大鼠胃缺血/再灌注過程中胃電活動變化及電針的影響*

張 棟，宋曉晶，李順月，王淑友，馬惠敏

(中國中醫科學院針灸研究所針灸醫學工程實驗室，北京 100700)

胃電(EGG)活動是胃動力的基礎，作為反映胃功能的一項客觀電生理指標，能夠為臨床胃動力紊亂、功能性消化不良等研究和診斷提供檢測方法，并指導臨床治療[1]。胃臟的功能活動與其血流灌注情況密切相關[2]，缺血可以引起功能減弱，甚至組織損傷。研究表明，電針“足三里”可以增加胃缺血/再灌注過程中的胃臟血流量[3];并可使亢進的胃電節律降低[4];針刺可使胃動過緩患者胃電圖檢測主頻趨于規整[5]。然而，電針對胃缺血/再灌注過程中胃蠕動功能的作用如何尚未有明確結論?；诹私怆娽樤谖溉毖?再灌注過程中對胃電活動影響的目的，本文在以往工作的基礎上，應用我們創建的胃缺血/再灌注模型，觀察了電針干預下胃電的變化趨勢，現報道于下。

1 材料與方法

1.1 動物

健康成年 Wistar大鼠 32只，雌雄各半，體重350g±50g，由中國醫學科學院實驗動物所提供，清潔級，批號SCXK(京)2005-0013。

1.2 環境

實驗在恒溫恒濕實驗箱中進行，溫度控制在30℃ ～32℃，濕度70% ～90%，每只動物實驗前后溫度變化控制在1℃內。

1.3 大鼠胃缺血/再灌注模型的制作方法

大鼠于造模前24h斷水斷食。造模時，動物腹腔注射2%戊巴比妥鈉(2.5mg/kg)，麻醉后于劍突下沿腹中線切一縱行切口，長度約為2.5cm～3.0cm。將所需觀察臟器游離于體外，剝離附著的脂肪組織和系膜。分離胃右動脈，用動脈夾結扎，形成胃單一臟器缺血模型。再灌注時于結扎30min后松解動脈夾。

1.4 儀器和胃電活動檢測方法

在模型胃體表面距賁門、幽門各5mm處的漿膜上插入銀絲電極，連接多道生理記錄儀(時間常數為5s，高頻濾波 10Hz，靈敏度 500μV，1s/div)，與計算機聯機，用RM6240-2.0p生物信號采集處理軟件處理胃電圖，觀察分析胃電慢波幅度和頻率。胃電記錄用RM6240-C型多道生理記錄儀，電針治療使用MBT-1型微電腦電針治療儀。

1.5 分組和針刺方法

1.5.1 不電針組 14例大鼠先被觀察自然狀態(25min內)胃電慢波活動，再行觀察胃缺血30min和再灌注30min的胃電慢波活動情況，記錄慢波幅度和頻率。

1.5.2 電針組 18例大鼠先被觀察自然狀態(25min內)胃電慢波活動后，進行胃右動脈的結扎30min和松解30min的連續過程。從結扎開始的同時，使用32號針灸針對雙側“足三里”穴針刺，深度約0.5cm，行針30s后連接電針儀(強度:6V，頻率:1Hz，時間:60min)。觀察胃電慢波活動情況。

1.6 胃電波幅和頻率的分析統計方法

分別對不電針組和電針組的前對照、結扎/松解各時段的胃電波幅變化進行分析，實驗數據以均值加減標準差(Means±SD)表示。使用SPSS13.0統計軟件對2組同時段(點)的胃電波幅(μV)、頻率(CPM/min)均值進行t檢驗，比較2組間的差異。

2 結果

2.1 胃缺血過程中胃電波幅的變化

表1顯示，與前對照比較，不電針組結扎胃右動脈后胃電波幅減低。隨缺血時間的延長，減幅增大，至結扎25min時達到最大值。而電針組胃電波幅在結扎并施予電針即時有所增高，隨后波幅下降并低于前對照，至電針15min時波幅又升高。缺血各時點胃電波幅與前對照比較，電針組內無顯著性差異;不電針組在結扎25min、30min時具有統計學意義;而2組間比較，在結扎25min和30min時具有統計學意義(P<0.05)。

2.2 再灌注過程中胃電波幅的變化

表2顯示，不電針組胃電波幅在松解時對胃右動脈的結扎即刻迅速回升，松解5min、10min時胃電波幅的回升幅度又稍有降低，此后隨松解時間延長，胃電波幅持續增加。整個再灌注過程中不電針組的胃電幅度除在松解15min與前對照持平外，均低于前對照，組內統計均無顯著性差異。而電針組胃電波幅在此過程中也呈回升狀態，胃電幅度均超過前對照，并在松解5min時增加最大。再灌注各時點胃電波幅與前對照的比較，2組內均無顯著性差異。

松解過程中，不電針組和電針組胃電波幅的變化有隨胃血流灌注的恢復而增高的趨勢。

表1 胃缺血過程中胃電波幅均值的統計學分析(Means±SD，μV)

