余蓉暉
(湖南省常德市第一人民醫院中心實驗室,湖南常德 415000)
急性單核細胞白血病按FAB分型[1]分為M5a和M5b,尤其M5a在形態學上易與M1混淆,通過細胞酯酶染色及免疫分型等檢查有助于M5的診斷。非特異性酯酶可存在于多種血細胞中,只有單核細胞對NaF敏感而被抑制。CD14則是單核細胞系特異性的表面標志。我們對31例AML-M5患者的NAE染色、NaF抑制試驗和CD14表達情況進行回顧性分析,現總結如下:
31例均經我科中心實驗室確診,根據FAB分型的急性單核細胞白血病M5a10例和M5b21例。
非特異性酯酶染色應用文獻[2]中的染色方法,基質液以α-醋酸萘酚(α-NAE,國產)為底物,重氮鹽為堅固蘭B,同時做NaF抑制試驗。標本均為骨髓細胞涂片。免疫學分型應用流式細胞術,儀器和試劑均來自于美國BD公司。
α-NAE染色結果陽性反應為細質內呈灰黑色彌漫性或黑色顆粒沉淀,以計數100個原幼單核細胞陽性率作為檢測結果;NaF抑制試驗,以計數抑制后陽性率作為檢測結果。
31例患者α-NAE均呈陽性反應,最高陽性率達96%(M5a),最低陽性率為13%(M5b),并且所有病例均對NaF敏感而被抑制。α-NAE染色結果陽性率明顯,高于NaF抑制后的陽性率,差異具有統計學意義(P<0.01)。
31例AML-M5患者CD14表達(>20%)8例,弱表達(<20%)1例,均為M5b型,其表達率為22.65%,見表1。

表1 31例AML-M5患者的免疫分型結果(例)
細胞化學染色是應用涂片染色的方法來研究細胞化學成分的性質,包括各種蛋白質、酶類、脂類、糖類、無機鹽和核酸等。它能在形態學的基礎上進一鑒別各類血液細胞,為某些血液病(白血病、淋巴瘤、貧血、血紅蛋白病及組織細胞疾病)的診斷和鑒別治療提供依據。酯酶是一組具有較大PH范圍的水解酶類,在骨髓各系細胞中分布不盡相同,按其對不同脂肪酸水解選擇性不同,可分為非特異性酯酶和特異性酯酶兩大類。非特異性酯酶可有在于多種血細胞中,只有單核細胞系對NaF敏感而被抑制。我們應用中性非特異性酯染色法,結果顯示,此方法有較高的敏感性和特異性,對以FAB分型區分粒系和單核系白血病具有重要的診斷和鑒別診斷價值。隨著單克隆抗體(McAb)技術不斷發展,一些免疫標志物在白血病分型中有較高的特異性[3],CD14特異性較好,但敏感性較差。本組病例CD14表達率為22.65%,與國內報導道的20%左右的表達率相一致。我們還發現對分化較低的單核細胞即M5a,α-NAE染色陽性反映較強,胞質呈黑色顆粒狀沉淀(+++~++++);而CD14表達則相反,對分化較好的單核細胞即M5b較為敏感。
[1]張文南.血液病診斷及療效標準[M].第2版.北京:科學出版社,1997:174-175.
[2]李家增,王鴻利,韓忠朝.血液實驗學[M].上海:上海科學技術出版社,1997:59-60.
[3]湯美華,周 宇,沈德誠,等.從AML細胞表面標記特點看AML、ALL鑒別時單招的選擇[J].中華血液學雜志,1994,15:466-468.