利血康的活血和止血作用研究*

鄺荔香 ，宮 傳 ，朱 紅 ，吳櫻櫻 ，楊 雁 ，陳敏珠

（1.安徽醫科大學臨床藥理研究所，安徽 合肥 230032； 2.安徽醫科大學藥理學研究生，安徽 合肥 230032）

原發性血小板減少性紫癜（ITP）是以出血和血小板減少為主要表現的一組免疫性疾病，利血康制劑可通過調節體液免疫功能抑制血小板相關抗體的升高等而對其產生肯定的防治作用[1]，臨床應用多年療效良好。現對利血康的治療機制作進一步研究。

1 試藥與動物

利血康浸膏（合肥恒星藥物研究所提供，批號為200311120，每克干浸膏含4 g總生藥）；血康口服液（江西天獅中藥集團貴溪制藥廠，批號為20030915，10 mL/支，作為陽性對照藥）。Ⅰ型膠原蛋白（Sigam公司）；鹽酸腎上腺素溶液1 g/L（上海禾豐藥業有限公司）；注射用環磷酰胺（200 mg/瓶，上海華聯藥業有限公司）。

昆明種小鼠，體重18～22 g，雌雄各半；純種白色雌性豚鼠，體重250～300 g；新西蘭種大耳白兔，體重2.5～3 kg，雌雄各半。均由安徽醫科大學動物中心提供。

2 方法與結果

2.1 對膠原蛋白-腎上腺素致小鼠體內血栓形成的影響[2-3]

取小鼠50只，雌雄各半，隨機均分成5組，即模型對照組，利血康高、中、低3個劑量組，血康口服液組（5 mL/kg），每組分別灌胃給藥，模型對照組予相同體積的蒸餾水，每日1次，連續5 d。于末次給藥后1.5 h，每鼠尾靜脈注射膠原蛋白（225 μg/只）-腎上腺素（9 μg/只）混合液0.2 mL，立即觀察小鼠 5 min內死亡數和15 min內偏癱數，計算有效率（即對血栓形成的保護率），進行卡方檢驗，比較各組有效率的差異。結果見表1。可見，高、中劑量利血康和血康口服液均能明顯抑制膠原蛋白-腎上腺素誘導的小鼠體內血栓形成，表明利血康有明顯的活血作用。

表1 利血康對膠原蛋白-腎上腺素誘發小鼠體內血栓形成的影響（X ± s，n=10）

2.2 對環磷酰胺致血小板減少癥小鼠血小板數和出血時間的影響[4]

取小鼠60只，雌雄各半，隨機均分成6組，即正常對照組，模型對照組，利血康高、中、低3個劑量組，血康口服液組（5 mL/kg），每組分別灌胃給藥，正常對照組和模型對照組予等容量蒸餾水，每日1次，連續10 d。除正常對照組外，其余各組于給藥第6天和第7天，腹腔注射環磷酰胺100 mg/kg，第8天和第9天腹腔注射環磷酰胺120 mg/kg，對照組腹腔注射等容量生理鹽水。第10天給藥1.5 h后，用斷尾法測定出血時間。隨后摘除眼球，取血20 μL加入0.38 mL血小板稀釋液中，搖勻，再加入0.8 mL血小板稀釋液，計數血小板。結果見表2。可見，環磷酰胺使小鼠的血小板數明顯降低、出血時間明顯延長，3種劑量的利血康和血康口服液均能拮抗環磷酰胺所致小鼠血小板減少和出血時間的延長，提示利血康能提高血小板功效和具有止血作用。

2.3 對免疫性血小板減少癥家兔凝血時間的影響[1]

制備和提純豚鼠抗兔血小板血清[5-6]。取家兔48只，雌雄各半，隨機均分成6組，即正常對照組，模型對照組，血康口服液組（1.4 mL/kg），利血康高、中、低3個劑量組。先灌胃給藥3 d，正常對照組和模型對照組灌胃蒸餾水，第4天除正常對照組外，每兔于耳緣靜脈注射豚鼠抗兔血小板血清2.5 mL造模，正常對照組注射等量生理鹽水，繼續灌胃給藥5 d，正常對照組和模型對照組灌胃等量蒸餾水。測定給藥前、注射豚鼠抗兔血小板血清造模90 min和第5天的凝血時間。結果見表3。可見，家兔靜脈注射豚鼠抗兔血小板血清后90 min，凝血時間明顯延長，高、中劑量利血康和血康口服液均能明顯拮抗凝血時間的延長，表明利血康有促凝血作用。注射該血清5 d后，各組的凝血時間基本恢復正常。

表2 利血康對環磷酰胺致血小板減少癥小鼠血小板數和出血時間的影響（X ± s，n=10）

表3 利血康對免疫性血小板減少癥家兔凝血時間的影響（X ± s，n=8）

3 討論

膠原蛋白-腎上腺素誘導的小鼠體內血栓模型是形成急性血栓的肯定模型[2-3]。利血康制劑由三七、白芨、藕節和血余炭等組成，其高、中劑量能明顯抑制該模型小鼠體內血栓的形成，表明利血康有明顯的活血化瘀作用。試驗中還發現，溫度等天氣條件對該模型成功率有明顯影響，可能是氣溫影響了血管的柔韌性和血液的黏稠度，從而影響血栓的形成。高血壓所致并發癥的發病率秋冬季節通常明顯高于春夏季節，已說明氣候條件對心血管功能是有一定影響的。筆者認為此模型實驗應選擇在春季進行較適宜。

3個劑量的利血康均能明顯對抗環磷酰胺所致小鼠血小板減少，高劑量能明顯縮短環磷酰胺致小鼠出血時間的延長，高、中劑量還能明顯對抗免疫性血小板減少癥家兔凝血時間的延長，表明利血康對化學性和免疫性致出血時間與凝血時間延長的兩種模型均有改善作用。利血康藥效學研究也表明其有促血小板生成的功效[1]。提示利血康可能通過促血小板生成改善了促凝血功能，從而產生止血作用。

[1]鄺荔香，周 明，朱 紅，等.利血康治療免疫性血小板減少癥的藥效學研究[J]. 安徽中醫學院學報，2008，27（6）：45-47.

[2]向茜蓮，程 睿，張路晗.血竭的活血與止血作用研究[J].華西藥學雜志，2000，15（6）：430-431，434.

[3]陳 奇，鄧文龍，孫瑞元，等.中藥藥理研究方法[M].北京：人民衛生出版社，1996：579.

[4]王安行，朱家谷.血康膠囊升血小板和白細胞作用的實驗研究[J].浙江中西醫結合雜志，1998，8（3）：144-145.

[5]鄺荔香，陳敏珠.藥理學動物實驗插管扎口方式與固定效果探討[J].安徽醫藥，2007，11（3）：278.

[6]李 華，宮 傳，鄺荔香.血康口服液對家兔免疫性血小板減少癥的治療作用[J]. 安徽衛生職業技術學院學報，2003，2（3）：53-54.