離子敏感型左氧氟沙星原位膠化滴眼液的制備及質量控制

楊遠榮，任貽軍，林飛剛

（1.華中科技大學同濟醫學院附屬荊州醫院，湖北 荊州 434020； 2.鄖陽醫學院藥護學院，湖北 十堰 442000）

離子敏感型左氧氟沙星原位膠化滴眼液的制備及質量控制

楊遠榮1，任貽軍1，林飛剛2

（1.華中科技大學同濟醫學院附屬荊州醫院，湖北 荊州 434020； 2.鄖陽醫學院藥護學院，湖北 十堰 442000）

目的 制備左氧氟沙星原位膠化滴眼劑并建立其質量控制方法。方法 以氯化鈉為滲透壓調節劑、海藻酸鈉為增稠劑、羥苯乙酯為防腐劑，制備左氧氟沙星原位膠化滴眼劑，用高效液相色譜法測定含量。結果 制得的液體為無色或淺黃色澄明液體，pH為5.57，鑒別、檢查結果均符合2005年版《中國藥典（二部）》中的相關規定，含量測定的線性范圍為9.39～62.60!g/mL，平均回收率為99.27%，RSD為2.92%（n=6）。結論 左氧氟沙星原位膠化滴眼液處方合理，質量符合要求。

左氧氟沙星；原位膠化；滴眼劑；質量控制

Abstract：Objective To prepare insitu gelling of Levofloxacin Hydrochloride Eye Drops and to establish its quality control method.MethodsThe insitu gelling of Levofloxacin Hydrochloride Eye Drops was prepared with sodium chloride as buffer to regulate the pH value and osmotic pressure and with sodium polymannuronate as thickener.The content of levofloxacin hydrochloride was determined by high performance liquid chromatography(HPLC).Results The sustained-release eye drops were colorless or yellow limpid liquid.Its test and identificationResultsall conformed to the related stipulation stated in Chinese Pharmacopeia(2005 edition).There was the good linear relationship within the concentration range of 9.39-62.60!g/mL for levofloxacin hydrochloride，and its average recovery rate was 99.27%，RSD was 2.92%and pH was 5.57.Conclusion The preparative method is simple and feasible.The quality of insitu gelling of Hydrochloride Levofloxacin Eye Drops is stable and controllable.

Key words：levofloxacin；insitu gelling；eye drops；quality control

左氧氟沙星是新一代廣譜、高效氟喹諾酮類抗微生物藥，抗菌活性是氧氟沙星的2倍，在水中的溶解度是氧氟沙星的8倍[1]。該藥在體內吸收迅速，多種劑型已廣泛用于各種疾病的治療，效果良好。其眼內通透性良好，以0.3%的滴眼液單次滴眼可在房水中達到多數敏感菌的最低抑菌濃度(MIC)[2]。由于眼部運動，滴眼液用后大部分經鼻淚管流出，或被淚液稀釋，或直接流出，常通過增加給藥頻率或提高藥物濃度彌補這一不足，但高濃度藥物會增加全身性毒副作用[3]。為了提高滴眼液生物利用度及延長藥物作用持續時間，筆者研制了左氧氟沙星原位膠化滴眼液，并采用高效液相色譜法測定其含量，報道如下。

1 儀器與試藥

Agilent 1100型高效液相色譜儀（安捷倫公司），包括在線脫氣機、G1311A四元泵、自動進樣器、柱溫箱、Agilent化學工作站。左氧氟沙星原料(河南省龍泉集團藥業有限公司，純度為97.78%，批號為20060220)；左氧氟沙星對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號為1305182200602)；海藻酸鈉(青島膠南明月海藻化工有限公司，藥用級，批號為20060225)；氯化鈉、羥苯乙酯（藥用級），乙醇（色譜純），其他試劑（分析純）。

2 方法與結果

2.1 處方及制備

處方：左氧氟沙星3 g，海藻酸鈉5 g，羥苯乙酯0.5 g，氯化鈉8.5 g，注射用水加至1 000 mL。

制備：稱取海藻酸鈉5 g，加水200 mL，緩慢攪拌使之溶解，靜置備用；稱取羥苯乙酯0.5 g，加水500 mL，煮沸，緩慢攪拌使之溶解；精密稱取左氧氟沙星3 g，氯化鈉8.5 g，加入其中，攪勻后加入制備好的海藻酸鈉溶液，緩慢攪拌至澄清，以0.1 mol/L的氫氧化鈉溶液調pH至5.0～6.0，加水至900 mL。以0.8!m的濾膜濾過，自濾器上添加注射用水至1 000 mL，搖勻，嚴封，用100℃ 流通蒸汽滅菌30 min，分裝即得，10 mL/支。

2.2 一般質量控制

性狀：本品為無色或淡黃色澄明液體。

鑒別：在含量測定項下，供試品溶液主峰的保留時間應與左氧氟沙星對照品溶液主峰的保留時間一致。

檢查：pH為5.0～6.0，其他應符合2005年版《中國藥典（二部）》眼用制劑項下的規定[4]。3批樣品的pH平均值為5.57。

2.3 含量測定（高效液相色譜法）

2.3.1 溶液配制

精密稱取左氧沙星對照品31.3 mg，置100 mL量瓶中，用0.01 mol/L鹽酸溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻即得質量濃度為0.313 g/L的對照品溶液，避光冷藏保存；精密量取樣品1 mL，置100 mL量瓶中，用0.01 mol/L鹽酸稀釋至刻度，搖勻，過0.45!m微孔濾膜，取續濾液作為供試品溶液；除不加左氧氟沙星外，依法制備陰性樣品，按供試品溶液制備方法制得陰性對照品溶液。