表2 胃再灌注過程中胃電波幅均值的統計學分析(Means±SD，μV)

2.3 缺血過程中胃電頻率的變化

表3顯示，與前對照比較，缺血過程中電針組和不電針對照組的胃電頻率均值都有小幅降低，各觀察時點變化不大，整個結扎過程中組內、組間均無顯著性差異。

2.4 灌注過程中胃電頻率的變化

表4顯示，再灌注過程中，不電針組胃電頻率與前對照比較，沒有明顯變化，只有小幅波動，組內統計無顯著性差異。與前對照比較，電針組在再灌注過程中胃電頻率始終增加，并于松解15min時增至最大;且在松解 5、10、15、20、25、30min 時均具有統計學意義。2組組間各時段胃電頻率變化比較，在松解10min和20min時具有統計學差異(P<0.05)。

表3 胃缺血過程中胃電頻率均值的統計學分析(Means±SD，CPM/min)

表4 胃再灌注過程中胃電頻率均值的統計學分析(Means±SD，CPM/min)

3 討論

研究表明，缺血/再灌注過程會造成機體組織器官功能改變或器質性損傷[6、7]。胃黏膜是人和動物體內最易受到損傷的組織。研究普遍認為，胃臟在缺血-再灌注情況下，由于胃黏膜內氧自由基的過量生成、細胞內鈣超載、前列腺素合成減少等多種因素造成胃黏膜組織損傷[8]，直接影響胃功能。為觀察胃臟的缺血/再灌注過程，人們建立和使用了一些模型，但多在結扎后涉及其他臟器的損傷，影響實驗結果[9、10]。針對上述不足，本實驗室用胃右動脈結扎的方法成功建立了在體胃臟缺血/再灌注模型，并首次運用激光多普勒血流灌注成像方法評價了該模型效果，以圖像的形式顯示了結扎和松解過程中血流的增減規律[11、12]，觀察到電針具有明顯增加胃臟血流的功效[3]。在以往研究基礎上，本文采用相同的動物模型，研究了此過程中胃電活動以及電針的調節作用。

3.1 胃電活動與胃血流的關系

正常狀態下，胃平滑肌的電活動包括靜息電位、慢波以及疊加在慢波上的快波。胃慢波是肌源性的活動，神經、激素都不參與慢波電活動的產生，但它們可以影響和改變胃電活動[13]。胃電圖能準確反映胃肌電慢波的節律、波幅的相對變化，在臨床和動物實驗中常將胃電慢波作為胃電節律紊亂的診斷依據并評價胃功能。本實驗觀察到從結扎即刻、胃臟缺血開始，胃電波幅出現顯著降低，持續到結扎結束;而結扎對胃電頻率影響較小，也表現為小幅減少并出現波動。松解的即刻，胃臟血流灌注量驟增(該過程以往工作中曾以直觀圖像給予了明確顯示[12])，胃電波幅和頻率也對應升高。隨胃臟血供不斷增多，胃電波幅和頻率持續在一個較高的水平上。通常血流供應為組織細胞提供營養物質，維持細胞的穩態和正常功能。而在缺血狀態下，代謝降低，病理產物堆積，組織的生理功能減弱，導致功能異常。結扎時胃臟血流灌注量減少，胃蠕動減弱;再灌注時胃臟血流量恢復，胃組織功能隨之恢復，胃蠕動增強，胃電波幅和頻率逐漸升高。上述結果說明，胃臟血液灌注量的增減能對胃電活動的強弱變化造成明顯影響。

3.2 電針對缺血/再灌注過程胃電活動的調節

針刺可以促進全身和多數臟器血液循環，這是針刺作用中比較公認的結論之一。本文在觀察單純缺血再灌注過程胃電活動的同時，設置了電針對該過程胃電活動影響的觀察，目的也是了解電針改善胃臟因缺血所引起的電活動減弱的作用。實驗中見到，電針組在整個結扎過程中，胃電波幅除個別時段稍有降低外，均明顯高于結扎前，而胃電頻率維持在相對穩定的水平。結合我們以往觀察到電針能使結扎狀態下血流灌注量增加的結果[3]，可以認為這是電針促進了缺血狀態的改善，從而改善并維持胃電活動。再灌注實驗的結果可見到，松解即時血流灌注量恢復，胃臟功能活躍，胃電波幅和頻率均增高。結果表明，電針作用促進血流量恢復，同時促使胃電活動增強。此外，無論結扎還是松解過程，電針組胃電波幅的增加始終大于不電針組，更能說明電針具有產生興奮胃電節律的效應。

許多研究表明，針灸對胃腸電活動有明顯的調整作用，這種作用在機體器官功能偏離其穩定狀態的情況下尤為明顯。本實驗觀察到，整個缺血/再灌注過程中的胃電活動及電針良性的調節作用，為探討針刺效應與胃臟功能的關系提供了一些胃腸電生理的實驗資料。作為了解電針刺激加強胃臟蠕動作用的本實驗研究，只設置了針與不針的比較，而對穴位特異性作用的觀察將在下一步工作中予以深入探討。

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