促進難育奶牛受孕的技術措施

■ 李銘 吳柱月 顧國才 蔣玉秀 劉瑞鑫 羅蒙和 廣西畜牧研究所 ■ 黃恒 廣西牧草工作站

由各種原因引起的暫時性不育稱為難育，母牛難育直接影響到繁殖效率及養牛業的經濟效益[1]。2003～2007年，在生產實踐中，筆者對難育奶牛采取了相應的技術措施，促進了奶牛的發情和受孕，達到了較好的效果。現報告如下。

1 引起奶牛難育的主要因素

1.1 營養

營養是導致奶牛難育的重要因素。據報道，奶牛分娩后，采食高峰落后于泌乳高峰，奶牛機體內能量出現負平衡。擠奶和哺乳會刺激奶牛抑制體內CnRH和LH的分泌。能量不足則會加重這種抑制作用，最終導致奶牛不發情和難育。能量過度也會導致繁殖力下降，在泌乳末期或干乳期，過度飼養的奶牛會出現“肥胖綜合癥”，容易出現代謝性、感染性、消化性疾病和繁殖障礙，使產后發情配種延遲，造成難育[1]。

蛋白質對奶牛繁殖力的影響，受蛋白質來源、奶牛年齡、日糧能量水平調節等方面的影響。研究表明，飼喂高濃度的粗蛋白可降低繁殖力，日糧中粗蛋白含量過度增加，那么配種次數就會相應增加，空懷天數也會增加，導致難育[2]。

維生素和礦物質對奶牛繁殖力的影響，主要是通過調節體內各種物質的合成和代謝過程而引起的，間接地作用于生殖系統而造成不同程度的難育[1]。

1.2 環境變化

▲ 通過使用電風扇，減少熱應激，維持正常的生殖機能

季節變化對母牛繁殖力有明顯的影響，春季母牛卵巢上的卵泡數量多而大，容易懷孕。炎熱的夏季會導致母牛常不發情和短發情，而且夏季受胎率較低，胚胎死亡率較高。突然改變奶牛的生活環境，包括調欄、混群，會引起奶牛應激反應，影響生殖機能，從而造成難育。

1.3 疾病

引起難育的疾病包括生殖系統和全身性疾病，而以生殖系統疾病造成的難育為主。在實際工作中，生殖系統疾病主要表現為卵巢疾病和子宮炎癥。卵巢疾病主要是由于奶牛營養失調和使用大量性激素引起的，如卵巢囊腫、卵巢持久黃體、卵巢靜止等；子宮炎癥主要是由于流產、難產時助產、供體母牛沖胚、胎衣不下等引起的。

1.4 繁殖技術

配種工作組織不當或方法不對，也是造成奶牛難育的原因之一。對奶牛發情表現觀察不足或因工作疏忽大意觀察不到，可造成漏配或配種不及時，直接導致受胎率下降。人工輸精技術不良，精液處理不當也會導致奶牛的不孕。

2 采取的技術措施

2.1 實現能量、蛋白質的平衡

為了防止營養性難育的發生，應根據奶牛的體況制定相應的飼養管理方案，達到能量、蛋白質的平衡。根據當地的飼料來源和從外地購進的飼料情況，體況較瘦、表現營養不良的奶牛，在一定的時間內要加強營養的補給，力求營養均衡，即增加優質干草如苜蓿、柱花草和其它粗飼料如玉米青貯等的飼喂。體況較肥、表現為“肥胖綜合癥”的奶牛要減少能量飼料的飼喂量，特別是要減少精飼料飼喂，同時補充適量的粗飼料，并加大奶牛的運動量，每晝夜應讓其自由活動18h。根據奶牛的生理狀態在日糧中添加維生素ADE粉或注射補充維生素ADE，以及添加微量元素硒，有利于增加生殖道的抗感染力，提高配種時的受胎率和胚胎的成活率。鈣和磷的比例保持在（1.5～2.0）：1之間[1]。

2.2 保持飼養環境的相對穩定

保持牛群飼養環境相對穩定，不能隨意更換飼養場地、飼料種類和飼養管理人員。牛舍和周圍環境要保持清潔，且通風要良好。在炎熱季節要做好降溫工作，如使用電風扇、噴淋等措施，減少牛群的熱應激。要避開在炎熱季節里配種；在這個階段要做好預防接種工作，為在適宜的季節里發情配種做好準備。

