蒸干，加水30 mL，正丁醇溶液萃取（30 mL，30 mL，30 mL），合并萃取液加1%磷酸二氫鉀溶液50 mL洗滌，棄水相，再以40 mL水洗滌1次，有機(jī)相蒸干，精密加入10 mL甲醇定容。用2.1.1項(xiàng)、2.2.1項(xiàng)的分析條件進(jìn)行分析，得到如表6結(jié)果:

表6 皂化反應(yīng)的選擇Tab.6 Selection of saponated action

2.3.1.2 皂化方法Ⅱ

藥材粉末1.0 g，用90%甲醇提取3次，每次15 min，溶劑量分別為 20 mL，15 mL，15 mL，合并 3 次濾液，用90%甲醇定容到50 mL，取其中的5 mL，加入氫氧化鈉溶液2.5 mL于50℃水浴回流1 h，然后加入磷酸二氫鉀-氫氧化鈉緩沖溶液（100 mL 0.2 mol/L磷酸二氫鉀和69.5 mL 0.2 mol/L氫氧化鈉混合）7.5 mL，混合液過減壓ODS柱，先用35%甲醇洗脫10 mL，再用甲醇洗脫，收集甲醇洗脫液10 mL。

藥材粉末0.1 g，用90%甲醇提取3次，每次15 min，溶劑量分別為 2 mL，1.5 mL，1.5 mL，合并3 次濾液，用90%甲醇定容到5 mL，加入氫氧化鈉溶液0.25 mL于50℃水浴回流1 h，然后加入磷酸二氫鉀-氫氧化鈉緩沖溶液（100 mL 0.2 mol/L磷酸二氫鉀和69.5 mL 0.2 mol/L氫氧化鈉混合）0.75 mL，混合液過減壓ODS柱，先用35%甲醇洗脫10 mL，再用甲醇洗脫，收集甲醇洗脫液10 mL。用2.1.1項(xiàng)、2.2.1項(xiàng)的分析條件進(jìn)行分析，得到如表7結(jié)果:

表7 皂化方法Ⅱ的結(jié)果Tab.7 Results of saponated actionⅡ

2.3.1.3 皂化方法Ⅱ的改進(jìn)方法

藥材粉末0.1 g，用90%甲醇提取3次，每次15 min，溶劑量分別為 2 mL，1.5 mL，1.5 mL，合并3 次濾液，用90%甲醇定容到5 mL，加入氫氧化鈉溶液0.25 mL于50℃水浴回流1 h，提取液蒸干，加水30 mL，正丁醇溶液萃取（30 mL，30 mL，30 mL），合并萃取液加1%磷酸二氫鉀溶液50 mL洗滌，棄水相，再以40 mL水洗滌1次，有機(jī)相蒸干，精密加入10 mL甲醇定容。用2.1.1項(xiàng)、2.2.1項(xiàng)的分析條件進(jìn)行分析，得到如表8結(jié)果:

對(duì)比以上3種方法，皂化方法Ⅱ以及皂化方法Ⅱ的改進(jìn)方法都不能將柴胡中的皂苷完全的皂化，而皂化方法Ⅰ所得到的結(jié)果較為理想，所以選擇皂化方法Ⅰ為實(shí)驗(yàn)方法。

表8 皂化方法Ⅱ改進(jìn)方法的結(jié)果Tab.8 Results of improved saponated actionⅡ

2.3.2 供試品溶液的制備

精密稱取柴胡藥材約0.1 g，置于茄形瓶中，加5%氫氧化鉀甲醇20 mL液浸漬過夜，加熱回流5 h，提取液蒸干，加水30 mL，正丁醇溶液萃取（30 mL，30 mL，30 mL），合并萃取液加1%磷酸二氫鉀溶液50 mL洗滌，棄水相，再以40 mL水洗滌1次，有機(jī)相蒸干，加甲醇溶解，定容10 mL，即為供試品溶液。

