近三年來吉林省九臺市臨床葡萄球菌的耐藥性分析

于麗莉 王艾琳 李堅

葡萄球菌是醫院感染的重要病原菌之一,其中以耐甲氧西林葡萄球菌尤為嚴重。隨著抗菌藥物種類的不斷增加及臨床的廣泛使用,耐甲氧西林葡萄球菌的感染日漸增多,常常導致治療失敗、感染復發、延長住院日、增加昂貴抗生素的使用等。為了解九臺市部分醫院的葡萄球菌感染及耐藥狀況,我們收集了從九臺市人民醫院及九臺市中醫院臨床各類標本中分離的 158株葡萄球菌,對其耐藥性進行了分析。

1 材料和方法

1.1 菌株來源 收集 2008年 6月至 2010年 5月間九臺市人民醫院臨床各類標本 158株,其中呼吸道標本 55株、尿 34株、分泌物 30株、糞便 9株、血液 12株、其他標本 18株。

標準質控菌株為金黃色葡萄球菌 ATCC25923和大腸埃希菌 ATCC25922,苯唑西林敏感對照菌為金黃色葡萄球菌ATCC29213,苯唑西林耐藥對照菌株為金黃色葡萄球菌ATCC38591[1],均購自國家衛生部臨床檢驗中心。

1.2 抗菌藥物 苯唑西林等16種抗生素紙片均購自浙江軍區后勤部衛生防疫檢驗所。

1.3 培養基 MH瓊脂培養基購于中國藥品生物制品檢定所。

1.4 β-內酰胺酶測定紙片 由大連輝瑞制藥有限公司提供。

1.5 方法

1.5.1 按常規方法培養分離和鑒定葡萄球菌,并做血漿凝固酶試驗。

1.5.2 藥敏實驗 K-B法,按美國臨床實驗室標準化委員會(NCCLs)標準進行。

1.5.3 MRSA檢測[2]將藥敏試驗中耐苯唑西林(1μg/m l,≤10為耐藥,≥13為敏感)的菌株做適度稀釋,調整菌量為0.5麥氏單位,接種于含 6μg/m l苯唑西林,4%NaCl的 MH培養基上,經 35℃培養 24 h,生長者為 MRSA。

1.5.4 β-內酰胺酶檢測[3]按β-內酰胺酶測定紙片的說明對凝固酶陽性的葡萄球菌進行操作和結果判定。

2 結果

2.1 凝固酶試驗及耐藥性檢測結果見表1。

158株葡萄球菌中,金黃色葡萄球菌 87株,凝固酶陰性葡萄球菌 71株。MRS 106株,檢出率為 67.1%,其中 MRSA為 38.0%,MRSCoN為 29.1%,。

表1 凝固酶試驗及MRS檢測結果

2.2 158株葡萄球菌對 16種抗菌藥的抗菌譜見表 2。

表2 158株葡萄球菌對 16種抗菌藥的耐藥率(%)

萬古霉素對 106株耐藥葡萄球菌有良好的抗菌活性,僅有 10.0%的 MRSA和 13.0%的 MRSCON對泰能耐藥,MRSA、MRSCON對頭孢菌素類、氟喹諾酮類抗菌藥物的耐藥性明顯增加,大多數抗菌藥物尤其是頭孢菌素類對 MSSA作用較好,而MSSA對紅霉素、青霉素、克林霉素的耐藥率分別為59.3%、92.6%、55.6%。葡萄球菌對復方新諾明的耐藥性在70.4%～93.5%。詳見表 2。

2.3 β-內酰胺酶檢測結果 受試菌產酶株占 80.4%,其中MRSA產酶株占 85.7%,MSSA產酶株占 75.4%,二者無統計學差異。

3 討論

3.1 158株葡萄球菌中,MRS葡萄球菌的檢出率高達67.1%,其中 MRSA的平均耐藥率為 69.0%,顯著高于MSSA 31.0%的耐藥率,并且呈現多重耐藥性;對 β-內酰胺類、大環內酯類、喹諾酮類、磺胺類抗菌藥及克林霉素等高度耐藥。MRSCON的耐藥率為 64.8%也明顯高于 MSSCON的耐藥率 35.2%,說明MRS葡萄球菌在我市部分醫院臨床標本中已成為重要的耐藥菌株。

3.2 目前 MRSA的臨床分離國內報道不盡相同[3],本資料MRSA占金葡菌比率為 69.0%,檢出率低于北京、上海等地,MRSA對抗菌藥物的耐藥率普遍略低于上述地區,可能與地區差異、抗生素選擇性壓力有關。

3.3 MRS對 β-內酰胺類抗菌藥耐藥性可能是由于 3種不同機制引起:1MRS產生一種新的青霉素結合蛋白(PBP-2′);2失活酶尤其是 β-內酰胺酶的產生;3細胞壁通透性降低。MRS對大環內酯類及克林霉素的耐藥性可能是由于 MRS的核糖體 23SrRNA被甲基化所致[3]。MRS對喹諾酮類和復方新諾明的耐藥機制目前還不清楚。本文報道凝固酶陽性葡萄球菌產酶率為 80.70%。而MRSA與 MSSA產酶率差別不顯著,其耐藥與產酶量、種類可能有關。

3.4 本資料顯示,158株葡萄球菌對紅霉素、復方新諾明呈高度耐藥,因此,臨床醫生在治療葡萄球菌感染的病例時,應盡量根據藥敏實驗選擇敏感藥物進行治療。值得注意的是,體外藥敏實驗時,雖然 MRS對泰能等 β-內酰胺抗菌藥表現出敏感結果,但用藥無效,應向臨床解釋。因為已知的 MRS感染的絕大多數病例對該抗菌藥治療反應很差,而且尚缺乏令人信服的臨床數據來證實這些藥物的臨床效力。

實驗結果表明,臨床上耐藥菌的感染日益嚴重,正確及時地檢出MRS并協助臨床制定抗感染方案,避免濫用抗菌藥是控制MRS進一步流行的關鍵。醫院內 MRS感染的發生與原發疾病輕重、免疫功能、長期廣譜抗菌藥物應用等多種因素有關,MRS定植或感染者常為感染源,醫護人員、醫療機械常為其傳播媒介,對MRS感染,除了強調根據藥敏試驗合理選藥外,也應依據感染部位、免疫狀況、合并癥加強綜合治療,還應重視清除定植,切斷傳播,最大可能降低感染危險。

[1］李雅卿,黃衛紅.耐甲氧西林金黃色葡萄球菌醫院感染臨床分析.中華醫院感染學雜志,2002,12(2):151.

[2］宋世平,解曉珍,席道友,等.158株金黃色葡萄球菌的耐藥性監測與分析.中華醫院感染學雜志,2003,13(4):384-385.

[3］黃加權,李小丹,楊慧,等.耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的耐藥性研究.同濟醫科大學學報,2000,29(3):264-267.