氣相色譜法測定六神丸中麝香酮含量

呂 霞 ，郭 青 ，鐘文英

(1.江蘇聯(lián)合職業(yè)技術(shù)學(xué)院連云港中醫(yī)藥分院，江蘇 連云港 222006;2.江蘇省食品藥品檢驗所，江蘇 南京 210008; 3.中國藥科大學(xué)，江蘇 南京 210009)

六神丸由麝香、蟾酥、人工牛黃等6味中藥組方，屬國家中藥保護(hù)品種，具有清涼解毒、消炎止痛等功效，常用于治療爛喉丹痧、咽喉腫痛、喉風(fēng)喉癰、小兒熱癤、癰瘍疔瘡、無名腫毒等癥。本品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中含量測定僅限于人工牛黃和蟾酥，處方中主藥麝香的主要成分麝香酮只有定性鑒別項，無含量測定要求[1-2]。筆者采用氣相色譜法測定六神丸中麝香酮含量，報道如下。

1 儀器與試藥

GC-2010型氣相色譜儀(日本島津)。麝香酮對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號為0819-200006);試劑(均為分析純);六神丸6批樣品和麝香陰性樣品(批號分別為EA10053，F(xiàn)A1003和FA1006的樣品由上海雷允上藥業(yè)有限公司提供;批號分別為050502，050503和050504的樣品及麝香陰性樣品由蘇州雷允上藥業(yè)有限公司提供)。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱:HP 50+石英毛細(xì)管柱(30 m ×0.53 mm，1 μm);柱溫:165℃;進(jìn)樣口溫度:150℃;檢測器溫度:190℃;載氣:N2;流速:2 mL/min;柱前壓:80 kPa;空氣:400 mL/min;氫氣:40 mL/min;尾吹:50 mL/min;分流比:2 ∶1;進(jìn)樣量:1 μL。

2.2 溶液配制

精密稱取麝香酮對照品適量，加乙酸乙酯制成每1 mL約含1 mg的對照品貯備液，再精密吸取適量，加乙酸乙酯稀釋成與供試品溶液濃度相當(dāng)?shù)膶φ掌啡芤?0.239 0 g/L);取六神丸適量，研細(xì)，取約0.3 g，精密稱定，精密加乙酸乙酯10 mL，搖勻，靜置30 min，濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液;取陰性樣品，按供試品溶液制備法制備陰性對照品溶液。

2.3 方法學(xué)考察

系統(tǒng)適用性試驗:取對照品、供試品、陰性對照品溶液，分別進(jìn)樣1.0 μL，色譜圖見圖1。可見，供試品溶液中麝香酮與雜質(zhì)峰完全分離，陰性對照品溶液無干擾。

線性關(guān)系考察:精密吸取麝香酮對照品溶液(1.195 g/L)1 mL，分別置 2，5，10，20，50 mL量瓶中，用乙酸乙酯稀釋至刻度，吸取 1 μL，分別注入氣相色譜儀，測定。以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)、相應(yīng)峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸方程為 Y=5 024 566X+55 194，r=0.999 7(n=5)。結(jié)果表明，麝香酮質(zhì)量濃度在23.90～1195.00μg/mL范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。

圖1 氣相色譜圖

精密度試驗:精密吸取2.2項下對照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次。結(jié)果麝香酮峰面積的 RSD為0.91%(n=6)。

穩(wěn)定性試驗:精密吸取2.2項下供試品溶液 10 μL，分別在 0，2，4，6，8，10，12，24 h 時按擬訂的色譜條件進(jìn)樣。結(jié)果峰面積的 RSD為2.11%(n=8)，表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

重復(fù)性試驗:取批號為050402的樣品，按2.2項下方法平行制備供試品溶液，進(jìn)樣測定。結(jié)果麝香酮的平均含量為4.066 9 mg/g，RSD 為 1.66%(n=6)。

加樣回收試驗:取已知含量的樣品(批號為050402)約0.15 g，精密稱定，分別按3個水平精密加入質(zhì)量濃度為0.597 5 g/L的麝香酮對照品溶液0.80，1.00，1.20 mL，按供試品溶液制備方法平行制備9份溶液，進(jìn)樣測定。結(jié)果見表1。

2.4 樣品含量測定

取樣品，分別按2.2項下方法制備供試品溶液，進(jìn)樣1 μL測定，采用外標(biāo)法計算含量。結(jié)果批號為050502，050503，050504，EA10053，F(xiàn)A1003，F(xiàn)A1006的樣品中麝香酮含量分別為0.012 7，0.010 3，0.008 3，0.003 5，0.004 9，0.005 1 mg/粒(n=4)。

表1 麝香酮加樣回收試驗結(jié)果(n=9)

3 討論

曾比較了苯、石油醚、無水乙醇、乙酸乙酯、甲醇5種溶劑提取麝香酮的效果，發(fā)現(xiàn)乙酸乙酯和文獻(xiàn)[1-2]中苯的提取效率均較高，結(jié)果基本一致。考慮到乙酸乙酯的毒性較小，故選用乙酸乙酯。

色譜條件和提取方法主要參照2005年版《中國藥典(一部)》中麝香的含量測定方法[3]，比較了HP50+和HP-5柱，結(jié)果HP50+柱的分離效果、峰形、理論板數(shù)較合適;還比較了浸漬提取和超聲提取兩種提取方法，發(fā)現(xiàn)結(jié)果一致，因此選擇了相對快速、簡單的浸漬提取方法，浸漬時間為30 min。含量測定結(jié)果表明，兩個廠家生產(chǎn)的麝香酮含量存在較大差異。

[1]WS3-B-3374-98，中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)·中藥成方制劑(第十八冊)[S].

[2]吳銀生.六神丸質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究[J].南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版)，2002，18(4):232-233.

[3]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2005:266.