2.3.3 對(duì)照品溶液的制備

見2.1.4.1項(xiàng)，2.2.2項(xiàng)。

2.3.4 含量測(cè)定

將柴胡的各個(gè)批次的藥材制備成供試品，按照2.1.1項(xiàng)、2.2.1項(xiàng)分析條件進(jìn)行分析，結(jié)果見表9。

2.3.5 皂化反應(yīng)前后總皂苷的含量測(cè)定，分析方法參考文獻(xiàn)［6，7］，方法學(xué)考察略。

皂化反應(yīng)后，柴胡皂苷a、c、d以及a+c+d的含量在皂化反應(yīng)前后變化幅度不大，但是柴胡皂苷b2的含量卻大幅增加，增加了185%，而總皂苷的含量在皂化后卻有所減少，減少了17.2%;醋炙柴胡、醋拌柴胡，在皂化反應(yīng)后柴胡皂苷a、c、d以及a+c+d的含量變化并不大，大部分都有所減少，柴胡皂苷b2的含量幾乎都有所增加，增加的幅度從24.6%～95.9%不等。總皂苷的含量也是增減不一，說明炮制品總皂苷的含量在皂化反應(yīng)后無明顯變化;對(duì)照藥材，在皂化反應(yīng)后，柴胡皂苷a+c+d的含量略微有所減少，但是柴胡皂苷b2的含量卻大幅的增加，增加了117%，而總皂苷的含量在皂化反應(yīng)后卻有所減少，減少了49.9%;對(duì)照藥材的炮制品醋拌柴胡，柴胡皂苷a、c、d以及a+c+d的含量在皂化反應(yīng)后大幅度的減少，減少了72.2%，柴胡皂苷b2的含量也大幅度減少，減少了71.5%，總皂苷的含量也減少了30.4%。見表10。

3 討論與結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)首次采用皂化反應(yīng)測(cè)定柴胡炮制前后皂苷的含量變化，前人研究表明柴胡含有大量的乙酰化皂苷成分［8］，僅以柴胡皂苷 a、c、d、b2、b1作為對(duì)照，其結(jié)果有一定偏差，不能完全代表藥材的實(shí)際含量，通過皂化反應(yīng)去乙酰化后，分析結(jié)果較全面。在文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上確定柴胡皂化反應(yīng)方法，該法操作簡(jiǎn)單、重現(xiàn)性好、精密度良好，可以用于柴胡及其炮制品的皂苷成分含量分析。

通過結(jié)果說明，炮制后，總皂苷的含量都有所下降，柴胡皂苷b2的含量都大幅增加，柴胡皂苷a、c、d以及a+c+d的含量并沒有什么變化。說明柴胡中的原生皂苷柴胡皂苷a、c、d在植物中的酸性成分條件下轉(zhuǎn)化為次生苷柴胡皂苷b2、b1時(shí)，接近一半的柴胡皂苷b2、b1上面的羥基被乙酰化，而皂化反應(yīng)后，乙酰基脫去，又重新轉(zhuǎn)化為柴胡皂苷b2，所以含量大幅增加。而柴胡的炮制品中，可能被乙酰化的柴胡皂苷b2部分被去乙酰化，但并不完全，所以柴胡皂苷b2增加的幅度并沒有柴胡大。以上的研究初步揭示了柴胡炮制后皂苷類化合物變化規(guī)律，為柴胡飲片的炮制及質(zhì)控提供較為全面的參考。

柴胡炮制前后化學(xué)成分的比較分析，顯示醋炙、醋拌這兩種炮制工藝對(duì)柴胡總皂苷的含量變化沒有顯著影響，醋炙、醋拌是否可以通用，還需對(duì)其炮制后化學(xué)成分組成及其量比關(guān)系的變化進(jìn)一步研究。

表9 柴胡各個(gè)樣品皂化后皂苷的含量Tab.9 Results of saponated action

表10 柴胡各個(gè)樣品皂化后總皂苷的含量Tab.10 Content of total saponins after saponated action

［1］中國(guó)藥典［S］.一部.2005:198.

［2］葉定江，原思通.中藥炮制學(xué)辭典［M］.上海:上海科學(xué)技術(shù)出版社，2005:295-296.

［3］劉 偉，黃國(guó)理.柴胡的不同炮制方法對(duì)其有效成分影響的研究［J］.中藥材，2005，18（1）:21-23.

［4］李玲玲，張水龍.黃芪中有效成分環(huán)黃芪醇皂甙和黃芪甲甙的含量測(cè)定［J］.中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)，1998，15（3）:13-15.

［5］Suzuki H，Yokota Y，Terasaki S，et al.Component Determination of Total Saponins in Bupleurum Root by High-performance Liquid Chromatography［J］.Nat Med，2004，58（4）:138-144.

［6］浦錦寶，胡軼娟，佘 靖，等.紫外可見分光光度法測(cè)定柴胡中柴胡總皂苷的含量［J］.醫(yī)學(xué)研究雜志，2008，37（6）:98-100.

［7］鄭虎占，董澤宏，佘 靖.中藥現(xiàn)代研究與應(yīng)用（第四卷）［M］.北京:學(xué)苑出版社，1998:3688-3689.

［8］劉沁舡，譚 利，白焱晶，等.柴胡屬植物皂苷近10年研究概況［J］.中國(guó)中藥雜志，2002，27（1）:7-11.