川射干的化學成分研究

楊勇勛，董小萍

川射干是鳶尾科鳶尾屬植物鳶尾Iris tectorum Maxim.的干燥根莖，為四川道地藥材。本品具有清熱解毒，消痰利咽之功效，用于咽喉腫痛，痰咳氣喘。收載于《中國藥典》2010年版一部。為尋找川射干的活性成分，闡明其藥效物質基礎，作者對該中藥材進行了系統的化學成分研究，現從95%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位，分離并鑒定出9個化合物的結構，均為已知化合物，其中Aurantiamide acetate為一個二肽化合物。現代化學成分研究發現，鳶尾科植物含有黃酮類、鳶尾三萜類，苯醌類、以及酚類等化合物[1]，但未有肽化合物的報道，因此，本實驗分離得到的二肽類化合物Aurantiamide acetate是首次從本科植物分得，它具有抗織織蛋白酶、抗氧化等作用[2～3]。

1 材料與儀器

川射干采購于成都市荷花池藥材市場，經本校藥學院中藥品種質量與資源教研室嚴鑄云博士鑒定為鳶尾科鳶尾屬植物鳶尾Iris tectorum Maxim.的干燥根莖。

Varian Union 400/54和Burker AV－600核磁共振儀，Bruker BioToF Q高分辨質譜儀，柱色譜硅膠、薄層色譜硅膠H、薄層色譜硅膠GF254(青島海洋化工廠產品)，Lichroprep Rp－18 gel(Merck公司產品)，其余均為分析純試劑。

2 提取與分離

取去除雜質的川射干藥材4.6 kg，粉碎成粗粉，分別用6倍、6倍、4倍的95%乙醇回流提取3次，第一、二次每次1.5 h，第三次1 h，稍冷后趁熱過濾。提取液減壓回收乙醇至無醇味，得浸膏3209 g，浸膏用適量水分散后依次用石油醚(60～90℃)、乙酸乙酯、正丁醇萃取，各萃取液減壓濃縮回收溶劑，得石油醚(60～90℃)部位浸膏、乙酸乙酯部位浸膏(840 g)、正丁醇部位浸膏，剩余的水層濃縮得水部位浸膏。

取乙酸乙酯浸膏210 g拌樣上硅膠柱，以三氯甲烷－甲醇梯度洗脫，其洗脫餾分再經反復硅膠、反相硅膠柱色譜等分離，得12個單體化合物，經理化檢識和1HNMR、13C－NMR、HR－MS波譜鑒定手段，鑒定出其中9個單體化合物，分別為:Aurantiamide acetate(Ⅰ，8 mg)，鼠李秦素(Ⅱ，3 mg)，Kanzakiflavone －2(Ⅲ，6 mg)，鳶尾苷元(Ⅳ，＞5 g)，鳶尾甲黃素 B(Ⅴ，100 mg)，鳶尾甲黃素 A(Ⅵ，100 mg)，二甲基鳶尾苷元(Ⅶ，6 mg)，茶葉花寧(Ⅷ，100 mg)，β －谷甾醇(Ⅸ，30 mg)。

3 結構鑒定

化合物Ⅰ 無色針晶[石油醚(60～90℃)－丙酮]。HR-ESI-MS m/z:[M+Na]+467.1951，[M+K]+483.1703，[給出的最佳分子式為C27H28N2NaO4(理論值:467.1941)]。1H －NMR(600 MHz，CDCl3):δ 2.03(3H，s，C2″'－ H)，2.75(2H，m，C3'－ H)，3.05(1H，dd，J=13.8，8.4 Hz，C3－ H)，3.22(1H，dd，J=13.8，6.0 Hz，C3－ H)，3.82(1H，dd，J=11.3，4.2 Hz，C1'－ H)，3.94(1H，dd，J=11.4，5.1 Hz，C1'－ H)，4.35(1H，m，C2'－ H)，4.75(1H，dd，J=14.6，7.9 Hz，C2－H)，5.89(1H，d，J=7.9 Hz，Nα － H)，6.70(1H，d，J=8.0 Hz，Nβ － H)，7.07(2H，d，J=7.5 Hz，C5'，9'－H)，7.16(3H，m，C6'，7'，8'－ H)，7.44(2H，t，J=8.1 Hz，C4″，6″－ H)，7.52(1H，t，J=7.2 Hz，C5″－ H)，7.71(2H，d，J=8.0 Hz，C3″，7″－ H)。13C － NMR(600 MHz，CDCl3):δ 170.7(C －1″')，170.2(C － 1)，167.1(C－1″)，136.7(C －4')，136.6(C －4)，133.7(C －2″)，131.9(C － 5″)，129.3(C － 5，9)，129.1(C － 6'，8')，128.8(C － 4″，6″)，128.6(C － 6，8)，128.6(C － 3″，7″)，127.1(C － 7')，127.0(C － 5'，9')，126.7(C －7)，64.6(C －1')，55.0(C －2)，49.5(C －2')，38.4(C－3)，37.4(C －3')，20.8(C －2″')。上述數據與文獻[4－5]一致，故鑒定化合物Ⅰ為 Aurantiamide acetate，其結構式見圖1。

