香櫞種子油脂成分的GC-MS分析

董麗榮，李忠榮，閻玉鑫，張樹云，劉曉秋，邱明華*

（1.中國科學院昆明植物研究所植物化學與西部植物資源持續(xù)利用國家重點實驗室，云南 昆明 650204；2.沈陽藥科大學中藥學院，遼寧 沈陽 110016；3.玉溪市食品藥品檢驗所，云南 玉溪 653100）

香櫞種子油脂成分的GC-MS分析

董麗榮1，2，3，李忠榮1，閻玉鑫1，張樹云3，劉曉秋2，邱明華1*

（1.中國科學院昆明植物研究所植物化學與西部植物資源持續(xù)利用國家重點實驗室，云南 昆明 650204；2.沈陽藥科大學中藥學院，遼寧 沈陽 110016；3.玉溪市食品藥品檢驗所，云南 玉溪 653100）

目的：分析香櫞種子油的化學成分，為其進一步開發(fā)利用提供科學依據(jù)。方法：利用GC-MS聯(lián)用技術對香櫞種子的油脂成分進行分離分析，用GC面積歸一化法計算各組分相對百分含量。結果：鑒定出香櫞種子油的27種化學成分，占87.18%。主要成分為亞油酸（34.45%）、油酸（20.78%）、棕櫚酸（20.76%）和己二酸（4.88%）；微量成分為烯烴類（0.12%）和稠環(huán)芳烴類化合物（0.86%）。

香櫞種子油；化學成分；GC-MS

香櫞為蕓香科柑橘屬枸櫞CitrusmedicaL.或香圓CitruswilsoniiTanaka的干燥果實，為傳統(tǒng)中藥材，始載于《名醫(yī)別錄》。香櫞味辛、苦，性酸、溫。歸肝、脾、肺經(jīng)，具有疏肝理氣，寬中，化痰功能，用于肝胃氣滯，胸脅脹痛，脘腹痞滿，嘔吐噫氣，痰多咳嗽［1］。香櫞果肉還可加工成蜜餞等用于食用。云南山地多，為高原季風氣候，日照充足，日間溫差大，適合香櫞的生長。香櫞分布廣泛，資源豐富，主要分布于云南省滇西（大理、保山）、滇中、滇南（普洱，西雙版納）、滇東南等地［2］，多為野生或農(nóng)家自種［3］，現(xiàn)在保山、玉溪都有規(guī)模化種植，作為水果或加工成藥材出售，但經(jīng)濟效益不佳，影響了農(nóng)戶的種植積極性。

為提高香櫞產(chǎn)業(yè)的經(jīng)濟效益，應關注香櫞的綜合應用。已有關于香櫞及同屬植物葉油、果油的報道，主要集中在揮發(fā)油部分［4-6］，柑橘屬植物精油主要含檸檬烯、橙花醛、香葉醛等，香氣宜人并具有凈化空氣、醒腦提神、鎮(zhèn)靜、抗腫瘤、抑菌等作用，廣泛應用于食品化妝品及其他香料工業(yè)中［7］。柑橘屬植物種子，因含具有抗癌活性的檸檬苦素類物質(zhì)［8］，已經(jīng)引起關注。油脂類也是種子的主要成分，目前有文獻報道了柚子［9］及檸檬［10］種子油脂的主要化學成分，發(fā)現(xiàn)含有大量的不飽和脂肪酸，但未涉及油脂中的小量成分，更未見香櫞種子油脂成分的報道。本文采用GC-MS對香櫞種子油脂成分進行全面分析，為更好地開發(fā)利用香櫞資源提供依據(jù)。

1 材料與儀器

樣品采自云南省玉溪市峨山縣錦屏鄉(xiāng)，為當?shù)剞r(nóng)戶種植的處于半野生狀態(tài)下的成熟果實剝?nèi)ス夂笏玫姆N子。植物標本經(jīng)昆明植物所陳書坤研究員鑒定為蕓香科柑桔屬植物香櫞C.medica.的果實。丙酮（工業(yè)級，重蒸后使用），正己烷（分析純）；氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）儀（Angilent GC6890N／MS5973）。

2 方法

2.1 油脂的提取

取干燥的香櫞種子粉112g置1 000mL圓底燒瓶中，加丙酮500mL，浸泡過夜后，于50℃水浴回流提取3次，每次3h，過濾，合并濾液，提取液減壓回收丙酮后得油狀物，加正己烷200mL分3次洗溶，合并正己烷，回收溶劑，得到油脂21.2g，出油率（E）為18.9%。

E＝萃取所得油的質(zhì)量／原料的質(zhì)量×100%

2.2 種子油的甲酯化

取香櫞種子油約0.1g，置于潔凈的25mL刻度試管中，加入3mL新鮮配制的0.5mol·L－1的KOH／甲醇溶液混勻，再加入5mL正己烷和40mg氧化鎂，搖勻，將試管置40℃水浴加熱15min；冷卻后，加入3mL蒸餾水，充分振搖，靜置，分層，取上清液于另一潔凈玻璃容器中，加入無水硫酸鈉（0.2g），去除微量水分，用作GC-MS分析樣品。

