紫外光度法測定增鮮味精中呈味核苷酸二鈉的含量

徐 瑋，譚 紅，宋光林，何錦林

（1.貴州大學(xué)，貴州貴陽550002；2.貴州省理化測試分析研究中心，貴州貴陽550002）

紫外光度法測定增鮮味精中呈味核苷酸二鈉的含量

徐 瑋1，譚 紅2，宋光林2，何錦林2

（1.貴州大學(xué)，貴州貴陽550002；2.貴州省理化測試分析研究中心，貴州貴陽550002）

5′－肌苷酸二鈉（Ionosine－5′－monophosphate，簡稱IMP）和5′－鳥苷酸二鈉（Guanosine－5′－onophosphate，簡稱GMP）在250nm處有較強(qiáng)吸收，運(yùn)用紫外分光光度法測定增鮮味精中呈味核苷酸二鈉（I+G）的含量。當(dāng)HCl濃度在1mol/L以下，樣品濃度為0.01～0.25g/L時，標(biāo)準(zhǔn)曲線在250nm處的相關(guān)系數(shù)達(dá)到0.999，平均回收率為97.4%，RSD為3.59%。結(jié)果表明，該法是一種簡單、方便、快捷的測定方法。

呈味核苷酸二鈉，5′－肌苷酸二鈉，5′－鳥苷酸二鈉，紫外分光光度法

1.1 材料與儀器

鹽酸 分析純，成都科龍化工試劑廠；5′－肌苷酸二鈉標(biāo)準(zhǔn)物（IMP） I0036，梯希愛（上海）化成工業(yè)發(fā)展有限公司；5′－鳥苷酸二鈉標(biāo)準(zhǔn)物（GMP）G3877，TOKYO CHEMECAL INDUSTRYCO LTD；味精市售；所用水 均為蒸餾水。

紫外－可見分光光度計（Agilent 8452）。

1.2 實驗方法

1.2.1 試劑的制備 稱取GMP標(biāo)準(zhǔn)物0.2g（精確至0.1mg）于燒杯中，用適量水溶解并用0.01mol/L HCl定容至100mL，作為GMP標(biāo)準(zhǔn)液。同樣，配制IMP標(biāo)準(zhǔn)液。取少量，按1∶1將GMP和IMP標(biāo)準(zhǔn)液混合，得到G+I標(biāo)準(zhǔn)液。

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線方程的確定 采用溶液倍數(shù)稀釋法，用0.01mol/L HCl分別將GMP、IMP和G+I標(biāo)準(zhǔn)液于50mL容量瓶中稀釋，配制成稀釋倍數(shù)為1、2、4、 8、16、32、64、128的系列溶液，測量其吸光度。當(dāng)濃度在0.01～0.25g/L時，各曲線有較好的相關(guān)性。用濃度對吸光度作圖（如圖1～圖3），得到標(biāo)準(zhǔn)方程：250nm時，YG+I=14.98XG+I+0.0749，R=0.999；YG= 12.258XG+0.0283，R=0.999；YI=17.827XI+0.013，R=0.999。

表1 重現(xiàn)性實驗結(jié)果

圖1 G+I在250nm時的標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖2 GMP在250nm時的標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖3 IMP在250nm時的標(biāo)準(zhǔn)曲線

2 結(jié)果與討論

2.1 可行性分析

精確稱取I+G、IMP、GMP適量，用0.01mol/L的HCl溶液將其稀釋至一定的濃度，以0.01mol/L HCl溶液作空白，在200～350nm范圍內(nèi)掃描（見圖4）。由圖4可知，在250nm時，I+G、IMP、GMP都有較強(qiáng)的吸收，選用250nm作為本實驗的吸收波長。同時，GMP在280nm處也有著明顯的吸收，當(dāng)測定GMP時也可選用280nm，其標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為：y=8.0209x－0.0491，R2=0.9992。

2.2 加和性實驗

分別測定線性濃度范圍內(nèi)的GMP和IMP標(biāo)準(zhǔn)液在250nm處的吸光度，相應(yīng)波長處的吸光度之和為A0，再配制按不同比例混合的兩種溶液的混合液，測定其在250nm處的吸光度A，通過計算，|A－A0|/A均小于0.1，表明體系吸光度加和性較好。

圖4 紫外吸收光譜圖

2.3 重現(xiàn)性實驗

取濃度為0.13、0.063、0.032g/L的混合標(biāo)準(zhǔn)液，于不同時間段測定其吸光度，其變化較小（表1），說明實驗在0～8h內(nèi)有較好的重現(xiàn)性。