圖1 化合物Ⅰ(aurantiamide acetate)的結構式

化合物Ⅱ 黃色針晶[石油醚(60～90℃)－丙酮]。1H －NMR(600 MHz，DMSO －d6):δ 12.45(1H，s，C5－OH)，9.74(1H，s，C3－OH)，9.51(1H，s，C4'－ OH)，7.78(1H，d，J=1.8 Hz，C2'－ H)，7.74(1H，dd，J=8.4，2.2 Hz，C6'－ H)，6.94(1H，d，J=8.3 Hz，C5'－ H)，6.78(1H，d，J=2.4 Hz，C8－ H)，6.35(1H，d，J=2.2 Hz，C6－H)，3.87(3H，s)與 3.85(3H，s)為 C7，3'－ OCH3信號。上述數據與文獻[6]一致，故鑒定化合物Ⅱ為鼠李秦素(rhamnazin)。

化合物Ⅲ 黃色粉末(三氯甲烷－甲醇)。1HNMR(600 MHz，DMSO － d6):δ 6.86(1H，s，C3－H)，10.35(1H，s，C4'－ OH)，13.02(1H，s，C5－ OH)，6.93(2H，d，J=8.7 Hz，C3'，5'－ H)，7.94(2H，d，J=8.4 Hz，C2'，6'－ H)，6.95(1H，s，C8－ H)，6.17(2H，s，C6，7－OCH2O－)。上述數據與文獻[7]一致，故鑒定化合物Ⅲ為Kazakiflavone－2。

化合物Ⅳ 無色針晶(甲醇);UVλmax(甲醇):266 nm。1H －NMR(400 MHz，DMSO －d6):δ 8.33(1H，s，C2－ H)，13.06(1H，s，C5－ OH)，9.59(1H，s，C4'－ OH)，10.77(1H，s，C7－ OH)，6.82(2H，d，J=8.4 Hz，C3'，5'－ H)，7.37(2H，d，J=8.8 Hz，C2'，6'－H)，6.50(1H，s，C8－ H)，3.75(3H，s，C6－ OCH3)。上述數據與文獻[8]一致，故鑒定化合物Ⅳ為鳶尾苷元(tectorigenin)。

化合物Ⅴ 無色針晶(甲苯－甲醇)。1H－NMR(600 MHz，DMSO － d6):δ 8.34(1H，s，C2－ H)，13.05(1H，s，C5－ OH)，9.11(1H，s，C4'－ OH)，10.72(1H，s，C7－OH)，6.48(1H，s，C8－ H)，7.12(1H，d，J=1.7 Hz，C2'－ H)，6.97(1H，dd，J=8.0，2.0 Hz，C6'－ H)，6.81(1H，d，J=8.2 Hz，C5'－ H)，3.78(3H，s)與 3.74(3H，s)為 C6，3'－ OCH3信號。上述數據與文獻[9]一致，故鑒定化合物Ⅴ為鳶尾甲黃素B(iristectorigenin B)。

化合物Ⅵ 無色針晶[石油醚(60～90℃)－丙酮]。1H －NMR(600 MHz，DMSO －d6):δ 8.33(1H，s，C2－H)，13.06(1H，s，C5－ OH)，10.75(1H，s，C7－OH)，9.03(1H，s，C3'－ OH)，6.50(1H，s，C8－ H)，7.03(1H，d，J=2.0 Hz，C2'－ H)，6.97(1H，d，J=8.5 Hz，C5'－ H)，6.94(1H，dd，J=8.0，2.0 Hz，C6'－ H)，3.75(3H，s)與 3.80(3H，s)為 C6，4'－OCH3信號。上述數據與文獻[10]一致，故鑒定化合物Ⅵ為鳶尾甲黃素A(iristectorigenin A)。

化合物Ⅶ 無色針晶[石油醚(60～90℃)－丙酮]。1H －NMR(600 MHz，DMSO －d6):δ 8.49(1H，s，C2－ H)，12.88(1H，s，C5－ OH)，7.02(2H，d，J=8.8 Hz，C3'，5'－ H)，7.53(2H，d，J=8.5 Hz，C2'，6'－H)，6.83(1H，S，C8－ H)，3.74(3H，s)、3.80(3H，s)與 3.93(3H，s)為 C6，7，4'－ OCH3質子信號。上述數據與文獻[8]基本一致，故鑒定化合物Ⅶ為二甲基鳶尾苷元(dimethyltectorigenin)。

化合物Ⅷ 無色片狀結晶[石油醚(60～90℃)－丙酮]。1H － NMR(600 MHz，CDCl3)δ 2.52(3H，s，C1－ COCH3)，3.88(3H，s，C3－ OCH3)，6.55(1H，s，C4－OH)，6.91(1H，d，J=8.6 Hz，C5－ H)，7.49(2H，t，C2'，6'－ H)。上述數據與文獻[11]一致，故鑒定化合物Ⅷ為茶葉花寧(apocynin)。

化合物Ⅸ 無色針晶[石油醚(60～90℃)－丙酮]，硅膠TLC色譜經三種不同展開劑展開，噴香草醛硫酸溶液，加熱，均與β－谷甾醇對照品在相同位置顯相同的紫紅色斑點。1H－NMR(600 MHz，CDCl3):δ 3.53(1H，m，C3－ OH)，5.35(1H，d，J=2.8 Hz，C6－H)。根據以上理化性質與光譜數據，鑒定化合物Ⅸ為β－谷甾醇(β－sitosterol)。

4 致謝

中科院成都生物研究所的李國友老師對化合物Ⅰ的波譜解析給予了很大的幫助，在此表示最誠摯的謝意。

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