高效液相色譜法檢測抗風(fēng)濕類中藥制劑中非法添加的化學(xué)藥物

趙鳳菊，來國防

（1.云南省大理州食品藥品檢驗(yàn)所，云南 大理 671000； 2.云南省食品藥品檢驗(yàn)所，云南 昆明 650011）

中藥制劑成分復(fù)雜，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)不夠完善，一些制假者在生產(chǎn)過程中非法添加化學(xué)藥品，以提升療效，達(dá)到“立竿見影”之效。特別是在治療難以治愈的慢性風(fēng)濕病等中藥制劑中非法添加激素類、鎮(zhèn)痛抗炎類等化學(xué)藥品，長期服用會給患者帶來不良后果[1-2]。筆者建立了檢測抗風(fēng)濕類中藥制劑中非法添加的醋酸潑尼松、雙氯芬酸鈉、地塞米松、布洛芬的高效液相色譜（HPLC）法，報道如下。

1 儀器與試藥

Agilent 1100型高效液相色譜儀，紫外檢測器，自動進(jìn)樣系統(tǒng)。醋酸潑尼松、雙氯芬酸鈉、醋酸地塞米松、布洛芬對照品（批號分別為 10012-0105，100334-200302，0122-9403，100179-200303）均由中國藥品生物制品檢定所提供；樣品由大理州食品藥品檢驗(yàn)所抽樣（標(biāo)示為某醫(yī)院自制抗風(fēng)濕膠囊）；甲醇為色譜純，醋酸、醋酸銨均為分析純，水為超純水。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：Eclisep XDB C18柱（250 mm×4.6 mm，5μm）；流動相：0.02 mol/L醋酸銨溶液（冰醋酸調(diào) pH為3.6）-乙腈（50∶50）；檢測波長：263 nm[3]；進(jìn)樣量：20μL。

2.2 溶液制備

精密稱取醋酸潑尼松11.1 mg、雙氯芬酸鈉3.9 mg、布洛芬10.4 mg和醋酸地塞米松7.3 mg對照品，分別置50 mL量瓶中，加甲醇溶液（甲醇∶水=1∶1）溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品貯備液；分別精密量取上述對照品貯備液各2 mL，混合均勻，即得對照品溶液。取被測膠囊10粒，取出內(nèi)容物混勻，分別精密稱取0.3 g，置50 mL量瓶中加甲醇溶液（1∶1）超聲20 min，加甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。

2.3 樣品檢測

按擬訂的色譜條件依法進(jìn)樣，色譜圖見圖1。在圖1中，得到了4種對照品溶液和供試品溶液的色譜圖，從保留時間一致的色譜峰中可初步判定，樣品中同時含有醋酸潑尼松、雙氯芬酸鈉、地塞米松、布洛芬。取供試品溶液和對照品溶液作紫外圖譜掃描，見圖2?？梢妰烧叩墓庾V圖一致。可進(jìn)一步確定樣品中含有醋酸潑尼松、雙氯芬酸鈉、布洛芬和地塞米松。為進(jìn)一步確證該結(jié)果，筆者委托我所儀器室用UPLC-MS/MS技術(shù)對陽性樣品溶液進(jìn)行檢測，發(fā)現(xiàn)其與混合對照品溶液的色譜及質(zhì)譜行為一致，進(jìn)而證明此中藥制劑中含有醋酸潑尼松、雙氯芬酸鈉、地塞米松和布洛芬。此外，用此色譜條件，醋酸潑尼松、雙氯芬酸鈉、地塞米松和布洛芬與樣品其他成分得到有效地分離，可以進(jìn)一步作為定量測定的方法。

圖1 高效液相色譜圖

圖2 紫外光譜圖

3 討論

由于目前抗風(fēng)濕類中藥制劑成分較復(fù)雜，且尚未建立非法添加物的檢測標(biāo)準(zhǔn)，有些按標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)合格的樣品可能含有未規(guī)定檢驗(yàn)項(xiàng)目的非法添加成分，給消費(fèi)者帶來傷害，故基層可用此方法檢測中成藥中非法添加的化學(xué)成分。

[1]趙曉娟.激素類藥物的不良反應(yīng)[J].遼寧醫(yī)學(xué)雜志，2001，15（6）：294-296.

[2]周 彬，楊秀川.糖皮質(zhì)激素類藥物在臨床應(yīng)用中的不良反應(yīng)和并發(fā)癥[J].實(shí)用醫(yī)院藥學(xué)雜志，1999，25（2）：62-66.

[3]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（二部）[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：96.