2.3 子宮炎癥的治療

子宮炎癥治療的原則是抗菌消炎，促進吸收，制止感染擴散，排除分泌物，促進子宮收縮，恢復子宮機能[3]。

2.3.1 子宮沖洗療法

通過直腸檢查子宮，可以進行沖洗的，使用供體牛沖胚儀器來沖洗雙側子宮角。具體操作是采用二路式沖卵器沖洗。二路式沖卵器由帶氣囊的導管與單路管組成。導管用直腸把握法從子宮頸導入子宮角。導管中一路為注入和回收沖洗液用。通過氣囊導管打入空氣，使氣囊膨脹以固定導管在子宮角內的位置和防止沖洗液倒流。氣囊膨脹固定導管的位置盡量靠近子宮角的基部，以便沖洗到整個子宮角。沖洗液經單路管注入子宮角，每次30～60mL，然后將沖洗液回收。沖洗5次左右，回收液達到透明，就不必再沖洗，以免炎癥擴散。為更好地沖洗子宮，可以用直腸內的手掌輕輕擺動子宮，但不要用力按摩子宮角，以免炎癥擴散。

沖洗子宮時應注意：嚴格遵守操作規程與無菌原則[3]。沖洗液為生理鹽水，溫度應為45～50℃[3]，每500mL沖洗液要加入青霉素80萬單位，以防止生殖道再次感染。視具體情況可以隔天1次或3～5天沖洗1次，沖洗完畢后給子宮內注入適量的抗生素，每側20mL左右。這樣沖洗后注入抗生素處理2～4次有較好療效。

2.3.2 子宮內灌注療法

（1）抗生素

由于子宮感染病原菌復雜，在治療時難以對病原菌進行藥物敏感試驗，所以常常聯合使用抗生素，如土霉素與紅霉素配合，青霉素與鏈霉素配合等。藥液使用20mL左右，用無菌輸精器分別注入兩側子宮角。

（2）新宮得康

用無菌的輸精器將1支新宮得康平均分成2份，分別注入兩側子宮角，7天后重復1次，3或4次可達到療效。

（3）抗生素與新宮得康交叉使用

在使用抗生素注入子宮1天后，再用新宮得康1支注入子宮；或先使用新宮得康1支，7天后再使用抗生素。這樣反復3次左右也可以取得好的療效。

（4）露它凈與新宮得康聯合使用

先用無菌輸精器將露它凈注入雙側子宮角，讓子宮內分泌物排除，3天后再用同樣方法注入1支新宮得康，輕者2次可以痊愈，重者4或5次可以痊愈。

2.4 利用激素促進正常發情的技術

卵巢疾病主要為卵巢囊腫、卵巢持久黃體、卵巢靜止等，表現出不發情或發情不正常，技術熟練者可以通過直腸檢查和發情表象進行基本診斷。通過使用以下技術能促進奶牛的正常發情。

2.4.1 PG＋LHRH-A3肌肉注射法

▲ 患卵巢疾病的奶牛

PG即獸用前列腺素，由齊魯動物保健品廠生產，規格0.322mg/支；LHRH-A3，由寧波激素制品有限公司生產，規格25μg/支。這種技術適用于卵巢黃體囊腫和卵巢持久黃體等卵巢疾病。給奶牛肌肉注射PG 0.644mg后24～72h內觀察到發情的，可通過外觀觀察黏液和直腸檢查卵泡發育情況，確定奶牛配種時間。配種后1h內再肌肉注射50～75μg LHRH-A3。

2.4.2 FSH+PG＋LHRH-A3肌肉注射法

促卵泡素（FSH），分國產和進口2種。國產的由中國科學院動物研究所生產，規格為10mg/瓶；進口的由加拿大Vetrephaim Canada Inc生產，規格為400 mg/瓶（內容物含有大量佐劑）。這種技術適用于卵巢囊腫、卵巢靜止和卵巢持久黃體。FSH的使用量視奶牛體況而定，國產的使用3～5mg，進口的使用120～200mg，分3天做遞減肌肉注射。在注射FSH的第2天注射0.644mg PG，注射完FSH的48h內仔細觀察發情，有發情的檢查卵泡發育情況，確定奶牛配種時間。配種后肌肉注射50～75μg LHRH-A3。

2.4.3 PMSG+PG＋LHRH-A3肌肉注射法

PMSG由軍需醫學科學院軍事獸醫研究所生產，規格為1000國際單位/支。這種方法與2.4.2相似，PMSG的用量為500～700國際單位/頭。

以上3種方法可以起到治療難育奶牛卵巢疾病，促進正常發情的作用。如果奶牛有發情但經過直腸檢查卵泡發育不良，就應放棄輸精，等到下個情期有發情時再做人工輸精。

2.5 人工輸精技術措施

2.5.1 奶牛發情觀察和鑒定

每天2次（牛群從運動場回到欄舍和從欄舍去運動場）對牛群進行觀察。同時每天上午1次和下午1次要在欄舍對牛的后軀做仔細的觀察，重點在尾根毛是否凌亂，陰戶是否腫脹，是否流有黏液及靠近陰戶的尾根是否粘有黏液。有經驗的技術員可以通過這些觀察判斷奶牛是否發情。由于難育奶牛的發情表現不正常，所以，還要通過直腸檢查卵巢卵泡的發育來確定它的適時配種時間。

