咸文榮 ,張登峰 ,董亮
(1.西北農林科技大學,陜西楊凌,712100;2.青海省農科院植保所)
辣椒疫病是由辣椒疫霉菌(Phytophora capsici)引起的毀滅性土傳真菌病害,輕者減產20%~30%,重則減產一半以上,甚至絕收[1,2]。近年來隨著陜西省辣椒種植面積的不斷擴大,辣椒疫病發生為害程度日趨嚴重,成為辣椒生產的重要障礙因子。目前,改進栽培措施和使用化學農藥是防治辣椒疫病的常規技術,但防效均不理想[3]。探索新的防治途徑已成為控制辣椒疫病,發展辣椒產業亟待解決的重大問題。選育和種植抗病的辣椒品種不僅可以減輕病害損失,且不污染環境,是防治辣椒疫病最經濟有效的措施。本研究擬對引進的辣椒品種進行疫霉菌抗性鑒定,以期從中篩選出抗疫病性強的材料,為抗病育種和辣椒嫁接試驗篩選砧木提供可靠的依據。
從國內外引進辣椒品種共計77個,其中線椒、干椒和朝天椒29個,牛角椒和羊角椒38個,甜椒10個。
①供試菌種的分離和純化 辣椒疫病病株采自青海省樂都縣碾伯鎮北門村白如蒲大棚辣椒發病田中,用PSA培養基分離培養疫霉菌,純化保存備用。
②孢子囊誘導[4,6]土壤浸出液制備:取菜田肥沃表土500 g,加入1 000 mL蒸餾水,攪拌后靜置24 h,取上清液用濾紙過濾2次,濾液即為土壤浸出液,置于4℃冰箱中保存備用。
土壤浸出液培養法:將25 mL土壤浸出液加入9 cm×9 cm培養皿中,把PSA平板上生長7 d的疫霉菌用手術刀分割成1 cm×1 cm大小的菌絲塊,取8~10塊置于土壤浸出液中,菌絲塊的菌絲面朝上,讓土壤浸出液剛剛淹過菌絲面,置于26℃,光照連續照射72 h,菌絲塊表面可產生大量孢子囊。將培養72 h的菌絲塊及浸出液一同倒入三角瓶中,用力振蕩10 min,促使孢子囊從菌絲叢上脫落,用雙紗布過濾懸浮液,濾去培養基和部分菌絲,濾液為孢子囊懸浮液。用血球計數板測定孢子囊懸浮液的濃度,然后稀釋到試驗所需的接種濃度,接種液要求現配現用。
試驗分2次育苗,2006年6月15日播種干椒和線椒品種,6月19日播種牛角椒、羊角和甜椒品種,各品種直播于4 cm×4 cm(72目)育苗盤的基質中。育苗和接菌試驗在西寧市蔬菜研究所自控溫室中進行。
接種采用育苗盤灌根法。接種前1 d苗盤澆適量水,保證土壤保持半干半濕狀態。育苗47 d后,即苗齡為5~6葉期接種,接種孢子囊濃度為10 250個/mL,用注射器吸取5 mL接種液接種于植株根際土壤中,接種液不能接觸到植株根莖部。每個品種重復3次,每次重復10株幼苗,共30株,留10~20株不接種作對照。接種至發病期間保持土壤濕度近飽和。于接種后見有發病株開始調查,間隔3 d調查1次,計算發病率、病情指數。
0級:無病;1級:幼苗根莖部輕微變黑,葉片不萎蔫或可恢復性萎蔫;2級:幼苗根莖部變黑達1~2 cm,葉片不可恢復性萎蔫,下部葉片偶有脫落;3級:幼苗根莖部變黑超過2 cm,葉片明顯萎蔫或落葉明顯;4級:幼苗根莖部變黑縊縮,除生長點外全部落葉或植株萎蔫;5級:植株枯死。
高抗(HR):病情指數≤10;抗病(R):10<病情指數≤30;中抗(MR):30<病情指數≤50;感病(S):病情指數>50。
接菌15 d后幼苗發病速度緩慢,病情穩定,故以接菌后15 d調查的結果進行抗性分析。調查時發現甜椒品種發病速度最快,其次是干椒、線椒和朝天椒。另外,各品種發病率和病情指數亦存在一定差異,結果如下。
從圖1可以看出,供鑒定的29份干椒、線椒和朝天椒品種中高抗品種有12個,其中,發病率為0的品種 6 個, 分別是 4,6,23,25,26,31 號; 抗病品種有 6個;感病品種有11個。
從圖2可以看出,供鑒定的10份甜椒品種中,沒有高抗、抗病品種,中抗品種1個(8號),感病品種有9個。
從圖3可以看出,供鑒定的38份牛、羊角椒品種中,沒有高抗品種,抗病品種有 4 個(7,9,24,38 號);中抗品種3個;其余31個品種抗性系數小,表現為感病。
鑒定辣椒種質資源對疫霉菌的抗性是抗病育種的關鍵。通過溫室接種試驗發現,不同辣椒品種對疫病的抗性存在明顯差異。供試的77個樣品中,干椒、線椒和朝天椒品種 1,4,6,7,8,9,10,23,25,26,27 和31號共12個品種表現為高度抗病,屬高抗品種,占鑒定總數的15.58%;抗病品種共計10個,其中6個來自干椒、線椒品種,4個來自牛、羊角椒品種,占鑒定總數的12.99%;甜椒沒有高抗、抗病品種。試驗中還發現,隨著接種時間的延長,3類不同品種的發病速率不同,甜椒發病速率最快;其次為牛、羊角椒,而線椒、干椒和朝天椒相對較慢。以上結果可為青海省辣椒生產合理利用品種,減少辣椒疫病的為害提供依據。

圖1 干辣椒品種接種抗性鑒定

圖2 甜椒品種接種抗性鑒定

圖3 牛角椒、羊角椒品種接種抗性鑒定
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