2.3 GC-MS分析條件

色譜柱：HP-5MS毛細管石英柱（30m×0.25mm，0.25μm），載氣：He，進樣口溫度：270℃，接口溫度：280℃；恒定柱流量：1mL·min－1；分流比18∶1。離子源：EI，電子能量：70eV，掃描范圍：35～455amu。程序升溫：通過xcalibur工作站NIST 98和Wiley 275譜圖庫進行檢索，確認各化合物；按峰面積歸一化法計算各成分的含量。

3 結果

見表1。

表1 香櫞種子油化學成分的GC-MS分析結果

在本實驗條件下，香櫞種子出油率為18.9%。從種子油的甲酯化產(chǎn)物中鑒定出27個化合物，占油脂甲酯化物總量的87.18%，有15個脂肪酸酯類衍生物，占油脂甲酯化物總量的84.77%；其中飽和脂肪酸28.23%，不飽和脂肪酸56.54%；主要脂肪酸分別為己二酸4.88%、棕櫚酸20.76%、油酸20.78%、亞油酸34.45%和硬脂酸2.04%。另有微量的烯烴類化合物3個，占分析總量的0.12%，它們主要是具有濃烈青草氣味的（E）-5-甲基-庚-4-烯-3-酮、檸檬烯、5-甲基-1-苯基-1，3，4-己三烯；稠環(huán)芳烴類化合物6個，占分析總量的0.86%，它們分別是具有香樟木氣味的萘、1-甲基萘、2-甲基萘、2，7-二甲基萘、2，3-二甲基萘和1，6-二甲基萘。

4 討論

27個化合物中，己醛二甲基乙縮醛、2，4-己二烯酸甲酯、己二酸二甲酯、4-甲基苯磺酸、7-壬酰胺、15-羥基-十五碳酸，14-甲基-十七烷酸甲酯，10-十一碳烯酯及6個稠環(huán)芳烴類化合物均是首次從香櫞中鑒定得到。2，4-己二烯酸又名山梨酸，具有抑制微生物生長繁殖的作用，對酵母、霉菌和許多真菌都具有抑制作用，是一種高效無毒防腐防霉劑［11］；己二酸又名肥酸，可作各種食品和飲料的酸化劑；甲基萘可作表面活性劑、減水劑、分散劑、藥物等有機合成的原料，毒性比萘小［12］。

香櫞種子油的主成分棕櫚酸、油酸、亞油酸含量與香櫞果實油［13］及同屬植物柚子［9］、檸檬［10］種子油相近。同屬植物果皮揮發(fā)油［6，13］的提取率均低于1.5%，相比較而言，香櫞種子出油率高（達18.9%），且含少量檸檬烯，同樣具有宜人的香氣，并含有較多的不飽和脂肪酸，香櫞種子油中亞油酸和油酸的總含量達55.2%。亞油酸是人體生長和健康所必需的脂肪酸，具有調(diào)節(jié)血脂、抗心率失常、抗高血壓、抗炎及調(diào)節(jié)糖代謝方面的藥理作用［11］。不飽和脂肪酸還具有抗氧化、抗衰老作用。如橄欖油，由于具有高濃度的不飽和脂肪酸，被譽為“液體黃金”，廣泛應用于保健和美容化妝品中［12］。香櫞種子油中還含有少量萘等稠環(huán)芳烴類化合物，在以往的柑橘屬相關文獻中從未報道，該類化合物具有一定毒性，在油脂中含量＜1%，加上分子量小，具有揮發(fā)性，容易被生物降解，開發(fā)利用香櫞種子油還是安全的。因柑橘屬植物種子還含有檸檬苦素、黃酮、維生素E等［9］活性化合物，且資源豐富，原料價廉易得，具有很大的開發(fā)潛力。

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GC-MS Analysis of Oil from Seeds ofCitrus MedicaL.

Dong Lirong1，2，3，Li Zhongrong1，Yan Yuxin1，Zhang Shuyun3，Liu Xiaoqiu2，Qiu Minghua1
（1.State Key Laboratory of Phytochemistry and Plant Resources in West China，Kunming Institute of Botany，Chinese Academy of Sciences，Kunming Yunnan650204，China；2.School of Traditional Chinese Materia Medica，Shenyang Pharmaceutical University，Shenyang Liaoning110016，China；3.Yuxi Institute for Food and Drug Control，Yuxi Yunnan653100，China）

Objective：To provide the fundamental data for the further development ofCitrus medicaseeds.Methods：The chemical constituents ofCitrus medicaseed oil were separated and identified by GC-MS，and the relative content of each component was calculated by the area normalizationmethod.Results27 compounds inCitrus medicaseed oil were identified，which accounted for 87.18%of the oil.The main constituents was 1inoleic acid（34.45%），oleic acid（20.78%），palmatic acid（20.76%），and hexanedioic acid（4.88%）.The trace elements were olefins（0.12%）and polycyclic aromatic compound（0.86%）.

Citrus medicaL.，Seed oil，Chemical constituents，GC-MS

*邱明華，Tel：（0871）5223255，E-mail：mhchiu＠m(xù)ail.kib.ac.cn

2010-04-20）