2.3.2 色譜條件與系統適用性試驗

色譜柱：Zorbax SB-C18柱(250 mm ×4.6 mm，5!m)；流動相：磷酸鹽緩沖液(磷酸二氫鉀3.4 g，磷酸4 mL，加水至1 000 mL，pH=2.8)-甲醇(65 ∶35)；流速：1.0 mL/min；柱溫：30 ℃；檢測波長：293 nm；進樣量：20!L。在此條件下，主藥和其他雜質峰的分離度應大于1.5。色譜圖見圖1?？梢姡瞻纵o料對樣品測定無干擾，樣品主峰的保留時間與對照品主峰的保留時間一致。

2.3.3 方法學考察

標準曲線繪制：精密量取對照品溶液，用0.01 mol/L的鹽酸溶液稀釋成質量濃度分別為 9.39，15.65，31.30，43.82，50.08，62.60!g/mL的系列溶液。取20!L進樣，以左氧氟沙星的峰面積(A)對進樣質量濃度(C)進行線性回歸，得回歸方程 A=83.932 C+29.48，r=1.00（ n=6)。結果表明，左氧氟沙星質量濃度在9.39～62.60!g/mL范圍內與峰面積線性關系良好。

圖1 高效液相色譜圖

精密度試驗：精密量取對照品溶液1.0 mL，置10 mL量瓶中，加0.01 mol/L鹽酸溶液至刻度，搖勻，分別于1 d內和不同天內依法測定含量。結果日內精密度的 RSD為0.98%（n=3），日間精密度的 RSD為0.39%（n=3），表明方法精密度良好。

重現性試驗：精密量取同一批樣品1.0 mL，置100 mL量瓶中，加0.01 mol/L鹽酸至刻度，搖勻，依法進樣測定。結果平均含量為28.78!g/mL，RSD為1.41%（n=5)，表明方法重現性良好。

回收率試驗：精密量取對照品溶液10 mL，置100 mL量瓶中，再加入1.0 mL陰性對照品溶液，以0.01 mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，依法測定峰面積并計算含量。結果見表1。

表1 左氧氟沙星回收率試驗結果（n=6）

穩定性試驗：取同一供試品溶液，于 0，2，4，6，8 h時分別進樣測定含量。結果平均含量為28.97!g/mL，RSD為1.02%(n=5)。

2.3.4 樣品含量測定

取樣品3批，精密吸取適量，用0.01 mol/L鹽酸稀釋成每1 mL含左氧氟沙星0.3 mg的溶液，作為供試品溶液。依法測定峰面積并計算含量，本品含左氧氟沙星應為標示量的90.0%～110.0%。結果見表2。

3 討論

滴眼液具有易配制、易過濾除菌和使用方便等優點，且易被患者接受，因此成為最主要的眼科用藥。但由于眼角膜屏障、淚液的稀釋和淚道的引流等，傳統滴眼液的生物利用度較低，療效往往欠佳[5]。一般滴眼劑以水溶液為主，包括少數水性混懸液，用后約有70%的藥液直接從眼中溢出，若眨眼將有90%的藥液損失；凝膠劑雖然能延長藥物的作用時間，達到增加療效的作用，但也有分劑量不準確、黏度較大、給藥不方便、患者順應性不好等缺點。原位膠化滴眼劑不同于傳統的親水凝膠劑，是指以溶液狀態給藥后立即在用藥部位發生相轉變形成的非化學交聯的半固體制劑[6]。藥物在眼部被相對固定，局部吸收較多，某些極苦或強刺激性的藥物不會大量迅速流入口鼻，減輕了患者痛苦，患者依從性大大提高，在一定程度上還減少了用藥量，減少了不良反應的發生。原位膠化滴眼劑以其分劑量準確、使用方便、生物利用度高、滯留時間長、控制釋藥性能良好、患者順應性好而成為眼用制劑研究領域的熱點。

表2 樣品含量測定結果（，n=3）

表2 樣品含量測定結果（，n=3）

批號09041701 09041702 09041703標示量(%)93.43±2.18 93.81±1.67 96.37±1.30 RSD(%)2.33 1.78 1.34

人的淚液中含有大量Na+，K+，Ca2+等陽離子，某些多糖類衍生物能夠與其中的陽離子絡合發生構象改變，使溶液黏度急劇增大，溶液發生相變，轉化成凝膠狀態，而在眼中形成凝膠[7]。本制劑中的海藻酸鈉就具有這一特性，在遇到陽離子時能迅速發生相變，黏附在角膜上，延長藥物的作用時間。

左氧氟沙星原位膠化滴眼劑中的海藻酸鈉具有一定的黏度，容易堵塞色譜柱，影響測定，故筆者采用離心法消除海藻酸鈉的干擾。方法學考察結果表明，高效液相色譜法能夠滿足本制劑質量控制的要求。

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Preparation and Quality Control of Ion－Activated in Situ Gelling of Levofloxacin Hydrochloride Eye Drops

Yang Yuanrong1，Ren Yijun1，Lin Feigang2
(1.Jingzhou Hospital Affiliated to Tongji Medical College，Huazhong University of Science and Techololgy，Jingzhou，Hubei，China 434020；2.Pharmacy and Nurse College，Yunyang Medical College，Shiyan，Hubei，China 442000)

TQ460.6；R988.1

A

1006－4931(2010）07－0038－02

楊遠榮，男，碩士，副主任藥師，主要從事臨床藥學工作，（電話）0719-8499992（電子信箱）yangyr1970@sina.com。

2009－06－02；

2009－07－16）