高效液相色譜法測定礞石滾痰片中黃芩苷含量

李 卿 ，陳志新 ，秦 劍 ，肖銘玉

（1.重慶市中藥研究院，重慶 400065； 2.中國人民解放軍第6905工廠職工醫(yī)院，重慶 400712）

礞石滾痰片是由金礞石、沉香、熟大黃等提取制成的中藥制劑，具降火逐痰功效。為有效控制產(chǎn)品質(zhì)量，筆者采用高效液相色譜（HPLC）法測定制劑中黃芩苷的含量，報道如下。

1 儀器與試藥

Waters 2695/2996型高效液相色譜儀。黃芩苷對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號為110715-200514）；水為純化水，甲醇為色譜純；其余試劑均為分析純；礞石滾痰片（市售品，批號分別為081001，081002，081003，081101，081102）。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：DiamonsilTM（鉆石）C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相：甲醇 -0.2% 磷酸溶液（47 ∶53）；流速：1.0 mL/min；檢測波長：280 nm；進(jìn)樣量:10 μL。理論塔板數(shù)以黃芩苷計算不低于3 000。

2.2 溶液制備

精密稱取黃芩苷對照品適量，加甲醇制成每1 mL含0.092 mg的溶液，作為對照品溶液。取樣品10片，研細(xì)，取約0.1 g，精密稱定，置100 mL量瓶中，加甲醇適量，超聲處理30 min，放冷至室溫，加甲醇至刻度，搖勻，用0.45 μm濾膜濾過，取續(xù)濾液即得供試品溶液。按礞石滾痰片制備工藝制備缺黃芩的陰性樣品，同法制成陰性對照品溶液。

2.3 方法學(xué)考察

專屬性考察：取2.2項下3種溶液，分別注入液相色譜儀。供試品溶液色譜圖中，在與對照品溶液色譜圖相應(yīng)位置上有一相同色譜峰，陰性對照品溶液則無此峰，表明陰性無干擾（圖1）。

線性關(guān)系考察：精密吸取對照品溶液 2，4，8，16，30 μL，注入液相色譜儀，以進(jìn)樣量（μg）為橫坐標(biāo)、峰面積為縱坐標(biāo)（Y）進(jìn)行回歸分析。得回歸方程 Y=3 149 527X-187 479.1，r=0.999 9（n=5）。結(jié)果表明黃芩苷進(jìn)樣量在0.184～2.760 μg范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。

精密度試驗：精密吸取對照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣測定。結(jié)果黃芩苷峰面積的 RSD為0.4%（n=5）。

穩(wěn)定性試驗：取同一供試品溶液，分別于0，2，4，10，12 h時進(jìn)樣。結(jié)果黃芩苷峰面積的 RSD為0.8%（n=5），表明溶液穩(wěn)定性良好。

重現(xiàn)性試驗：取同一批樣品6份，依法測定。結(jié)果黃芩苷平均含量為21.34 mg/片，RSD 為1.12% （n=6）。

加樣回收試驗：取已知含量的樣品6份，分別加入黃芩苷對照品，按供試品溶液制備方法制備溶液并測定含量，計算回收率。結(jié)果見表1。

表1 黃芩苷加樣回收試驗結(jié)果（n=6）

2.4 樣品含量測定

取 5批樣品，依法測定。結(jié)果批號為 081001，081002，081003，081101，081102 的樣品中黃芩苷含量分別為 22.14，23.26，22.85，23.04，21.92 mg/片。

3 討論

[1]選用甲醇-磷酸溶液作為流動相，經(jīng)多次試驗，以甲醇-0.2%磷酸溶液（47∶53）為流動相能使樣品中黃芩苷峰與相鄰色譜峰達(dá)到基線分離。在此色譜條件下，黃芩苷與相鄰色譜峰分離良好，峰形對稱，陰性對照無干擾，故本方法可用于礞石滾痰片的質(zhì)量控制。

參考文獻(xiàn)：

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（一部）[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：117.