2.4 回收率實驗

取50mg谷氨酸鈉（MSG）作為雜質(zhì)。加入不定量的G+I標(biāo)準(zhǔn)物，使其占整個樣品的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%～5%，用0.01mol/L HCl將其溶解并定容至50mL，測量其吸光度（如表2），平行測量三次，平均回收率為97.4%，RSD為3.59%，結(jié)果較為滿意。

表2 回收率實驗結(jié)果

2.5 樣品測定

取三個批次的味精樣品，精確稱量0.5000g，用HCl溶解并定容至100mL。每批樣品平行測定3次，在250nm處測量其吸光度，計算結(jié)果見表3。

表3 味精樣品測定結(jié)果（n=3）

3 結(jié)論

通過本實驗可知，溶劑濃度和樣品濃度對實驗有很大影響。當(dāng)HCl濃度為0.01mol/L，樣品濃度在0.01～0.25g/L時，得到標(biāo)準(zhǔn)方程：250nm時，YG+I= 14.98XG+I+0.0749，R=0.999；YG=12.258XG+ 0.0283，R=0.999；YI=17.827XI+0.013，R=0.999。通過回收率實驗可得，平均回收率為97.4%，RSD為3.59%，實驗具有較好的準(zhǔn)確性。實驗在0～8h內(nèi)有較好的重現(xiàn)性。︱A－A0︱/A均小于0.1，表明體系吸光度加和性較好。因此，該方法不失為一種簡單、方便、快捷的測定手段。

［1］杜琨，張亞寧，方多.呈味核苷酸及其在食品中的應(yīng)用［J］.中國釀造，2005（10）：50－52.

［2］黃亞光，黃永嫦，王煥章，等.雙波長分光光度法測定呈味核苷酸二鈉混合物含量［J］.食品與發(fā)酵工業(yè)，2004，30（7）：108－111.

［3］鄭勝彪，唐婧.紫外分光光度法同時測定雞精中谷氨酸鈉和呈味核苷酸［J］.中國調(diào)味品，2009，34（5）：92－94.

［4］GB/T 10795－1989，食品添加劑呈味核苷酸二鈉［S］.

Determination of disoduim 5′－ribonucleotide（I+G）in the monosodium glutamate by UV spectrophotometry

XU Wei1，TAN Hong2，SONG Guang－lin2，HE Jin－lin2
（1.Guizhou University，Guiyang 550002，China；2.GuiZhou Research Center of Physical Test And Chemical Analysis，Guiyang 550002，China）

Disodium 5′－Inosine（IMP）and disodium 5′－guanosine（GMP）have a strong absorption at 250nm，using UV spectrophotometry to determine the content of disoduim 5′－ribonucleotide（I+G）in the monosodium glutamate. When the concentration of HCl was lower than 0.01mol/L，and the sample solution contained 0.01～0.25g/L，The correlation co－efficient of standard curve reached 0.999 at 250nm.The average recovery was 97.4%，the RSD was 3.59%.The results indicated that the method was simple，rapid and convenient.

disoduim 5′－ribonucleotide（I+G）；disodium 5′－inosinate（IMP）；disodium guanosine 5′－monophosphate（GMP）；UV spectrophotometry

TS264.2+3

A

1002－0306（2010）12－0344－03

呈味核苷酸二鈉（I+G）是一種新型的高級調(diào)味劑，主要包括 5′－肌苷酸二鈉（Ionosine－5′－monophosphate，簡稱 IMP）和 5′－鳥苷酸二鈉（Guanosine－5′－onophosphate，簡稱GMP），與味精（谷氨酸鈉MSG）混合時產(chǎn)生協(xié)同效應(yīng)（又稱相乘作用），使鮮度提高數(shù)倍至數(shù)十倍；同時核苷酸二鈉對甜味、肉味有增效作用，對咸、酸、苦味及腥、焦味有抑制作用，在食品工業(yè)生產(chǎn)中越來越受到重視和歡迎［1］。但由于檢測手段不完善，檢測儀器昂貴、操作復(fù)雜等原因，用戶很難快速準(zhǔn)確地判定產(chǎn)品質(zhì)量。GMP和IMP在250nm處有較強(qiáng)吸收，我們采用紫外分光光度法，測定標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度，得出GMP、IMP和I+G在一定濃度范圍內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算增鮮味精中GMP、IMP和I+G的含量，并對其測量條件進(jìn)行了一些探討，為用戶提供一定的參考［2－4］。

1 材料與方法

2010－02－01

徐瑋（1984－），男，碩士，從事化學(xué)分析與檢測方面的研究。