癌癥患者血漿PAI-1濃度變化

王 宇,肖英紅,何成彥,王 楠,馮學(xué)超*

(1.東北師范大學(xué)膜通道實(shí)驗(yàn)室吉林長(zhǎng)春130024;2.吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院,吉林長(zhǎng)春130033)

纖溶酶原激活物抑制劑-1(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)是組織型纖溶酶原激活物(tissuetype plasminogen activator,tPA)和尿激酶型纖溶酶原激活物(urokinase-type plasminogen activator,uPA)主要的抑制因子,是纖溶酶原活化系統(tǒng)(plasminogen activator system,PAs)的特異、快速的抑制物[1]。PAI-1具有多種生物學(xué)功能,參與細(xì)胞的遷移、黏附及侵襲過(guò)程,有研究在細(xì)胞水平及小鼠體內(nèi)均證明PAI-1與腫瘤尤其是惡性腫瘤的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移等生物學(xué)行為密切相關(guān):在胃癌及直腸癌組織中PAI-1的濃度明顯高于癌旁及正常組織[2];PAI-1抗原水平在原發(fā)及轉(zhuǎn)移乳腺癌患者中明顯高于良性腫瘤患者且當(dāng)PAI-1濃度到一定水平時(shí),癌癥患者臨床復(fù)發(fā)和死亡機(jī)率均明顯升高[3];頭頸鱗狀細(xì)胞癌患者血清中PAI-1濃度顯著高于正常人群[4],另外,Eva Angenete等證明腫瘤轉(zhuǎn)移患者血漿中PAI-1濃度也顯著升高,因此,我們推測(cè)血漿中PAI-1的濃度變化在腫瘤的診斷中具有重要意義,PAI-1可能成為腫瘤尤其是惡性腫瘤治療理想靶標(biāo)。

本研究擬在以上研究基礎(chǔ)上,測(cè)定多種惡性腫瘤患者血漿中PAI-1的濃度變化情況,進(jìn)一步證明其濃度變化在腫瘤尤其是惡性診斷中的價(jià)值以及以PAI-1為靶位腫瘤治療的可能性。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)樣本及預(yù)處理 在當(dāng)事人知情下收集乳腺癌、肺癌及喉癌患者和正常人血液標(biāo)本各40份,男女各半。標(biāo)本采集及處理方法:空腹靜脈抽取血液5ml于抗凝采血管中,37℃靜止10分鐘,2 000 r/min離心10分鐘,抽取收集上層液(血漿,盡可能去除血小板),于-80℃保存,等樣本收集完畢,一并用于PAI-1濃度測(cè)定。

1.2 實(shí)驗(yàn)分組 乳腺癌組:40例,男女各20例,平均年齡56.6±9.5歲。肺癌組:40例,男女各20例,平均年齡58.4±6.9歲。喉癌組:40例,男女各20例,平均年齡57.4±7.9歲。正常對(duì)照組:40例,男女各20例,平均年齡58.1±5.9歲。

1.3 主要儀器及試劑 multiskan ascent多功能酶標(biāo)儀(Thermo,美國(guó)),人纖溶酶原激活劑物抑制因子PAI-1ELISA檢測(cè)試劑盒(R&D SYSTEMS,美國(guó))

1.4 實(shí)驗(yàn)方法 本研究利用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)測(cè)定血漿中PAI-1濃度,首先采用試劑盒提供的方法建立PAI-1濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)確定樣本血漿中PAI-1濃度,具體實(shí)驗(yàn)步驟按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)處理 采用curveExpert 1.3建立標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,癌癥組與正常組間比較采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示:與正常對(duì)照組(9.84±4.66 ng/ml)相比,乳腺癌(21.49±10.54 ng/ml),肺癌(15.10±8.55 ng/ml),喉癌(14.03±7.14 ng/ml)患者血漿中PAI-1含量均明顯升高(P＜0.05),其中乳腺癌組差異極為顯著(P＜0.01)(表1)。

表1 癌癥患者血漿PAI-1水平比較(±s)

表1 癌癥患者血漿PAI-1水平比較(±s)

與對(duì)照組比較,**P＜0.01,*P＜0.05

組別 例數(shù) PAI-1(ng/ml)P值乳腺癌組 40 21.49±10.54 0.000 032**肺癌組 40 15.10±8.55 0.02*喉癌組 40 14.03±7.14 0.045*正常對(duì)照組 40 9.84±4.66

3 討論

PAI-1變化與腫瘤發(fā)生、發(fā)展、浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移之間關(guān)系是PAI-1生物學(xué)功能研究領(lǐng)域廣為關(guān)注的熱點(diǎn)問(wèn)題之一,本研究發(fā)現(xiàn)乳腺癌、肺癌及喉癌患者血漿PAI-1濃度明顯高于正常對(duì)照組,結(jié)果與以往的研究相類(lèi)似,進(jìn)一步說(shuō)明血漿PAI-1濃度變化在腫瘤診斷及治療的潛在價(jià)值。由于表達(dá)PAI-1除腫瘤細(xì)胞外,還包括肝細(xì)胞、肌纖維母細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、白細(xì)胞等正常細(xì)胞,近來(lái)研究還證明PAI-1濃度升高可能與炎癥、冠心病、動(dòng)脈硬化等疾病有密切關(guān)系,另外PAI-1發(fā)揮生物學(xué)功能還與其濃度高低有直接關(guān)系[5,6,7],所以,血漿中PAI-1濃度變化只能作為腫瘤診斷輔助指標(biāo)之一,還需參考其他指標(biāo)對(duì)患者進(jìn)行綜合診斷。

纖溶系統(tǒng)在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移等復(fù)雜過(guò)程起重要作用,纖溶系統(tǒng)中的纖溶酶可直接降解細(xì)胞外間質(zhì)使瘤細(xì)胞向周?chē)g,其還可激活膠原酶及間質(zhì)溶酶使腫瘤細(xì)胞能穿過(guò)血管壁的基底膜進(jìn)入血管內(nèi),實(shí)現(xiàn)腫瘤的轉(zhuǎn)移。抑制纖溶系統(tǒng)可有效抑制腫瘤生長(zhǎng)、浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移[8]。而腫瘤患者血漿中PAI-1濃度較正常人群升高的事實(shí)說(shuō)明,PAI-1在通過(guò)非酶解統(tǒng)途徑參與腫瘤生物學(xué)過(guò)程。事實(shí)上,有研究證明PAI-1主要是通過(guò)與細(xì)胞表面分子相互作用而實(shí)現(xiàn)其生物學(xué)功能的[9,10]。

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