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微柱凝膠技術(shù)在產(chǎn)前檢查中的應(yīng)用體會

2010-09-07 07:44:00鄧懷峰郭仁貴何章勇
中國當代醫(yī)藥 2010年34期
關(guān)鍵詞:新生兒血清檢測

鄧懷峰,郭仁貴,何章勇

(湖南省郴州市第一人民醫(yī)院,湖南郴州 423000)

微柱凝膠技術(shù)在產(chǎn)前檢查中的應(yīng)用體會

鄧懷峰,郭仁貴,何章勇

(湖南省郴州市第一人民醫(yī)院,湖南郴州 423000)

目的:探討微柱凝膠技術(shù)在產(chǎn)前檢查中診斷和預防新生兒溶血病臨床應(yīng)用價值。方法:本院于2008年6月~2009年12月對180例門診和住院O型待產(chǎn)孕婦采取微柱凝膠法檢測血型抗體IgG。并觀察其檢測結(jié)果。結(jié)果:180例受檢孕婦中,抗A抗體效價正常者59例(32.8%),抗B抗體效價正常者68例(37.8%),兩者合計為127例,占70.6%;抗A抗體效價≥64者32例(17.8%),抗B抗體效價≥64者21例(11.7%),兩者合計為53例,占29.4%。結(jié)論:微柱凝膠法檢測靈敏度高,對檢驗孕婦產(chǎn)前IgG抗體效價具有較高的臨床應(yīng)用價值,值得臨床推廣。

微柱凝膠;產(chǎn)前檢查;新生兒溶血病

本院于2008年6月~2009年12月對180例門診和住院O型待產(chǎn)孕婦采取微柱凝膠法檢測血型抗體IgG。并觀察其檢測結(jié)果,報道如下:

1 材料與方法

1.1 標本來源

2008年6 月~2009年12月在本院門診做產(chǎn)前檢查或住院待產(chǎn)的O型孕婦(丈夫是非O型),共180例。

1.2 儀器與試劑

儀器采用瑞士達亞美微柱凝膠檢測系統(tǒng)(包括定速離心機、判讀儀、恒溫孵育器、Coombs卡等),37℃水浴箱。試劑采用5%標準A、B型紅細胞懸液、0.2 mol/L 2-巰基乙醇(2-Me)(由長春博迅生物技術(shù)有限責任公司提供)。

1.3 檢測方法

取待檢孕婦血清和同體積的0.2 mol/L 2-巰基乙醇混勻后,置37℃水浴箱孵育30 min,將血清中免疫球蛋白(IgM)破壞。 用卡標記好稀釋的位數(shù),在試管中按 1∶16、1∶32、1∶64、1∶128、1∶256、1∶512 倍比稀釋經(jīng) 2-巰基乙醇處理好的孕婦血清,依次將倍比稀釋血清50 μl分別加入標記卡中;在所有孔中加入50 μl 5%A型或B型紅細胞懸液(與丈夫血型相同的紅細胞懸液)。置37℃水浴箱孵育15 min,用離心機離心900 r/min 2 min。

2 結(jié)果

結(jié)果判定,以反應(yīng)程度達到1+的最大稀釋倍數(shù)定為某抗體的效價值??贵w效價值≥64者為異常。180例受檢孕婦中,抗A抗體效價正常者59例(32.8%),抗B抗體效價正常者68例(37.8%),兩者合計為127例,占70.6%;抗A抗體效價≥64者32例(17.8%),抗B抗體效價≥64者21例(11.7%),兩者合計為53例,占29.4%。見表1。

表1 180例孕婦血清抗體效價測定結(jié)果(n)

3 討論

新生兒溶血病(HDN)是新生兒期常見疾病之一,嚴重時可導致死胎,新生兒重度貧血、黃疸甚至死亡[1]。ABO系統(tǒng)引起的HDN是由于母親體內(nèi)存在著與胎兒不相配合的IgG性質(zhì)血型抗體引起的。其中母親是O型,胎兒為A型或B型是引起HDN的最主要原因。隨著孕婦血清IgG抗A(B)抗體效價的增高,HDN發(fā)生率也隨著增加。產(chǎn)前血清學檢查結(jié)果以抗體效價64為臨界值,當母親血清中抗體效價≥64時,胎兒及嬰兒有受害的機會;當效價≥128時,新生兒很可能受害,當抗體效價≥512時,幾乎100%受害,必須進行預防性治療[2],可考慮應(yīng)用血漿置換降低抗體水平[3-4]。

因此,應(yīng)用科學的方法,準確測定孕婦血清IgG抗A(B)抗體效價,可為產(chǎn)前診斷和預防ABO-HDN提供依據(jù),是預防HDN的重要措施。微柱凝膠技術(shù)(microcolumn gel Immunoassay,MGI)是建立在傳統(tǒng)血型血清學基礎(chǔ)上的一項免疫學檢測技術(shù),其設(shè)計理論先進,操作簡單迅速,靈敏度高[5-6],結(jié)果準確直觀,具有很好的臨床檢測效果,可檢測到微弱的滴度變化,其靈敏度高于試管法,它對臨床某種疾病或臨床異常情況的診斷、病程監(jiān)測、療效評估、疾病預后判斷的能力較強,能夠更好地提示臨床醫(yī)生做好預防工作,對預防新生兒溶血病有很好的指導作用。此外,微柱凝膠實驗的密度梯度液層可洗滌紅細胞,防止雜蛋白混入,易于暴露出靶抗原,微小的玻璃層使凝集的紅細胞更加便于判斷[7-8]。同時,微柱凝膠法與傳統(tǒng)試管法相比,具有操作簡便、敏感、易于標準化、影響因素少、重復性好、結(jié)果可保存等優(yōu)點,適用于大批量標本的檢測。

綜上所述,應(yīng)用微柱凝膠技術(shù)測定孕婦血清IgG,抗體效價,具有靈敏度高、重復性好、實驗結(jié)果能長期保持、隨時可復查等優(yōu)點,能夠使實驗方法簡單化,操作標準化,用于常規(guī)性產(chǎn)前檢測,值得推廣應(yīng)用。

[1]王紅梅.夫婦ABO血型不合的孕婦產(chǎn)前免疫學檢查分析[J].中國輸血雜志,2000,13(1):30-31.

[2]盧發(fā)強,劉景漢,歐陽錫,等.孕產(chǎn)婦血型抗體與HDN發(fā)生率及溶血程度的臨床研究[J].中國醫(yī)師雜志,2004,6(10):1300.

[3]胡志紅.母嬰ABO血型不合與新生兒溶血病的關(guān)系[J].山西醫(yī)科大學學報,2004,35(6):618.

[4]王梁平,彭道波,趙暉,等.微柱凝膠法與凝聚胺法抗體檢出比較分析[J].臨床檢驗雜志,2001,19(6):355.

[5]李沙,鄭山根,歐陽錫林,等.柱凝集技術(shù)不規(guī)則抗體的初步觀察[J].中國輸血雜志,1999,12(3):168.

[6]周友泉,王厚照,謝則金,等.微柱凝膠法檢測孕婦IgG抗體效價[J].中國醫(yī)藥導報,2005,2(6):92-93.

[7]武建.柱凝集技術(shù)的臨床應(yīng)用及其實驗研究現(xiàn)狀[J].中國輸血雜志,2003,16(2):369.

[8]盧磊,劉燕.微柱凝膠技術(shù)在新生兒溶血病檢測中的應(yīng)用[J].中國現(xiàn)代醫(yī)生,2010,48(13):38-39.

R446.11

B

1674-4721(2010)12(a)-083-02

2010-10-11)

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