高效液相色譜法測定健兒樂顆粒中芍藥苷含量

張瓊英

（重慶醫科大學附屬第二醫院，重慶 400010）

健兒樂顆粒是由山楂、白芍、竹葉卷心等制成的中藥制劑，具有清熱平肝、清心除煩、健脾消食的功效，用于治療兒童煩躁不安、夜驚夜啼、夜眠不寧、消化不良。為有效控制產品質量，筆者采用高效液相色譜法測定健兒樂顆粒中芍藥苷的含量，現報道如下。

1 儀器與試藥

Waters 2695/2996型高效液相色譜儀（Waters公司）。芍藥苷對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號為110736-200527）；健兒樂顆粒（市售品，批號分別為 090801，090802，090803，090804，090901）；水為純化水，乙腈為色譜純，其他試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱：DiamonsilTMC18柱（250 mm × 4.6 mm，5μm）；流動相：乙腈 -0.1%磷酸溶液（14 ∶86）；流速：1.0 mL/min；檢測波長：230 nm。理論板數以芍藥苷計算不低于3000。

2.2 溶液制備

精密稱取芍藥苷對照品適量，加甲醇制成每1 mL含0.0884 mg的溶液，作為對照品溶液。取本品10 g，研細，精密稱取4.5 g，置具塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇50 mL，稱定質量，超聲處理（功率240 W，頻率 45 kHz）30 min，放冷，再稱定質量，用稀乙醇補足減失的質量，搖勻，濾過，取續濾液，即得供試品溶液。按健兒樂顆粒制備工藝，制備缺白芍的陰性樣品，照供試品溶液制備方法制成陰性對照品溶液。

2.3 方法學考察

專屬性考察：取對照品溶液、供試品溶液、陰性對照品溶液各10μL，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。可見供試品溶液色譜中，在與對照品溶液色譜相應位置上有一相同色譜峰，陰性對照品溶液在此保留時間內無吸收峰，表明陰性對照品對測定無干擾，專屬性較好（圖1）。

圖1 高效液相色譜圖

線性關系考察：精密吸取對照品溶液 2，4，8，16，20μL，注入液相色譜儀。以芍藥苷進樣量為橫坐標、峰面積為縱坐標繪制標準曲線，得回歸方程 Y=504756.12 X-13501.42，r=0.9999（n=5）。結果表明，芍藥苷進樣量在 0.1768 ～1.7680μg范圍內與峰面積線性關系良好。

精密度試驗：精密吸取對照品溶液10μL，重復進樣5次，測定芍藥苷峰面積。結果的RSD為0.6%（n=5）。

穩定性試驗：取同一供試品溶液，分別于 0，2，4，10，16 h 時進樣。結果芍藥苷峰面積的RSD為0.7%（n=5），表明供試品溶液穩定性良好。

重現性試驗：按擬訂的含量測定方法，取同一批樣品6份，依法測定。結果芍藥苷平均含量為5.86 mg/袋，RSD為0.90%（n=6）。

加樣回收試驗：取已知含量的樣品6份，分別加入芍藥苷對照品，按供試品溶液制備方法制備溶液，測定其芍藥苷含量，計算回收率。結果見表1。

表1 芍藥苷加樣回收試驗結果（n=6）

2.4 樣品含量測定

按2.2項下制備方法制備供試品溶液，并按2.1項下色譜條件測定。結果批號為 090801，090802，090803，090804，090901 的 5 批樣品中，芍藥苷含量分別為 5.86，5.48，6.02，6.10，5.94 mg/袋。

3 討論

采用本含量測定方法時，參考文獻[1]選用乙腈-磷酸溶液為流動相，經多次試驗，發現14∶86的乙腈-0.1%磷酸溶液能使芍藥苷峰與相鄰色譜峰分離良好，且峰形對稱，陰性對照亦無干擾，故本法可用于健兒樂顆粒的質量控制。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（一部）[M].北京：化學工業出版社，2005：68.