超臨界蒜素微膠囊化緩釋劑型的研究

俞 偉 周海濱 楊海玲

浙江省寧波立華制藥有限公司,浙江 寧波 315174

超臨界蒜素微膠囊化緩釋劑型的研究

俞 偉 周海濱 楊海玲

浙江省寧波立華制藥有限公司,浙江 寧波 315174

介紹以β-CD為壁材,將超臨界蒜素進行包埋微膠囊化,制成緩釋劑型的研究。

超臨界蒜素;微膠囊化;緩釋劑型

蒜素,二烯丙基硫代亞磺酸脂,結構式(H2=CHCH2-S(O)S-CH2CH=CHCH2),英文名稱A llicin,是大蒜的主要功效成份。它具有極強的殺菌能力,對化膿性球菌、白喉桿菌、痢疾桿菌、傷寒桿菌、腦膜炎雙球菌等諸多病菌起到抵制和殺滅作用,它還可降低人體血脂含量,因此對冠心病、高血壓、動脈硬化癥等有防治作用。近來研究充分證明了大蒜素有防癌作用,因為它能阻斷亞硝酸在體內的合成,從而阻制癌細胞在體內的滋長或擴散,最近還有關于大蒜素能防治艾滋病的報道。

綜上所述,蒜素有很明顯的保健和醫療功效,但因其味臭、對胃有強烈刺激性、性質的不穩定、靜注的不方便性等諸多的不利因素的影響,使得蒜素在臨床上的應用受到很大的制約。因此,研究蒜素微膠囊化緩釋劑型的制備,將拓展其保健功能和臨床醫療的應用[1]。

1 蒜素微膠囊化緩釋劑型的制備

1.1 材料和設備

β-CD:陜西禮泉化工有限公司提供

機械攪拌器(型號:YT02)均質器(15M P)

1+5升超臨界CO2萃取裝置(型號:HA_221_50_ 06)

超聲乳化器(型號:JY98-Ⅲ)

真空冷凍干燥機(型號:GJ-0.4)光學顯微鏡(400倍)

電子顯微鏡(型號:JEM-1200EX)

1.2 制備方法

1.2.1 超臨界蒜素的制備:將大蒜脫皮,拍扁,放入萃取缸,CO2通過制冷變成液態,再通過加壓、加熱等處理后, CO2由液態變成超臨界流體進入萃取缸,這時蒜素被CO2所溶解。控制萃取壓力為20M P,溫度為38℃;一級分離壓力為7MP,溫度為40℃;二級分離壓力為4M P,分批從二級分離缸取出蒜素。

1.2.2 將超臨界蒜素加入30%的β-CD溶液(蒜素:β-CD=1∶8),置機械攪拌器內進行攪拌,400 r/m in×3m in,至混合液中看不到淺黃色油滴即可通過15M Pa均質器進行均質處理,然后再通過超聲乳化器進行超聲波乳化,每乳化1m in,間歇1m in,共3-4m in即完成了微膠囊化的處理[2][3],用400倍微鏡觀測包埋效果,如果包埋效果理想即可進行凍干,就可得到蒜素緩釋劑凍干粉[4]。

1.3 質量檢測控制與體外釋放速率

1.3.1 蒜素含量的檢測

檢測方法(分相萃取法):樣品經乙醚萃取、再以三氯乙酸進行去除雜質處理,與硝酸汞生成乳白色沉淀,以硫酸高鐵銨為指示劑,用硫氰化鉀標準溶液滴定“剩余”的硝酸汞,根據消耗的硫氰化鉀的量換算出樣品中蒜素的含量。

1.3.2 包封率的測定

檢測方法:采用分相萃取法,先檢測樣品已包封的蒜素含量,然后根據公式計算出包封率。

1.3.3 穩定性:保存兩年后,蒜素含量損失率不大于20%;檢測法:對保存3個月、6個月、9個月、12個月、18個月、24個月的樣品分別作蒜素含量的檢測,繪出蒜素穩定性曲線(見圖1)