2.5.2 凍精解凍和檢查

凍精解凍要做到快取、快投、快溶解，讓凍精快速通過有害溫區-30～-10℃[4]。凍精解凍溫度在39～40℃間。在輸精之前要對本批次的凍精做顯微鏡檢查，質量必須達到中華人民共和國頒布的《牛冷凍精液》GB 4143-84國家標準，否則堅決不用。

2.5.3 輸精前做好子宮凈化

為了使子宮環境趨于理想化，有利于卵子的受精和胚胎的發育，可采用宮內藥物進行凈化，即在輸精前1h左右每頭牛用25mL生理鹽水溶解160萬單位青霉素和100萬單位鏈霉素的藥液，分半注入左右子宮角分叉處。

2.5.4 輸精時做到無菌操作

輸精器械必須保證無菌狀態，輸精時要保證無菌操作。在生產實踐中使用“蔣氏”細管輸精槍及“蔣氏”輸精外套來達到器械的無菌狀態。在輸精槍插入奶牛陰道時使用“蔣氏”輸精法操作[5]。如果在使用“蔣氏”輸精法不能將奶牛的陰門打開時，可以讓助手用雙手將奶牛陰戶向后向上拉扯，使奶牛陰道露出大面積清潔部位，再按照“蔣氏”輸精法操作也可達到無菌目的。

2.5.5 正確做好直腸檢查確定卵巢排卵

由于難育奶牛使用性激素促使其發情和排卵，并且多數是經產奶牛，不按常規排卵，即不能從陰戶外觀、黏液和時間推算來確定是否排卵。所以，要做直腸檢查，觸摸卵巢確定是否排卵。正確的做法是：要與第1次輸精相隔10～12h，如果沒有排卵再輸精1次，再做直腸檢查時也要相隔10～12h。連續輸精3次后直腸檢查仍沒有排卵的放棄輸精。因為3次輸精后不排卵的卵泡基本成閉鎖狀態。

2.5.6 正確使用LHRH-A3

在奶牛輸精后1h內，視奶牛發情和機體狀況每次給予肌肉注射LHRH-A3 50μg或75μg不等。奶牛經過直腸檢查不排卵要繼續輸精的，還要繼續注射LHRH-A3 。

3 結語

3.1 奶牛難育是一項綜合性、復雜性的難題，引起的因素包括營養、環境、季節、奶牛生物學特性、奶牛疾病以及技術人員等。使難育奶牛受孕不是一朝一夕的事情，要從多角度、多方面考慮和采取綜合性的技術措施。

3.2 筆者使用的子宮沖洗方法，對慢性和隱性子宮炎有很好的清理炎癥物和治療的作用。但是這種方法需要沖胚的儀器及熟練的沖胚技術人員操作，否則適得其反，容易弄傷子宮加劇炎癥。子宮沖洗時要避開奶牛持續發情時間，因為發情時子宮在性激素的作用下處于充血狀態，并且輸卵管和子宮角的宮管結合部也處于開放狀態，這個時間沖洗易加重子宮炎癥和輸卵管炎[6]。

3.3 對奶牛使用亞硒酸鈉、維生素E肌肉注射或日糧中添加維生素E和硒或添加維生素ADE，對預防奶牛的胎衣不下、子宮炎癥有很好的作用[7]，從而可以預防奶牛的難育。

3.4 在使用激素FSH 和PMSG時，由于奶牛本身生物學特性的原因，導致一側卵巢有多個卵泡發育，并且直腸檢查時不易確定其數量，所以會出現有多胞胎流產現象的發生。一般采取的預防措施是：卵巢2側有卵泡發育的，只往1側子宮角輸精。

[1] 穆秀明，趙月平.母牛難育的預防.黑龍江動物繁殖，2002（4）：24～25

[2] 李勝利.奶牛繁殖疾病的營養調理.見：第二屆中國奶牛發展大會報告暨論文集，2006（6）：18～20，108～116

[3] 魏鎖成，馬瑞有.牛子宮內膜炎的致病因素及臨床治療.黃牛雜志，2006（3）：71～73

[4] 伍麗仙.提高牛人工授精受胎率技術.黃牛雜志，2006（6）：74～76

[5] 蔣如明，韋英明，林澤繼.牛和水牛人工授精中蔣氏輸精方法介紹.見：中國畜牧獸醫學會動物繁殖分會第十三屆學術研討會論文集，2006（7）：476

[6] 張新慧、王振綱.奶牛子宮炎治療需要注意的幾個問題.見：中國畜牧獸醫學會動物繁殖分會第十三屆學術研討會論文集，2006（7）：548

[7] 黃光云，王啟芝，文信旺等.亞硒酸鈉維生素E預防奶牛胎衣不下的效果觀察.廣西畜牧獸醫，2007（1）：28～29