規模化豬場豬瘟免疫超前免疫與非超前免疫效果的試驗觀察

王治方,郭成留,薛曉波,徐引弟,朱文豪,李建林,張玉楊

(1.河南省農業科學院畜牧獸醫研究所,河南 鄭州 450002;2.河南省淇縣永昌公司,河南 淇縣 456750)

豬瘟是威脅我國養豬業健康發展的重要疾病因素之一,國內對豬瘟的控制主要依靠疫苗的免疫接種,業內對豬瘟的免疫程序研究報道很多,但也存在分歧。在生產實踐中,對豬瘟超前免疫的分歧最為明顯,一部分養殖場表示超前免疫對預防豬瘟(特別是豬瘟疫區)是一種很好的免疫方法;部分養殖場認為超前免疫效果不明顯,操作起來費時、費力,還經常發生過敏死亡現象。為了驗證豬瘟超前免疫的效果,課題組作了以下試驗,報告如下。

1 材料與方法

1.1 試驗動物 妊娠母豬:品種、胎次、預產期相同的健康母豬3頭,分別編號為A、B、C,產前30 d經血清學檢驗,偽狂犬gE抗體陰性、豬繁殖與呼吸綜合征和豬瘟抗原陰性。

試驗仔豬: 3頭試驗母豬所產相應仔豬(母豬 A 產 12頭 ,編號分別為 A1、A2、A3…A12;母豬B產12 頭,編號分別為B1、B2、B3…B12;母豬C產 10頭,編號分別為 C1、C2、C3…C10),每窩仔豬隨機分為超免組和非超免組,超免組包括A4 、A5 、A6 …A12;B7、B8 、B9 …B12;C6 、C7 、C8…C10。非超免組包括 A1、A2、A3;B1、B2、B3…B6;C1、C2、C3…C5。

1.2 試驗用疫苗 ST豬瘟活疫苗(傳代細胞源),由廣東永順生物制藥有限公司生產(批號871)。零免豬瘟活疫苗 ,由廣東永順生物制藥有限公司生產(批號816)。豬瘟淋脾弱毒組織苗,由廣東永順生物制藥有限公司生產(批號756)。

1.3 檢測試劑 豬瘟抗體檢測試劑盒(阻斷ELISA),美國IDEXX公司生產(批號43220-R941)。

1.4 試驗器材 3000 g臺式離心機、微量移液器(50～ 1000μL)、酶標儀(美國 ELX800)、微量振蕩器、恒溫培養箱等。

1.5 免疫方案 超免組的免疫方案:0日齡,零免豬瘟活疫苗1頭份/份;40日齡,豬瘟淋脾弱毒組織苗1頭份/份。

非超免組免疫方案:20日齡,ST豬瘟活疫苗5頭份/份;60日齡,豬瘟淋脾弱毒組織苗1頭份/份。

試驗豬其他疾病的防疫均按該場原有免疫程序執行。

1.6 樣品采集 所有試驗豬只分別于20、30、40、50、60、70、90日齡采集血液樣品,分離血清,-20℃凍存,試驗結束后統一檢測抗體效價。

1.7 效價檢測 試驗操作步驟嚴格按試劑盒說明書操作。

2 試驗結果

2.1 判定標準 豬瘟抗體檢測試驗(阻斷ELISA)成立條件:陰性對照的平均OD450值應大于0.50;陽性對照的阻斷率應大于50%;試驗方法有效。樣品阻斷率=(陰性對照平均OD450-樣品OD450)/陰性對照平均OD450×100%

被檢樣品的阻斷率大于或等于40%,該樣品為豬瘟抗體陽性;樣品阻斷率小于或等于30%,該樣品為陰性(無豬瘟抗體存在);樣品阻斷率在30%～40%,該樣品為可疑。

2.2 結果 A、B、C母豬所產仔豬各時期的豬瘟抗體效價分別見表1、表2、表3;A、B、C三組豬瘟超前免疫與非超前免疫豬瘟抗體曲線圖分別見圖1、圖2、圖3。

2.3 結果分析 通過方差分析顯示,母豬A所產仔豬超免組和非超免組在20日齡豬瘟抗體效價差異不顯著(P＞0.05);在30、40、50日齡二者差異極顯著(P＜0.01),超免組效價明顯高于非超免組;在60、70、90日齡二者差異不顯著(P＞0.05)。母豬B所產仔豬超免組和非超免組在20、30日齡豬瘟抗體效價差異不顯著(P ＞0.05);在 40、50、60、70、90 日齡二者差異極顯著(P＜0.01),超免組效價明顯高于非超免組。母豬C所產仔豬超免組和非超免組在20日齡豬瘟抗體效價差異不顯著(P＞0.05);在30、40、50 、60、70、90 日齡二者差異極顯著(P ＜0.01),超免組效價明顯高于非超免組。

表1 A母豬所產仔豬各日齡豬瘟抗體效價

表2 B母豬所產仔豬各日齡豬瘟抗體效價

表3 C母豬所產仔豬各日齡豬瘟抗體效價

3 討論

3.1 20日齡A、B、C豬瘟超前免疫組和非超免組豬瘟抗體效價差異不顯著,但在30日齡后超免組均明顯高于非超免組,充分說明豬瘟超前免疫的真正價值體現在仔豬斷奶后的一段時期,而這一階段往往是養殖場(特別是豬瘟污染場)最危險的時期。筆者認為豬瘟超前免疫是控制斷奶仔豬感染豬瘟的十分有效的免疫方法。

3.2 超前免疫也稱乳前免疫、零時免疫,即仔豬出生后去除體表黏液,頸部消毒后肌肉接種豬瘟疫苗,與母豬隔離1.5～2 h后再吃初乳的免疫方法。該免疫方法操作難度不大,但要求具體操作者有很高的責任心,堅決避免仔豬吃乳后免疫,造成免疫失敗。在生產實踐中,遇到這種情況可做上標記進行豬瘟常規免疫。試驗中超免組有個別豬只,筆者就懷疑有這種情況發生。

3.3 通過試驗不難看出,超前免疫雖然能明顯提高仔豬前期的豬瘟抗體水平,但到40日齡沒有得到理想水平,通過40日齡的常規加強免疫,抗體效價有了明顯升高,得到較為理想水平。可見,在生產實踐中,豬瘟超前免疫需要配合1～2次常規免疫,才能使豬群得到理想的免疫效果。

3.4 試驗中使用的零免豬瘟活疫苗,很大程度上減少了豬瘟超前免疫常見的過敏反應,這種免疫方法值得推廣應用。