1.3.4 微粒直徑

檢測方法(電鏡觀測法):將已包封好的微膠囊用電鏡觀測,然后將底片用圖像分析儀測定,可以得到微粒大小分布圖,求平均值。(見圖2)

1.3.5 體外釋放速率

檢測方法(連續流動法):采用連續流動裝置(見示意圖3)

釋放管為帶夾層的玻璃柱,夾層為37℃的恒溫水,將樣品置玻璃柱內的玻璃棉上,通過蠕動泵將釋放介質(模擬胃液)以5.5m l/h的流速打入玻璃柱內,浸沒樣品,釋放出的蒜素從接管處分批收集,從而計算出釋放速率(見圖4)

2 結果與討論

2.1 通過檢測結果,該產品包封達到75%,穩定性為兩年內大蒜素損失率不大于20%,微粒直徑平均50μm,在模擬胃液中14h釋放量為90%。

2.2 激性三道乳化法

由于大蒜素臭味和刺很重,滲透力也極強,所以對微膠囊化時的包埋效果要求很高。因此采用三道乳化法(機械乳化、均質乳化、超聲波乳化)對大蒜素和β-Cd的混合液進行乳化處理;通過400倍顯微鏡觀察其結構完整(見圖2),未發現R·Ziberboin所報道的微膠囊破裂圖相[5],說明包埋效果很好,更為重要的是,通過多重乳化可以形成復乳,具有兩層或多層的乳膜結構,所以可以更有效地控制大蒜素在體內的擴散速率,從而可以緩釋或控釋,起到“藥庫”的作用,而且微粒直徑一般小于50μm,適用于針劑。

2.3 凍干(冷凍干燥)

所謂冷凍干燥就是將已微膠囊化的大蒜素在-30℃—-40℃的超低溫下預先凍結,然后在低溫和真空的條件下加熱使其中的水分直接升華,并用冷凝的方法捕凝升華的水汽,從而達到干燥的目的。經過凍干的產品,不受高溫高壓的影響,因而大蒜素的化學、物理性質幾乎不會有什么改變,確保了產品的質量及穩定性,而且經凍干的物質呈多孔性疏松粉末,加水后立即復原,特別適合針劑藥物的干燥。

2.4 我國的大蒜資源豐富,提取大蒜素的工藝也比較簡單,所以研制大蒜素微膠囊化緩釋劑型可以為開發一種新型的綠色廣譜抗菌藥,甚至是防治癌癥的特種藥型提供新的思路。

[1]李雅菲,賴雁.大蒜素臨床應用的研究進展[J].成都醫學院學報, 2009,4(2).

[2]宋健,陳磊,李效軍.微膠囊化技術與應用[M].化學工業出版社,2001.

[3]陸彬.藥物新劑型與新技術[M].人民衛生出版社,1998.

[4]南京醫學院藥劑教研組.藥劑學[M].人民出版社,1963.

[5]R·Ziberboin.etal J·Food.Science,1986:5.

Study on Slow Release Dose-type ofM icro-capsu la ted SFE-A llic in

YuW ei,ZhouHai-bin,YangHai-ling
N ingbo L iwah Phar m aceutical Co.,L td N ingbo ZheJiang 315174

β-cyc lodetrin was used as a wallm aterial ofm icro-capsulated SFE-A llicin,the techno logical parameters for slow released dose-type ofm icrocapsu lated A llicin w as studied.

M icro-capsulated;Slow release dose-type;SFE-A llicin

R969.4

A

1007-8517(2010)15-0078-02

2010.04.15)

“國家科技攻關項目(196_98_D 097)”資助項目,項目名稱:大蒜SOD、蒜素微囊中試生產與研究,編號:98-D 097。

俞偉(1981-),女,助理工程師,主要從事藥物研究與開發,寧波立華制藥有限公司研究員。Tel:0574-88046962 13967857771 E-m ail:yuwei@lansen.com.cn